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1、选修一生物技术实践知识点梳理篇一：选修1生物技术实践学问点归纳 选修1生物技术实践学问点归纳 试验1大肠杆菌的培育和分别 1.微生物是指结构简洁、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核，只有一环状DNA分子（拟核）。以分裂（二分裂）的方式繁殖，分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌（革兰氏染液染色后，再脱色处理，细菌仍保留染色液的颜色）和革兰氏阴性菌两大类，区分在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性（细胞壁薄，有荚膜）、兼性厌氧的肠道杆菌。 2.细菌的分别
2、方法有两种：划线分别法和涂布分别法。是消退污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分别就是用接种环蘸菌液后在含有固体培育基的培育皿平板上划线，在划线的过程中菌液渐渐削减，细菌也渐渐削减，。划线最终，可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培育基培育1020小时后，一个细菌细胞就会繁殖成很多细菌细胞，形成菌落，不会重叠。在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的大肠杆菌的工程菌，可以用划线分别法获得产物表达实力高的菌株。由于工程菌的质粒中通常有抗性基因（如抗氨苄青霉素基因），如在培育基中加入肯定量的氨苄青霉素，由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因
3、，所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。 -5-7涂布分别时，须要先将培育的菌液稀释，通常稀释到1010之间，然后去0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培育 皿的固体培育基上，用玻璃刮刀涂布在培育基平面上进行培育，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培育皿中有20个以内的单菌落为最合适。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培育后，再做功能性试验。 划线分别法，方法简洁；涂布分别法，单菌落更易分开，但操作困难。 3.在培育微生物时，必需进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必需是无菌的，各种培育基也必需是无菌的，转移培育基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无
4、菌（防止杂菌污染）。进行恒温培育时，要将培育皿倒置，是因为培育基中的水分会以水蒸气的形式蒸发，倒放培育皿会使水蒸气凝聚成水滴后，落入培育基的表面并且扩散，菌落中的细菌也会随水扩散，菌落见相互影响，很难在分成单菌落，达不到分别的目的。 4.细菌扩大培育要用LB液体培育基（通用培育基、常用于做生理学探讨和发酵工业），划线分别要用LB固体培育基（常用于微生物分别、鉴定、计数和菌种保存）。“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培育基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入肯定的氯化钠，以维持肯定的渗透压；霉菌培育基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。尽管培育基的配方各不相同，但其基本成分都一样（五类）。
5、人及动物的养分物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类； 植物的养分物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类； 微生物的养分物质：水、无机盐、碳源、氮源及生长因子等五类。 4.无菌技术 （1）获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵，要留意以下几个方面： 对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌。 为避开四周环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰旁边进行。 试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触。 （2）消毒与灭菌的区分 消毒指运用较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体 表面或内部一部分对人体有害的微生物（
6、不包括芽孢 和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、红外线消毒。灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 5.培育基 （1）培育基可分为液体培育基和固体培育基（根据物理性质）。在液体培育基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培育基。微生物在固体培育基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。依据菌落的特征可以推断是哪一种菌。 （2）各种培育基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种养分物质。满意微生物生长还须要相宜的pH、氧气的要求（依据微生物的需求供应有氧或无氧环境）、特别养分物质等。 碳源：能为
7、微生物的代谢供应碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、蛋白质、脂肪等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 -氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质。如N2、NH3、NO3、蛋白质、氨基酸等。只有固氮微生物才能利用N2。 （3）培育基配制的原则：目的要明确、PH值要相宜、养分要协调和要经济节约。 试验4果汁中的果胶和果胶酶 1.果胶是植物细胞壁的以及胞间层的主要成分之一，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。下面是果胶的结构式： 山楂的果实中果胶含量最多，煮沸的山楂泥可制成山楂糕，就是由于果胶的作用。果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用，去掉果胶，就会使植物组织变
8、得松散。 果胶不溶于乙醇，这是鉴别果胶的一种简易方法。 2.果胶是植物细胞壁和胞间层的主要组成成分之一。在果汁加工中，果胶的存在易导致果汁出汁率低，果汁浑浊。果胶酶分解果胶的作用是：瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更简单；把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清，因此可以解决果汁加工中出现的问题。果胶酶是一类酶的总称，包括：多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。在植物细胞工程中果胶酶的作用是与纤维素酶一起除去植物细胞的细胞壁。 试验5加酶洗衣粉的运用条件和效果 1.洗衣粉主要成分：表面活性剂，水软化剂，碱剂，漂白剂等成分，有的洗衣粉中还含有增白剂，香精和色素，以及填充剂等。
9、2.加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉,目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶 。其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。 3.（碱性）蛋白酶的作用是使蛋白质水解成可溶于水的小分子肽和氨基酸。 蛋白质多肽氨基酸 脂肪酶的作用是将大分子的脂肪水解为小分子的物质，甘油和脂肪酸。 脂肪甘油 + 脂肪酸 4.影响酶活性的因素有温度、酸碱度和表面活性剂。此外，加酶洗衣粉也不宜长期存放，存放时间过长会导致酶活力损失。 5.试验操作 课题名称：温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响。 试验目的：比较不同温度下加酶洗衣粉的洗涤效果。 试验原理：酶的催化活性受温度影响，在相宜温度下酶的催化
10、活性最高，温度过低或过高酶的催化实力降低。 试验材料：加酶洗衣粉、天平、白色棉布、1010mL烧杯、玻棒、温度计、滴管、簇新鸡血、水浴缸、温度分别为5、15、25、35的清水。 试验步骤：（1）取10cm10cm的白色棉布4块，用滴管各滴加5滴簇新鸡血，晾干备用。 （2）取1010mL烧杯4个，用天平分别称取0.5g加酶洗衣粉，依次倒入4个烧杯中。 （3）将5、15、25、35清水各500mL依次倒入4个烧杯中，用玻棒搅拌溶化洗衣粉。 （4）取水浴缸4个，依次倒入5000mL 5、15、25、35清水，插入温度计保持恒温。 （5）将4个烧杯分别放到相同水温的水浴缸中，将带鸡血的棉布分别放到烧杯
11、中浸泡20min。 （6）按相同方式用不同玻棒搅拌棉布各，放到水浴缸中。 结果分析与评价： 6.常见问题解答 为什么洗涤前先将衣物浸于加有适量洗衣粉的水内数小时？如何缩短衣物的浸泡时间？ 是为了使洗衣粉中的蛋白酶充分的分解衣物中的蛋白质污渍；用温水浸泡衣物，因为酶的催化作用须要相宜的温度。 为什么不能在60以上的水中运用此洗衣粉？ 运用加酶洗衣粉时，必需留意洗涤用水的温度，温度过高会使酶变性失活。在低温下酶的活性下降。 试说明为什么此洗衣粉不能用于丝质及羊毛衣料？ 因为蛋白酶能使蛋白质水解，而丝质及羊毛衣料中含有蛋白质，这样会损坏衣物。 为什么运用加酶洗衣粉洗衣后，须彻底清洗双手？ 人体皮肤细
12、胞有蛋白质，如不彻底清洗双手，就会使手的皮肤受到腐蚀。而使人患过敏性皮炎、湿疹等，因此，应避开与这类洗衣粉长时间地接触。 脂肪酶对沾有矿物油的棉布是否起作用? 不起作用。脂肪酶只对羟基和羧基形成的酯键起作用，而矿物油多为饱和链烃，没有酯键。 试验7-淀粉酶的固定化及淀粉水解 1.酶的生产 提取法：采纳肯定的技术干脆从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来。 优点：简洁易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值。 缺点：要有足够的原材料，广泛应用受到限制。 发酵法（常用方法）：通过微生物发酵获得所须要的酶。 优点：易培育、繁殖速度快、便于大规模生产。 2.酶制剂的优点：催化效率高、低能耗
13、、低污染等。 酶制剂的缺点：通常对强酸、强碱、高温柔有机溶剂等条件特别敏感，简单失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后会混在产物中(难分别），可能影响产品质量。 3.固定化酶：固定化酶技术。即将酶固定在肯定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。 固定化酶的优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分别；固定在载体上的没可以被反复利用。 4.固定化酶方法：吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等。 5.试验操作 试验原理：本试验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，肯定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成
14、。 设备及用品：5ml塑料注射器、50ml烧杯、滴管、自行车用气门心及夹子、注射器架、试管及微量离心管3支。 材料：-淀粉酶的固定化:在烧杯中将5mg-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中.由于酶不纯,可能有些不溶物。再加入5g石英砂,时常搅拌,30min后装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中(石英砂体积约4ml)。用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流速为1ml/min。 可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉溶于101ml热水中,搅拌匀称。 5mmol/L KI-I2溶液：称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水101ml完全溶解 后装入滴瓶中。 步骤：将灌注了固定化
15、酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶 液以0.3ml/min的流速过柱。在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2 溶液,视察颜色.用水稀释1倍后再视察颜色。 试验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4冰箱中,几天后再重复上述实 验,看是否有相同的结果。 试验反思： 如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶? 可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检 验。如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶了。 试验8果酒及果醋的制作 （一）试验原理 1酵母菌的细胞呼吸 酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，反应式：C6H12O6+O22+H2O+
16、能量 酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，表达式为：C6H12O62H5OH+CO2+能量 2酵母菌发酵的最佳环境 酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。20左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在1825，pH最好是弱酸性。 3醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。表达式为：C2H5OH CH3 醋酸菌生长的最佳温度是在3035 (二)试验步骤 选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵果
17、酒（醋酸发酵果醋） 1.对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁的器皿等试验用具进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，晾干待用。 2.取葡萄500g，去除枝梗和腐烂的子粒。 3.用清水冲洗葡萄12遍除去污物，留意不要反复多次冲洗。 4.用榨汁机榨取葡萄汁后，将其装入发酵瓶中或将葡萄打成浆后，用干净的纱布过滤至发酵瓶中，盖好瓶盖。假如没有合适的发酵装置，可以用500mL的塑料瓶替代，但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的2/3。 5.将发酵瓶置于相宜的温度下发酵。酵母菌，1825，1012d；醋酸菌，3035，78d。 6.由于发酵旺盛期CO2的产量特别大，因此须要刚好
18、排气，防止发酵瓶爆裂。假如运用简易的发酵装置，如瓶子（最好选用塑料瓶），每天要拧松瓶盖24次，进行排气。 7.10d以后，可以起先进行取样检验工作。例如，可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。 8.当果酒制成以后，可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲，然后将装置转移至3035 的条件下发酵，适时向发酵液中充气。假如找不到醋酸菌菌种或醋曲，可尝试自然接种，但效果不是很好。假如没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶口盖上纱布，以削减空气中尘土等的污染。 (三)留意事项 请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？结合果酒、果醋的制作原理，
19、你认为应当如何运用这个发酵装置？ 答：充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发 酵时用来排出CO2的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲 的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染。运用该装置制酒 时，应当关闭充气口；制醋时，应将充气口连接气泵，输入氧气。 （四）学问重点 1.酿酒和制醋有关的微生物分别是酵母菌（真菌）和醋杆菌（细菌）。制作酒和醋的过程：在糯米或大米与酒曲混匀后，放在温度较高的地方，米先变甜，即生成了糖，这是由于黑曲霉或黑根霉的淀粉酶将淀粉水解成糖。甜度增加后，再放到温度低的地方保持厌氧条件，酵母就起先工作，使糖变成酒（糖酵解）。假如时间太长
20、，在有氧条件下，醋酸菌就起先作用，将乙醇氧化成乙酸，也就是变酸生成醋。 2.用葡萄制作葡萄酒时，一般不加蔗糖，都只用野生酵母，但是本试验为了加速反应，使视察更直观，须要有更多底物参与反应，所以加入酵母使酒精发酵占有优势。运用高锰酸钾溶液浸泡葡萄的目的是为了防止杂菌污染，也是歼灭了野生酵母。发酵瓶中的液体不能装满是因为发酵过程中气体产生，假如装满会使液体外溢，导致发酵液损失和瓶口等处污染杂菌，影响产物品质。用装着水的弯曲玻璃管可以防止氧气进入，发酵产生的二氧化碳可以出去，还可以防止空气中杂菌的污染。 3.制醋有固态发酵和液态发酵，本试验属于固定化菌体连续发酵工艺。制醋时要向发酵瓶中通入空气，保证
21、发酵是一个氧化过程，要用棉花过滤是防止空气中的微生物进入。 试验10泡菜的腌制和亚硝酸的测定 1.泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌。 这类食品含有乳酸和丰富的维生素、矿物质等养分成 分，但蛋白质含量低，还含有肯定量的亚硝酸盐。所用 原料是白菜、洋白菜等。在无氧的条件（由所用容器的 凹槽加水在加盖造成）下，微生物利用菜中的糖和其他 养分物进行发酵，乳酸菌将糖分转化为乳酸，这是需氧 菌被杀死；当有机酸增加到肯定程度时，乳酸菌被杀死， 出现酵母和霉菌，并渐渐产生亚硝酸。加白酒的作用是 可抑制杂菌的生长，也是一种调味剂，增加醇香感。加 盐不要太多，否则会使乳酸菌发酵迟缓。温度高则发酵 快，
22、但口味差些。 2.杂菌较少的缘由是乳酸菌产生的乳酸球菌肽对很多 革兰氏阳性菌有抗菌作用，蛋白质含量低，白酒的抑制作用等。 3.亚硝酸盐是对人体有害，引起中毒，可致癌的物质，由假丝酵母产生。可与对氨基本磺酸发生重氮化反应，这一产物再与N1萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量。试验步骤包括样品处理、测定、标准曲线（以亚硝酸钠质量为横坐标以光密度OD值为纵坐标）、计算亚硝酸盐含量（mg/kg）X1=通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量（ug）m21010样品处理液总体积V1/样品质量m1测定样品液总体积V21010）。 试验11植物组织培育 篇二：选修一生物技术实践学问点总结 中学生物选修一
23、生物技术实践 学问点总结 专题一 传统发酵技术的应用 课题一 果酒和果醋的制作 1、发酵：通过微生物技术的培育来生产大量代谢产物的过程。 2、有氧发酵：醋酸发酵 谷氨酸发酵 无氧发酵：酒精发酵 乳酸发酵 3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌 酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生殖 孢子生殖 4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O66O26H2O 5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 C6H12O66CO212H2O+能量 2C2H5OH2CO2+能量 6、20左右最相宜酵母菌繁殖 酒精发酵时一般将温度限制在18-25 7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附
24、着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中, 随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在发酵过程中保持缺氧 呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。 8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂 9、当氧气、糖源都足够时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变 为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 C6H12O62O22CH3COOH2CO22H2OC2H5OHO2CH3COOHH2O 10、限制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特殊敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中 断
25、通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为32，限制好发酵温度，使发酵时间缩短，又削减杂菌污染的机会。有两条途径生成醋酸：干脆氧化和以酒精为底物的氧化。 11、试验流程：选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋） 12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与 酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2L，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最终滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，视察颜色 13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精 发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通
26、过一个 长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开 口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。运用该装置制酒时，应当关闭 充气口；制醋时，应当充气口连接气泵，输入氧气。 疑难解答 （1）你认为应当先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 应当先冲洗，然后再除去枝梗，以避开除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 1（2）你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？ 如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。 （3）制葡萄酒时，为什么要将温度限制在1825？制葡萄醋时，为什么要将温度限制在3035？ 温度是酵母菌
27、生长和发酵的重要条件。20左右最适合酵母菌的繁殖。因此须要将温度限制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为32，因此要将温度限制在3035。 课题二 腐乳的制作 1、多种微生物参加了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛 霉是一种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。 2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 3、试验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制 4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。 前期发酵的主要作用：1.创建条
28、件让毛霉生长。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。 后期发酵主要是酶与微生物协同参加生化反应的过程。通过各种辅料与酶的缓解作用，生成腐乳的香气。 5、将豆腐切成3cm3cm1cm的若干块。所用豆腐的含水量为73左右，水分过多则腐乳不易成形。*水分测定方法如下：精确称取经研钵研磨成糊状的样品510g(精确到0.02mg)，置于已知重量的蒸发皿中，匀称摊平后，在101105电热干燥箱内干燥4h，取出后置于干燥器内冷却至室温后称重，然后再烘30min，直至所称重量不变为止。 样品水分含量（%）计算公式如下： (烘干前容器和样品质量-烘干后容器和样品质量)/烘干前样品质量 毛霉的生长：条件:将豆腐块
29、平放在笼屉内，将笼屉中的限制在1518，并保持肯定的湿度。 来源：1.来自空气中的毛霉孢子，2. 干脆接种优良毛霉菌种 时间：5天 加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约为8天左右。 用盐腌制时，留意限制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味 食盐的作用：1.抑制微生物的生长，避开腐败变质2.析出水分，使豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂3.调味作用，给腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。 配制卤汤：卤汤干脆关系到腐乳的色、香、味。
30、卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一般限制在12%左右。 酒的作用：1.防止杂菌污染以防腐2.与有机酸结合形成酯，给予腐乳风味3.酒精含量的凹凸与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成 2 块。 香辛料的作用：1.调味作用2.杀菌防腐作用3.参加并促进发酵过程 防止杂菌污染：用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要快速当心。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。 疑难
31、解答 （1）利用所学的生物学学问，说明豆腐长白毛是怎么一回事？ 豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。 （2）为什么要撒很多盐，将长毛的豆腐腌起来？ 盐能防止杂菌污染，避开豆腐腐败。 （3）我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？ 含水量为73%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。 （4）吃腐乳时，你会发觉腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么？ “皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。 课题三 制作泡菜 制作泡菜所用微生物是乳酸菌
32、，其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，将糖分解为乳酸 。 酶? 2C3H6O3+能量 含抗生素牛奶不能生产酸奶的原分裂方式是二分裂。反应式为：C6H12O6 因是抗生素杀死乳酸菌。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。 亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。 膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，国家规定肉制品中不超过30mg/kg，酱腌菜中不超过20mg/kg，婴儿奶粉中不超过2mg/kg。亚硝酸盐被汲取后随尿液排出体外，但在相宜pH 、温度和肯定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。 10天之后食用最好 比色法 ，亚硝酸盐与对基苯磺酸发生重氮化反应结合
33、形成玫瑰红色染料，与已知浓估算泡菜中亚硝酸盐含量。 专题二 微生物的培育与应用 课题一 微生物的试验室培育 培育基：人们根据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的养分基质，是进行微 3 生物培育的物质基础。 培育基根据物理性质可分为液体培育基 半固体培育基和固体培育基。在液体培育基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培育基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培育基。微生物在固体培育基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。依据菌落的特征可以推断是哪一种菌。液体培育基应用于工业或生活生产，固体培育基应用于微生物的分别和鉴定，半固体培育基则常用于视察微生物的运动及菌种保藏等。 根据成分
34、培育基可分为人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分别鉴定。自然培育基是用化学成分不明的自然物质配制而成，常用于实际工业生产。 根据培育基的用途，可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基。选择培育基是指在培育基中加入某种化学物质，以抑制不须要的微生物生长，促进所须要的微生物的生长。鉴别培育基是依据微生物的特点，在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 培育基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 （生长因子）等。 碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源
35、；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质。如N2、NH3、NO3、NH4（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 培育基还要满意微生物生长对PH、特别养分物质以及氧气的要求。例如，培育乳酸杆菌时须要在培育基中添加维生素，培育霉菌时须将培育基的pH调至酸性，培育细菌是须要将pH调至中性或微碱性，培育厌氧型微生物是则须要供应无氧的条件 无菌技术获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵，要留意以下几个方面： 对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 将用于
36、微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌。 为避开四周环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰旁边进行。 试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触。 无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。 消毒与灭菌的区分 消毒指运用较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。 灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和
37、孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 -+ 灭菌方法： 接种环、接种针、试管口等运用灼烧灭菌法； 玻璃器皿、金属用具等运用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ； 表面灭菌和空气灭菌等运用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。 4 培育基、无菌水等运用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。 制作牛肉膏蛋白胨固体培育基 （1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 （2）倒平板操作的步骤： 将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培育基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 右手拿锥形瓶，将瓶口快速通过火焰。 用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培育基（约
38、1020mL）倒入培育皿，左手马上盖上培育皿的皿盖。 等待平板冷却凝固，大约需510min。然后，将平板倒过来放置，使培育皿盖在下、皿底在上。 倒平板操作的探讨 1.培育基灭菌后，须要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培育基的温度？ 提示：可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝聚水珠，将平板倒置，既可以防止培育基表面的水分过度地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染
39、。 4.在倒平板的过程中，假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培育微生物吗？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生，因此最好不要用这个平板培育微生物。 纯化大肠杆菌 （1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。 （2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。在数次划线后培育，可以分别到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。 （3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。分为系列稀释操作和涂布
40、平板操作两步。 （4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。 （5）平板划线法操作步骤： 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。 5 篇三：中学生物选修一生物技术实践 学问点总结 中学生物选修一生物技术实践 学问点总结 专题一 传统发酵技术的应用 课题一 果酒和果醋的制作 1、发酵：通过微生物技术的培育来生产大量代谢产物的过程。 2、有氧发酵：醋酸发酵 谷氨酸发酵 无氧发酵：酒精发酵 乳酸发酵 3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌 酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生
41、殖 孢子生殖 4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O66O26CO26H2O 5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 C6H12O62C2H5OH2CO2 6、20左右最相宜酵母菌繁殖 酒精发酵时一般将温度限制在18-25 7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧 呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。 8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂 9、当氧气、糖源都
42、足够时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 2C2H5OH4O2CH3COOH6H2O 10、限制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特殊敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为3035，限制好发酵温度，使发酵时间缩短，又削减杂菌污染的机会。有两条途径生成醋酸：干脆氧化和以酒精为底物的氧化。 11、试验流程：选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋） 12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2L，再滴入物质
43、的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最终滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，视察颜色 13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发 酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯 曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目 的是有利于二氧化碳的排出。运用该装置制酒时，应当关闭充气口；制醋时， 应当充气口连接气泵，输入氧气。 疑难解答 （1）你认为应当先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 应当先冲洗，然后再除去枝梗，以避开除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 （2）你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染
44、？ 如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。 （3）制葡萄酒时，为什么要将温度限制在1825？制葡萄醋时，为什么要将温度限制在3035？ 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20左右最适合酵母菌的繁殖。因此须要将温度限制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为3035，因此要将温度限制在3035。 专题二 微生物的培育与应用 课题一 微生物的试验室培育 1.培育基：人们根据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的养分基质，是进行 微生物培育的物质基础。 2.培育基根据物理性质可分为液体培育基 半固体
45、培育基和固体培育基。在液体培育基中加入凝 固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培育基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培 养基。微生物在固体培育基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。依据菌落的特征可以推断 是哪一种菌。液体培育基应用于工业或生活生产，固体培育基应用于微生物的分别和鉴定， 半固体培育基则常用于视察微生物的运动及菌种保藏等。 3.根据成分培育基可分为人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分已知的化学物质 配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分别鉴定。自然培育基是用化学成分 不明的自然物质配制而成，常用于实际工业生产。 4.根据培育基的用途，可将培育基分为选择培育基
46、和鉴定培育基。选择培育基是指在培育基中 加入某种化学物质，以抑制不须要的微生物生长，促进所须要的微生物的生长。鉴别培育基 是依据微生物的特点，在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类 别的微生物。 6.碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生 粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 7.氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质。如N2、NH3、NO3、NH4（无机氮源）蛋白质、氨 基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 8.培育基还要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的要求。例如，培育乳酸杆菌时需 要在培育基中添加维生素，培育霉菌时须将培育基的pH调至酸性，培育细菌是须要将pH调 至中性或微碱性，培育厌氧型微生物是则须要供应无氧的条件 9.无菌技术获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵