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1、u 食品中灰分和有关元素的分析食品中灰分和有关元素的分析u 保健食品中功效成分的检验保健食品中功效成分的检验本次授课内容本次授课内容u 一、概述一、概述u 二、粗多糖的测定（重点）二、粗多糖的测定（重点）u 三、原花青素的测定（重点）三、原花青素的测定（重点）u 四、红景天苷、总黄酮的测定四、红景天苷、总黄酮的测定 一、概述一、概述v保健食品的概念保健食品的概念v保健食品的特征保健食品的特征v保健食品相关技术法规保健食品相关技术法规 保健食品保健食品是指具有特定保健功能或者以是指具有特定保健功能或者以补充维生素、矿物质为目的的食品。即适宜补充维生素、矿物质为目的的食品。即适宜于特定人群食用，具
2、有调节机体功能，不以于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或者慢性危害的食品。性、亚急性或者慢性危害的食品。保健食品注册管理办法（试行）保健食品注册管理办法（试行）保健食品的概念保健食品的概念保健食品的特征保健食品的特征1.1.必须具备食品的基本特征必须具备食品的基本特征，应无毒无害，符合应有，应无毒无害，符合应有的营养卫生要求。的营养卫生要求。2.2.必须具有特定的保健功能必须具有特定的保健功能，这种功能必须是明确的，这种功能必须是明确的，具体的，有针对性的，经科学验证是肯定的。具体的，有针对性的，经科学验
3、证是肯定的。3.3.是针对特定人群设计的是针对特定人群设计的，食用范围不同于一般食品，食用范围不同于一般食品，如延缓衰老的保健食品，适宜用于中老年人。如延缓衰老的保健食品，适宜用于中老年人。4.4.是以调节机体功能为主要目的是以调节机体功能为主要目的，而不是以治疗疾病，而不是以治疗疾病为目的。为目的。保健食品相关技术法规保健食品相关技术法规保健食品注册管理办法保健食品注册管理办法保健食品功能学检验机构认证与管理办法保健食品功能学检验机构认证与管理办法保健（功能）食品通用标准保健（功能）食品通用标准保健食品功能学评价程序和检验方法保健食品功能学评价程序和检验方法保健食品评审技术规程保健食品评审技
4、术规程保健食品通用卫生要求保健食品通用卫生要求保健食品标识规定保健食品标识规定保健食品企业良好生产规范保健食品企业良好生产规范 二、粗多糖的测定二、粗多糖的测定 分光光度法分光光度法苯酚苯酚硫酸法（常用的方法）硫酸法（常用的方法）硫酸硫酸蒽酮蒽酮3 3，5 5二硝基水杨酸分光光度法二硝基水杨酸分光光度法苯酚苯酚硫酸法测粗多糖硫酸法测粗多糖1.1.原理原理 保健食品中的保健食品中的粗多糖粗多糖用乙醇沉淀，再用碱用乙醇沉淀，再用碱性硫酸铜沉淀后，与性硫酸铜沉淀后，与苯酚苯酚-硫酸硫酸反应显色，于反应显色，于485nm处以葡萄糖作标准处以葡萄糖作标准，比色定量。，比色定量。2.2.样品处理样品处理
5、样品样品加水于加水于沸水浴上加热沸水浴上加热2h2h，冷却后定容，混匀，过滤，冷却后定容，混匀，过滤，弃除滤液，收集滤液，准确取一定量滤液，加弃除滤液，收集滤液，准确取一定量滤液，加无水乙醇无水乙醇，混匀、离心、弃去上清液，残渣用混匀、离心、弃去上清液，残渣用80%80%乙醇洗涤离心后加水乙醇洗涤离心后加水溶解定容；再吸取上述试液，溶解定容；再吸取上述试液，加入碱性硫酸铜加入碱性硫酸铜，煮沸，离，煮沸，离心后残渣用硫酸溶液溶解并加水定容。心后残渣用硫酸溶液溶解并加水定容。乙醇：乙醇：沉淀多糖，去除水溶性单糖沉淀多糖，去除水溶性单糖 碱性硫酸铜：碱性硫酸铜：选择性的从样品中沉淀含葡聚糖的多糖，选
6、择性的从样品中沉淀含葡聚糖的多糖，消除了干扰。消除了干扰。3.3.测定方法测定方法 在处理好的样品液中，在处理好的样品液中，加入苯酚溶液和浓硫酸加入苯酚溶液和浓硫酸，混匀，煮沸并冷却后在混匀，煮沸并冷却后在485nm485nm波长处以试剂空白为波长处以试剂空白为参比，参比，测定吸光度值测定吸光度值。以葡聚糖为标准品以葡聚糖为标准品，按上述方法操作后，以吸光，按上述方法操作后，以吸光度值对葡聚糖含量度值对葡聚糖含量绘制标准曲线绘制标准曲线，根据标准曲线，根据标准曲线，计算样品中粗多糖的含量。计算样品中粗多糖的含量。原原花青素花青素测定测定一、概述一、概述原花青素原花青素是一大类是一大类多酚类化合
7、物多酚类化合物的的总称总称。按聚合度大小，可分为单体、低聚和高聚原花青素。按聚合度大小，可分为单体、低聚和高聚原花青素。功效：功效：具有抗氧化、保护心血管、预防高血压、抗肿瘤、具有抗氧化、保护心血管、预防高血压、抗肿瘤、抗突变、美容等功能。抗突变、美容等功能。来源：来源：葡萄籽葡萄籽/皮、松树皮、山楂、银杏、可可豆等。皮、松树皮、山楂、银杏、可可豆等。二、原花青素的测定二、原花青素的测定测测定定方方法法 分光光度法（常用分光光度法（常用:铁盐催化分光光度法）铁盐催化分光光度法）薄层色谱法薄层色谱法 HPLCHPLC法法 HPLC-MSHPLC-MS 铁盐催化分光光度法铁盐催化分光光度法1.1.
8、原理原理 原花青素原花青素经热酸处理后，并在硫酸铁铵的催化经热酸处理后，并在硫酸铁铵的催化作用下作用下水解水解生成红色的生成红色的花青素离子花青素离子，在最大吸收波，在最大吸收波长长546nm546nm处测定吸光度值，计算试样中原花青素的处测定吸光度值，计算试样中原花青素的含量。含量。2.2.样品处理样品处理固体样品：磨碎固体样品：磨碎、混匀后加入、混匀后加入甲醇甲醇，用，用超声波提取超声波提取，加甲醇定容，摇匀，离心后取上清液；加甲醇定容，摇匀，离心后取上清液；含油试样：含油试样：用用甲醇甲醇分数次搅拌分数次搅拌洗涤洗涤，直至甲醇提取，直至甲醇提取液无色，加液无色，加甲醇甲醇定容，备用；定容
9、，备用；口服液：口服液：吸取适量样液，吸取适量样液，直接加甲醇定容直接加甲醇定容，备用。，备用。3.3.测定方法测定方法 将将正丁醇与盐酸正丁醇与盐酸按按9595：5 5的体积比混合后，加的体积比混合后，加入入硫酸铁铵硫酸铁铵溶液，再加入样液，混匀，置沸水浴回溶液，再加入样液，混匀，置沸水浴回流，流，准确加热准确加热40min40min后后，立即置冰水中冷却，于，立即置冰水中冷却，于546nm546nm波长测定吸光度值。波长测定吸光度值。以原花青素为标准品以原花青素为标准品，按上述方法操作后，以吸光，按上述方法操作后，以吸光度值对原花青素含量度值对原花青素含量绘制标准曲线绘制标准曲线，根据标准
10、曲线，根据标准曲线，计算样品中原花青素的含量。计算样品中原花青素的含量。4.4.方法说明方法说明（1 1）水解温度水解温度100100，加热时间，加热时间40min40min，花色素含量，花色素含量最高，所以要严格控制操作时的水解温度和时间；最高，所以要严格控制操作时的水解温度和时间；（2 2）硫酸铁铵起催化剂硫酸铁铵起催化剂的作用，未使用铁盐比使用的作用，未使用铁盐比使用铁盐，样品的测定值降低铁盐，样品的测定值降低40%40%；（3 3）本法最佳）本法最佳线性范围是线性范围是3 3150g/mL150g/mL。红景天苷的测定红景天苷的测定一、概述一、概述性质：性质：红景天苷（红景天苷（C C
11、1414H H2020O O7 7),),无色透明针状晶体无色透明针状晶体，溶溶于水、乙醇、正丁醇于水、乙醇、正丁醇，微溶于丙酮、乙醚；，微溶于丙酮、乙醚；酸性条酸性条件下件下，水浴加热回流，水浴加热回流，可以水解可以水解。来源：来源：是植物是植物红景天红景天中的中的有效成分有效成分功效：功效：抑制肿瘤、抗癌、促进细胞免疫、降血糖、抑制肿瘤、抗癌、促进细胞免疫、降血糖、保护神经细胞和肝脏、防辐射等等。保护神经细胞和肝脏、防辐射等等。二、红景天苷的测定二、红景天苷的测定测测定定方方法法 高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLCHPLC法）法）分光光度法分光光度法 气相色谱法（气相色谱法（GC)G
12、C)HPLCHPLC法测红景天苷法测红景天苷一、原理 保健品中的保健品中的红景天苷红景天苷用用甲醇超声波提取甲醇超声波提取，经，经滤膜过滤后，以滤膜过滤后，以甲醇甲醇0.02mol/L0.02mol/L乙酸钠溶液为流乙酸钠溶液为流动相动相，用，用C C1818柱分离柱分离，于，于215nm215nm波长处检测，以保留波长处检测，以保留时间定性，以峰高或峰面积定量。时间定性，以峰高或峰面积定量。配置配置红景天苷标准溶液红景天苷标准溶液，绘制标准曲线绘制标准曲线，根据，根据标准曲线计算样品中红景天苷的含量。标准曲线计算样品中红景天苷的含量。一、概述一、概述性质：性质：泛指拥有泛指拥有1515个碳原
13、子的多元酚类化合物，个碳原子的多元酚类化合物，是是混合物。混合物。保健品中常见的黄酮类化合物主要有：银杏素、槲保健品中常见的黄酮类化合物主要有：银杏素、槲皮素、儿茶素、葛根素等。皮素、儿茶素、葛根素等。功效：功效：抗氧化、抗病毒、降血脂和总胆固醇、降血抗氧化、抗病毒、降血脂和总胆固醇、降血压、抗癌等等。压、抗癌等等。保健食品中总黄酮的测定保健食品中总黄酮的测定总黄酮的测定（分光光度法）总黄酮的测定（分光光度法）原理：原理：保健品中的保健品中的总黄酮用乙醇超声波提取后总黄酮用乙醇超声波提取后，聚酰，聚酰胺粉吸附柱胺粉吸附柱分离净化分离净化，总黄酮用，总黄酮用甲醇洗脱甲醇洗脱，于，于360nm360nm波长处比色定量。波长处比色定量。以芦丁为标准品，配置标准溶液以芦丁为标准品，配置标准溶液，绘制标准曲线绘制标准曲线，根据标准曲线计算样品中总黄酮的含量。根据标准曲线计算样品中总黄酮的含量。人参皂苷的测定人参皂苷的测定自学自学