《2022届优质校一模生物试卷汇编——发酵工程 答案版.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022届优质校一模生物试卷汇编——发酵工程 答案版.docx（15页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、专题 23发酵工程常考题型题 型考查年份关联知识点传统发酵技术及应用2021海南卷17题果酒、果醋和泡菜的制作微生物的培养技术及应用2021湖南卷21题微生物的计数方法；识记培养基的种类及功能；掌握纤维素分解分离和鉴别的原理发酵工程及其应用2021全国乙卷38题以酱油的制作为题材考查果酒和腐乳的制作方法点拨1果酒、果醋发酵条件的控制（1）葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵，防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。（2）严格控制温度：1830利于酵母菌的繁殖和酒精发酵，3035利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。（3）充气：酒精发酵为
2、无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为有氧发酵，需适时通过充气口充气。2果酒和果醋制作成功的关键点项目说明材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，再除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染防止发酵液被污染榨汁机和发酵瓶等都需清洗干净，且发酵瓶要进行消毒清洗葡萄时要先清洗后除枝梗发酵瓶排气管用长而弯曲的胶管不用直管3微生物的鉴别方法菌落特征鉴别法根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别指示剂鉴别法如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变红说明该种微生物能够分解尿素染色鉴别法如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛
3、选分解纤维素的微生物4筛选微生物的3种方法（1）单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。（2）选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。（3）鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。【典例1】（2021全国乙卷38）工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。回答下列问题：（1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、
4、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的_可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供_。（2）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的_、_能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和_。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于_（填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”）微生物。（3）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于_（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是_。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要
5、因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是_（答出1点即可）。【答案】（1）蛋白质 碳源（2）蛋白酶 脂肪酶 氨基酸 异养好氧（3）原核生物 酒精和二氧化碳 酒精、乳酸、食盐（答一个即可）【解析】（1）大豆中含有丰富的蛋白质，可为微生物的生长繁殖提供氮源。小麦中的淀粉可以为微生物的生长繁殖提供碳源。（2）米曲霉在发酵过程中产生的蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使发酵的产物具有独特的风味。米曲霉发酵时需要利用现有的有机物和需要氧气，说明其代谢类型是异养好氧型。（3）乳酸菌没有核膜包被的细胞核，属于原核生物。酵母菌属于兼性厌氧型微生物，既可以进
6、行有氧呼吸，也可以进行无氧呼吸，无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳。在发酵池中酵母菌产生的酒精能抑制杂菌的生长，乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长。1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。2、微生物的生长繁殖一般需要水、无机盐、碳源和氮源等基本营养物质，有些还需要特殊的营养物质如生长因子，还需要满足氧气和pH等条件。3、果酒制作的菌种为酵母菌，其原理是：在有氧的条件下，酵母菌大量繁殖，无氧的条件下，酵
7、母菌产生酒精和二氧化碳。【典例2】（2021新高考湖南卷21）大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达1238kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以_为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_培养基。（2）配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_。（3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路_。（4）为高效降
8、解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_，理由是_。菌株秸秆总重（g）秸秆残重（g）秸秆失重（%）纤维素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32【答案】（1）C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 纤维素 选择（2）为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子） 不接种培养（或空白培养）（3）将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取01mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30300的平
9、板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数（4）C 接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大【解析】（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。（2）配制培养基的常用高压蒸汽灭菌，即将培养基置于压力100kP
10、a、温度121条件下维持1530分钟，目的是为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）。为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。（3）为测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数，常采用稀释涂布平板法，在适宜的条件下对大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌进行纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水。将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取01mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数。（4
11、）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。1、分解纤维素的微生物分离的实验原理：（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；（2）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物
12、不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。2、消毒和灭菌：消毒灭菌概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等【易错易混】1微生物的实验室培养的几点注意：（1）分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。（2）平板划线法只适用于微生物的纯化，不适用于微生物的计数，并且在最后一
13、次划线末端处的菌种最纯，进行平板划线应注意如下操作：每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。划线时最后一块区域不要与第一区域相连。（3）倒平板的温度一般在50左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。（4）平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又能防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。2“间接计数法选择菌落数在30300的平板”的2个提醒（1）只得到1个菌落数在30300的平板是错误的，原因是不符合实验的重复原则，易受到偶然因素的影响。（2）得到3个或3个以上菌落数在30300的平板，也不一定正确，原因是如果不同平板间差异
14、较大，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240，虽然菌落数均在“30300”，但由于34与另外两个平板差异较大，应找出原因并重新实验。试题汇编一、选择题1（2021上海奉贤高三月考）利用酵母菌制酒时，从开始到结束持续通入空气，其结果是（ ）A酵母菌大量死亡，酒精减产 B酵母菌数量不变，酒精增产C酵母菌数量增多，酒精增产 D酵母菌数量增多，不产生酒精【答案】D【解析】酿酒要用到酵母菌，在无氧的条件下，酵母菌发酵能把葡萄糖分解成酒精和二氧化碳。在制作酒时，先加入的酵母菌数量太少，因此需要酵母菌先大量的生长和繁殖，所以开始先通入一段时间的空气，然后隔绝空气，目的是让酵母菌先进行有氧呼吸，快速
15、增加酵母菌的数量，此时不产生酒精，因为在有氧呼吸的情况下酵母菌将有机物分解为二氧化碳和水；只有氧气耗完后，进行无氧呼吸，才将有机物分解为酒精和水。故利用酵母菌制酒时，从开始到结束持续通入空气，其结果是酵母菌数量增多，不产生酒精，D正确，ABC错误。2（2021海南高考真题）关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是（ ）A发酵所利用的微生物都属于原核生物 B发酵过程都在无氧条件下进行C发酵过程都在同一温度下进行 D发酵后形成的溶液都呈酸性【答案】D【解析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，A错误；参与果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此果醋发酵需要有氧条件，B错误；不同
16、的发酵产物需要的温度不同，C错误；果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性，D正确。故选D。3（2021江苏东海高三月考）下图为苹果酒的发酵装置示意图，下列叙述正确的是（ ）A发酵过程中酒精的产生速率越来越快B集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C发酵过程中酵母菌种群呈“J”型增长D若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气【答案】D【解析】酒精发酵过程中，开始时，酒精的产生速率逐渐加快，后来保持相对稳定，最后由于营养物质逐渐被消耗等原因，酒精的产生速率逐渐减慢，A错误;集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2，B错误;发酵过程中酵母种群呈“S型增长，C错误;若发酵液表面出
17、现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气，醋酸菌大量繁殖所致，D正确。故选D。4（2021江苏常州高三期中）传统的常州萝卜干精选西门外新闸出产的甜嫩实心红萝卜为原料，在陶罐内加入适量的盐、糖及多种辅料，精心腌制而成。下列有关叙述正确的是（ ）A萝卜和陶罐清洗干净后需高温灭菌后进行腌制B腌制时间一般要超过10天，前期亚硝酸盐含量较高C萝卜干腌制主要利用乳酸菌发酵，产生乳酸的量可用比色法测定D腌制后的萝卜干“咸中带甜”是因为盐和糖被萝卜细胞主动吸收【答案】B【解析】萝卜只需洗干净即可，高温灭菌会杀死附着在萝卜上的乳酸菌，A错误；腌制时间过短，亚硝酸盐含量增加，一般在腌制10d后，亚硝酸盐的含量下降，B正确；
18、萝卜干腌制主要利用乳酸菌发酵，产生亚硝酸盐的量可用比色法测定，C错误；萝卜腌制后细胞已经死亡，盐和糖通过扩散作用进入萝卜细胞，D错误。故选B。5（2021浙江宁波一模）研究人员以苹果为原料，先接种酵母菌，发酵96小时再接种老陈醋的醋醅（含醋酸菌）进行发酵，酿造苹果醋。如图为发酵液中酒精含量和总酸含量随发酵时间变化的曲线。下列叙述错误的是（ ）A醋酸发酵过程中需通入无菌空气B发酵024小时酵母菌进行了需氧呼吸C24小时后随着醋酸的产生pH逐渐下降D发酵过程中有机物的能量大都留在发酵产品中【答案】C【解析】醋酸菌为好氧细菌，为避免杂菌污染，则发酵过程中要通入无菌空气，A正确；由左图可知，发酵024
19、小时酵母菌代谢过程中无酒精的产生，说明酵母菌进行的是需氧呼吸，24小时后酒精的产生量不断增加，说明酵母菌进行了无氧呼吸，B正确；由右图可知，24小时后随着发酵时间延长，总酸含量增加导致pH逐渐下降，并不是随着醋酸的产生pH逐渐下降，C错误；发酵过程中有机物的一部分能量在呼吸作用过程中以热能的形式释放到外界，另一部分能量留在了发酵过程中产生的代谢产物和ATP中，D正确。故选C。6（2021浙江高三月考）下列关于培养基的叙述，错误的是（ ）AMS培养基不含植物生长调节剂BLB液体培养基可用于分离大肠杆菌C添加蔗糖的豆芽汁可用于培养霉菌D植物组培所用的发芽培养基中BA多，NAA少【答案】B【解析】M
20、S培养基含大量元素、微量元素、有机物，有机物包括甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、蔗糖等，不含植物生长调节剂，A正确；分离大肠杆菌是固体培养基，液体培养基用于扩大培养，B错误；霉菌是异养型微生物，添加蔗糖的豆芽汁可用于培养霉菌，C正确；生长素比细胞分裂素比值高有利于根的分化，抑制芽的形成，比值低是有利于芽的分化，抑制根的形成，比值适中是促进愈伤组织的形成，因此植物组培所用的发芽培养基中BA（细胞分裂素）多，NAA（生长素类似物）少，D正确。故选B。7（2021上海徐汇模拟预测）为研究细菌F的生理活动，兴趣小组设计实施了如表的实验，此实验的结论是（ ）步骤培养皿1培养皿21淀粉固体培养
21、基淀粉固体培养基2接种细菌F未接种3培养2天后往培养基中加碘液培养2天后往培养基中加碘液结果菌落周围为无色透明圈，其余呈蓝色培养基表面呈蓝色A淀粉遇碘显蓝色 B细菌F能分泌淀粉酶C细菌F能利用碘液 D此淀粉固体培养基无杂菌污染【答案】B【解析】该实验的原理是淀粉遇碘显蓝色，否则不变色，不是实验结论，A不符合题意；该实验研究细菌F的生理活动，根据实验现象含有淀粉的培养基与碘液反应后出现透明圈，可得出结论，即细菌F能分泌淀粉酶，使淀粉水解，B符合题意；该实验的原理是细菌F产生的淀粉酶使淀粉水解，而使菌落周围为无色透明圈，其余呈蓝色，并不是细菌F利用碘液，C不符合题意；通过培养基2对照可以看出，此淀
22、粉固体培养基无杂菌感染，但这并不是实验结论，D不符合题意。故选B。8（2021全国模拟预测）用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ）A菌落中的细菌数目是固定的B平板上的一个菌落就是一个细菌C通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌【答案】D【解析】用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌，D正确，ABC错误。故选D。9（2021江苏苏州高三期中）酵母中的蛋白含量
23、高，可用作饲料蛋白，且有些酵母能利用工业废甲醇作为碳源进行繁殖。研究人员拟从土壤中分离该类酵母并大量培养，操作流程如下图。下列相关叙述正确的是（ ）A土样、培养基、培养器皿和接种工具等都必须严格灭菌B只有过程中使用的培养基需以甲醇作为唯一的碳源C过程扩大培养时需要保证充足的营养并营造无氧环境D通过逐步提高培养基中甲醇的浓度可获得甲醇高耐受菌株【答案】D【解析】土样中含有要分离的酵母，如果对其灭菌会杀死酵母，无法得到该类酵母，因此不能对其灭菌，A错误；扩大培养时也需要以甲醇作为唯一的碳源，不是只有过程，B错误；酵母是兼性厌氧型真菌，在有氧条件下可大量繁殖，酵母扩大培养时，需保证充足的营养和氧气等
24、条件，C错误；逐步提高培养基中甲醇的浓度，能筛选出其中的耐受菌，获得甲醇高耐受菌株，D正确。故选D。10（2021江苏如皋高三期中）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如下表所示。下列分析正确的是（ ）菌株秸秆总重（g）秸秆残重（g）秸秆失重（%）纤维素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32A从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基中的唯一氮源是纤维素B如果将上述实验中的温度条件调整至25，效果会更明显C实验中需要设置一个不接种纤维素分解菌
25、的空白对照实验D纤维素酶活力最高的是菌株C，需用选择培养基扩大培养【答案】C【解析】纤维素不含氮，可为纤维素分解菌提供碳源，因此从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基中的唯一碳源是纤维素，A错误；本实验不能确定最适温度，因此将上述实验中的温度条件调整至25，效果不一定会更明显，B错误；实验中需要设置一个不接种纤维素分解菌的空白对照实验，以检验培养基灭菌是否彻底，C正确；根据分析可知，纤维素酶活力最高的是菌株C，需用液体培养基扩大培养，D错误。故选C。11（2021江西抚州高三月考）下列关于统计菌落数目的方法的叙述，正确的是（ ）A采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数目B当样品的稀释度
26、足够高时，一个活菌会形成一个菌落C为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法【答案】ABD【解析】采用稀释涂布平板计数法获得的菌落有可能是由两个或多个细菌连在一起繁殖而形成的，因此，往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30-300之间的平板进行计数，C错误；借助血细胞计数板，利用显微镜对微生物数目进行直接计数，也是测定微生物数量的常用方法，D正确。故选ABD。12（2021辽宁沈阳高三联考）发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。
27、下列有关发酵过程叙述错误的是（ ）A发酵设备和培养基不需要严格灭菌B要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵过程C在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分D要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件【答案】AC【解析】为防止杂菌污染，发酵时首先要对发酵设备和培养基进行严格灭菌，A错误；为了解发酵过程，要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，B正确；随着发酵的进行，必需的营养组分逐渐减少，因此在发酵过程中需要向装置中再添加必需的营养组分，C错误；为保证发酵过程的顺利正常进行，要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件，D正确。故选AC。二、非选择题13（2021贵州金沙高
28、三月考）木瓜酒味美、营养丰富，且具备延缓衰老、增强免疫之功效。木瓜酒的制作方法如下：首先将成熟的木瓜洗净，用干净抹布擦去水分，切成圆片，再把木瓜片、砂糖。米酒放入容器中，密封后置于阴凉处保存。回答下列问题：（1）将木瓜洗净的目的是_。请写出木瓜酒制作的原理_（用反应式表示）。（2）上述木瓜酒制作过程中，菌种来源于_，该菌种_（填“没有”或“有）染色体；在阴凉处发酵的主要理由是_。（3）将制作好的木瓜酒过滤后可以直接食用，某同学想将其制作成果醋，需要利用的微生物为_。该名同学将菌种直接放人果酒瓶中并拧紧瓶盖防止杂菌污染，结果发现果醋未制作成功，原因是_。【答案】（1）尽可能防止杂菌的污染（或除去
29、污染物） C6H12O62C2H5OH+2CO2（2）米酒中的酵母菌（或米酒） 有 适合酵母菌发酵的温度为1825（或为发酵提供较适宜的温度）（3）醋酸菌 醋酸菌为好氧菌，其在无氧条件下无法进行醋酸发酵【解析】（1）将木瓜洗干净的目的主要是尽可能防止杂菌污染；制作木瓜酒的原理即发酵，其化学方程式为C6H12O62C2H5OH+2CO2。（2）将木瓜放入米酒中，米酒中有酵母菌，可以作为酿酒菌种的来源，酵母菌为真核生物，有染色体；适合酵母菌发酵的温度为1825，因此应在阴凉处发酵。（3）用酒精作为原料制成醋需要醋酸菌，但是醋酸菌为好氧菌，拧紧瓶盖会导致缺氧，因此无法制得果醋。14（2021云南昆明
30、模拟预测）高温淀粉酶在大规模工业生产中有很强的实用性。研究者欲从热菜中筛选产生高温淀粉酶的嗜热菌，筛选流程如下图。实验中所用的1号培养基组分为水、无机盐、NH4NO2和X，号培养基组分为水、无机盐、NH4NO3、X和Y。回答下列问题：（1）产生高温淀粉酶的嗜热菌能从热泉中被筛选出来的原因是_。（2）培养基中的Y物质是_，I、号培养基均属于_培养基。（3）I号培养基接种后需放在摇床重振荡培养，其目的是_，在号培养基上接种完成后将培养基放在恒温培养箱中，调整温度为_（填“30”“50”或“80”）。若培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色等不同，说明样品中含有多种产生高温淀粉酶的嗜热菌，判断
31、依据是_。（4）若要测定嗜热样品中能产生高温淀粉酶的菌体数量，请写出主要实验步骤：_。【答案】（1）由于嗜热菌耐高温，能在热泉中存活（2）琼脂（凝固剂） 选择培养基（3）供应微生物所需氧气，同时使营养物质与菌体充分接触，扩大培养 80 同一种微生物在培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色应相同（4）取嗜热样品并加入一定量的无菌水稀释，涂布到选择培养基上（至少3个），培养一段时间后，选择菌落数为30300的平板统计，再根据公式计算数量。【解析】（1）由于嗜热菌耐高温，能在热泉中存活，所以产生高温淀粉酶的嗜热菌能从热泉中被筛选出来。（2）根据题图可知：X为淀粉，号培养基为固体培养基，所以Y为
32、琼脂（凝固剂），I、号培养基均属于选择培养基。（3）I号培养基接种后需放在摇床重振荡培养的目的是供应微生物所需氧气，同时使营养物质与菌体充分接触，扩大培养；根据题意可知：该嗜热菌是从热菜中提取的，所以应调整温度为80；同一种微生物在培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色应相同。（4）对菌体进行计数的方法一般采用稀释涂布平板法，步骤为：取嗜热样品并加入一定量的无菌水稀释，涂布到选择培养基上（至少3个），培养一段时间后，选择菌落数为30300的平板统计，再根据公式计算数量。15（2021广东广州高三月考）为验证使用公筷的必要性，专家们进行了一项研究：将聚餐时的几种菜品分为两等份，一份使用公筷
33、进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜的时间，进行细菌菌落的总数统计，结果如下表（表中的cfu/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数）。请回答下列问题：菜名结果（cfu/g）餐前餐后公筷餐后非公筷凉拌萝卜丝140001600045000炖萝卜70150220香辣牛蛙60150560（1）每道菜品使用公筷和非公筷夹取相同次数，其目的是排除_变量的干扰。（2）配制完牛肉膏蛋白胨培养基后，需经_法灭菌。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是用_做对照。（3）炖萝卜里的菌落数远远低于凉拌萝卜丝的原因是_。（4）如果不常使用公筷很
34、可能会导致胃幽门螺杆菌交叉传播，为了验证这一假说，有人提取了某胃炎患者家庭的100g剩菜，加入无菌水稀释至1L。取0.1mL上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养，三个平板上胃幽门螺杆菌菌落数均介于30300之间且相差不大，求平均值得到菌落数为A个。实验过程中，接种的方法一般为_，由实验可知每克剩菜中胃幽门螺杆菌数为_个。（5）幽门螺杆菌能产生较强活性的脲酶，若要鉴别上述平板中的菌落是不是幽门螺杆菌，可向培养基中添加尿素和_指示剂。若菌落周围出现_色环带，则表明该菌落很可能为幽门螺杆菌菌落。【答案】（1）无关（2）高压蒸汽灭菌 未接种的牛肉膏蛋白陈培养基（3）炖萝卜经过
35、了高温处理，杀灭了大多数微生物（4）稀释涂布平板法 A102（5）酚红 红【解析】（1）每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰。（2）培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌。配制牛肉膏蛋白陈培养基时，按照配方表计算、称量、溶化、定容后需经高压蒸汽灭菌法灭菌后再倒平板。实验前需要对超净工作台进行消毒处理。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是用未接种的牛肉膏蛋白胨培养基做对照，若空白培养基经培养后无菌落产生，说明培养基的制备是合格的。（3）高温可以杀死部分微生物。凉拌黄瓜（不需高温烹调）餐前的菌落数远远高于其他菜品，最可能的原因是因为没有经过高温烹调，本身携带的细菌数量会多一些。（4）实验室一般来用稀释涂布平板法统计活菌数目，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该方法调查得到的实验结果一般比实际值低。三个平板的菌落数都符合计数要求30-300之间，且平均值为A，则每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量=A011000100=A102个。（5）幽门螺杆菌能产生较强活性的脲酶，脲酶可以将尿素分解成氨和CO2，若要鉴别上述平板中的菌落是不是幽门螺杆菌，可向培养基中添加尿素和酚红指示剂（产物氨可以使培养基成碱性，酚红指示剂遇碱会变红）。若菌落周围出现红色环带，则表明该菌落很可能为幽门螺杆菌菌落。