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1、学习目标和要求学习目标和要求l 采集各类微生物标本的目的及注意事项。采集各类微生物标本的目的及注意事项。l 各类微生物标本采集的方法。各类微生物标本采集的方法。l 微生物标本采集常见问题微生物标本采集常见问题晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 l 微生物标本采集的原则。微生物标本采集的原则。标本采集的基本原则1.1.遵照医嘱遵照医嘱2.2.充分准备充分准备3.3.严格查对严格查对4.4.正确采集正确采集5.5.及时送检及时送检晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 微生物检验的一般要求l 捕捉目标选择恰当的标本，正确的解剖部位如局部脓肿边缘部
2、位l 保持病原体活性抗菌素使用前采集脑脊液中脑膜炎双 球菌及淋球菌不耐低温,冬季注意送检时注意保温厌氧菌培养切不可暴露于空气中,要保持于室温，注意无菌操作 及时送检晦l 防止常住菌污染PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 采样部位与时间要考虑感染发展过程l选择特定部位的特定标本脓肿不要取中部的脓液应取脓肿的边缘l采样时间晦在使用抗菌素之前采集在寒战或体温高峰到来前半小时至1小时根据目标菌感染在体内的迁移情况 多个部位PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 微生物标本采集的注意事项lllllll所有标本的采集、运送和处理应无菌操作，防止污染的原则下进
3、行已采集标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送带针头的注射器运送标本时用无菌试管或防护装置套住注射针，再置于防漏塑料袋中运送至检验科采集足够量标本每份标本都应有条形码信息,标记患者姓名、标本来源、具体部位、日期、时间及相关临床信息常规细菌检验标本，采集后不能超过2小时送至检验科，4保存不能超过24小时采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，且必晦须在使用抗菌药物前PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 目的临床上疑为败血症、脓毒血症或血液及骨髓标本的采取晦其他感染者:如急性脑膜炎、骨髓炎需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌,才能正确实施有效
4、地抗菌治疗,从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。血培养阳性是微生物实验室危急值报告项目PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 标本送检指征lllllllllll病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。1 发热（38）或低温（36）2 寒战3 白细胞增多（10109/L，特别有“核左移”时）4 粒细胞减少（成熟的多形核白细胞1109/L）5 血小板减少6 皮肤、粘膜出血7 昏迷8 多器官衰竭9 血压降低10 呼吸加快晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的采集p采血时机:1.对疑为菌血症的患者，尽可能在抗菌药物使
5、用前；2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外；4.怀疑血流感染时应尽早采血。最好在抗菌治疗前,以发冷发热前半小时至1小时采血为宜。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 骨髓培养指征l 骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的采集p采血次数及间隔:1怀疑血流感染（与留置深静脉导管无关）：怀疑血流感染（与
6、留置深静脉导管无关）：1.1 怀疑血流感染时，独立的外周静脉无菌采集2套血培养；1.2 当怀疑骨髓炎、脑膜炎、肺炎和肾盂肾炎合并菌血症时，在抗菌药物使用前从不同部位抽取2套血培养，两个来源的采血时间必须接近（5分钟），分别做好标记；1.3 对不明原因的发热、亚急性心内膜炎，应抽取3套血培养,间隔大于60分钟；心内膜炎患者起始采集的3套血培养24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养；晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的采集2怀疑导管相关血流感染（怀疑导管相关血流感染（CR-BSI）：）：2.1希望保留深静脉导管者：至少2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，另
7、一套从导管采集，两个来源的采血时间必须接近（5分钟），并分别标记采血部位和采血时间；2.2决定拔除深静脉导管者：从独立的2个外周静脉部位，无菌采集2套血培养，同时无菌操作取出导管并剪下5cm导管末梢送实验室3.除细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症患者外，在采血后25天内，无需重复做血培养作治疗跟踪；4.成人不能只做1套血培养！晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的采集p采血部位:多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。要避免从血管插管内取血。p采血量：一定要足够。成人10ml,不少于8ml新生儿与婴幼儿为 25ml。婴幼儿血培养一般只做需氧
8、瓶培养，无需常规做厌氧瓶。每增加1毫升血量,检出率提高3-5%晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的采集采样 消毒 75%酒精,2支安尔碘棉签,作用时间60秒干了后穿刺 不要在消毒后再用手摸消毒部位注意条形码粘贴应纵向粘贴，不能遮盖原条形码，亦不能遮盖晦瓶上无纸质部分灰盖：成人树脂需氧瓶灰盖：成人树脂需氧瓶紫盖：成人树脂厌氧瓶紫盖：成人树脂厌氧瓶粉红盖：小儿树脂需氧瓶粉红盖：小儿树脂需氧瓶PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 血液标本的运送l 采集后2小时内送检l 不可冷藏与冷冻PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本
9、创建 建建 议议 血血 液液 采采 集集 顺顺 序序先厌氧瓶后需氧瓶颠颠倒倒八八次次PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 c 痰标本的采集取材器皿有有 盖广口杯盖广口杯集痰器集痰器PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 痰标本的采集l自然咳痰:要求患者清晨留取,留取标本前用清水漱口3次以上,之后用力咳出深部痰液。咳痰较困难者可用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻叩胸骨柄上方以诱发咳痰。l 气管穿刺法:仅用于昏迷患者,由临床医师进行。ll纤维支气管镜抽吸:通常用于在给患者行纤维支气管镜检查时顺便抽取。胃液抽取法:晦多用于可疑患有肺结核的患者在有
10、可能将痰液咽下的情况时采用。标本采集后应立即送检,应争取在 2小时内送达检验科微生物室。如不能立即送检应储存在4冰箱。PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 痰标本标本的器皿标本最低量输送和储存送检频率肺泡灌洗或毛刷无菌器皿，不小于1ml大于1ml=2h10ml细菌1ml、真菌3-5ml、=2h=24h4度1次/天诱导痰无菌器皿大于1ml=2h=24h1次/天痰标本采集的其他要求晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 咽拭子标本采集咽拭子标本采集目的：目的：从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离或病毒分离实施：实
11、施：避免在进食后两小时内取标本避免在进食后两小时内取标本用无菌棉签擦拭用无菌棉签擦拭腭弓腭弓两侧、两侧、咽、扁桃体咽、扁桃体注意棉签注意棉签不触及不触及其他部位其他部位最好在酒精灯火焰上消毒试管口最好在酒精灯火焰上消毒试管口棉签插入试管、塞紧棉签插入试管、塞紧晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 咽拭子标本采集咽拭子标本采集晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 尿液细菌培养标本的采集尿液的细菌培养检查对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值。对于尿道、前列腺以及内、外生殖器炎症的诊断也有一定价值。尿液标本的采集需在应用抗菌药物之前或停
12、用抗菌药 5d之后留取尿液标本;尿液在膀胱内应停留 68h以上,使细菌有足够时间繁殖。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 尿液细菌培养标本的采集需注意的问题l 清洁排尿法:女患者以手指将阴唇分开,用肥晦皂水或碘伏清洗外阴,然后以清水冲洗尿道口周围,擦干并排出前段尿液后,用无菌容器接取中段尿;男患者应翻转包皮冲洗后留取。l 膀胱穿刺法:为避免尿道正常菌群的污染,收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。穿刺时膀胱应充盈,皮肤严格消毒后用装有 19 或 20 号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。PDF 文件使用 pdfFactory Pr
13、o 试用版本创建 尿液细菌培养标本的采集lll肾盂尿采集法:若取左右两侧肾盂尿,应请泌尿科医生采取,左右侧的标本要标记明确,以免出现错误。对用封闭式引流装置的留置导尿患者留取尿液标本培养时,用适当的消毒剂严格消毒引流管和导尿管连接处的管壁,用装有21号针头的注射器穿刺导尿管壁吸取尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本,培养用的尿液标本也不能从引流袋中留取。膀胱镜检查、输尿管插管或逆行肾盂造影时,收集的晦尿液可用来做细菌培养。PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 尿液细菌培养标本的采集检测衣原体时,尿液标本不能代替尿(阴)道分泌物。无症状的血尿可能是肾结核病、肾肿瘤淋
14、病奈瑟菌培养留取清晨第1次尿,盛于无菌容器内立即送检用无菌带帽的容器盛标本,标本应在1-2h之内送检。超过 2h者应重送,否则易致假阳性结果。如不能立即送检可将标本置4冰箱，但不可超过6h。尿液送检的同时,要求做尿液常规检测,以便进一步了解尿液感染情况,排除外界污染干扰晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 尿液细菌培养标本的采集l 注意事项尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染菌，因此要严格无菌操作，标本采集后应立即送检，无论何种方法采集尿液，均应在用药之前进行，尿液中不得加入防腐剂、消毒剂。培养3种以上菌均为污染所致晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro
15、试用版本创建 粪便标本 的采集1、自然排便法 自然排便后，挑取有脓血、黏液部位的粪便23克，液状粪便取絮装物盛于无渗漏清洁的无菌容器中送检。液体状大便用无菌注射器抽取1-3毫升2、肠拭子法 如不易获得粪便或排便困难的患者及幼儿，可用拭子采集直肠粪便，取出后插入灭菌试管内送检。l 切记无菌操作晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 粪便标本采集注意事项l 1、为提高肠道致病菌检出率，要采集新鲜粪便做培养。l 2、腹泻病人应尽量在急性期采集标本（3天内），以提高阳性率。l 3、采集标本最好在用药之前。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 脓液标本的
16、采取l 开放脓肿：用无菌盐水或70%乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基地部或边缘部，采集两个拭子分别做培养和革兰氏染色。l 闭锁脓肿：用注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 脓液标本的采取开放脓肿l 1、结膜性分泌物：脓性分泌物较多时，用无菌棉球擦拭，再用无菌棉拭子取结膜囊分泌物培养或涂片检查；分泌物少时，可做结膜刮片检查。l 2、扁桃体脓性分泌物：患者用清水漱口，由检查者将舌向外牵拉，将无菌棉拭子越过舌根涂抹扁桃体上的脓性分泌物，置无菌管内立即送检。l 3、外耳道分泌物：脓性分泌物较多时，先用无菌棉球擦拭，再取流出分泌物置无菌管送
17、检。l 4、手术后切口感染：疑有切口感染时可取分泌物，也可取沾有脓性分泌物的敷料置灭菌容器内送检。l 5、导管治疗感染：应做导管尖端培养再加血培养。l 6、瘘管内脓液：用无菌棉拭子挤压瘘管，取流出脓液送检；也可用灭菌纱布条塞入瘘管内，次日取出送检。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 脓液标本的采取闭锁性脓肿1、皮肤化脓（毛囊炎、疖、痈）和皮下软组织化脓感染：用2.5%3%碘酊和75%酒精消毒周围皮肤，穿刺抽取脓汁及分泌物送检，也可在切开排脓时，以无菌注射器或无菌棉拭子采集。2、淋巴结脓肿：经淋巴结穿刺术取脓液，盛于无菌容器内送检。3、乳腺脓肿、肝脓肿、脑脓肿、肾周脓
18、肿、胸腔脓肿、腹腔积液、心包积液、关节腔积液可在手术引流时采集脓液，也可做脓肿穿刺采集脓液，盛于无菌容器内立即送检。晦PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 脓液标本的采取l4、肺脓肿：体位引流使病肺处于高处，引流的支气管开口向下，痰液顺体位引流至气管咳出；也可在纤维支气管镜检查或手术时采集。晦l 5、胆囊炎：十二指肠引流术采集胆汁，标本分三部分，即来自胆总管、胆囊及肝胆管；手术时采集：在进行胆囊及胆管手术时，可从胆总管、胆囊直接采集；胆囊穿刺法：进行胆道造影时采集胆汁。l 6、盆腔脓肿：已婚妇女可经阴道后穹隆切开引流或穿刺采集脓液，也可在肛镜暴露下经直肠穿刺或切开引流采集脓液检查。l 7、肛周脓肿：在患者皮肤黏膜表面先用碘酊消毒，再用75%酒精脱碘，再用无菌干燥注射器穿刺抽取脓液，盛于无菌容器内立即送检。PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建