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1、课后定时检测案38微生物的培养和利用基础对点练考纲对点夯基础考点一微生物的分离和培养1不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物的描述，不正确的是（）A氮源物质可为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一2下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（）A操作顺序为计算称量溶化倒平板灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C待培养基冷却至50 左右时倒平板D待平板冷却凝固后将平板倒过来放置32022衡水中学全国高三联考秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维
2、素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究人员设计了“土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌株”的实验流程。下列叙述错误的是（）A配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节pHB.选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源的培养基C进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作D挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃考点二培养基对微生物的选择作用4通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）大肠杆菌
3、霉菌放线菌固氮细菌A. BC D只有大题冲关练综合创新求突破52022重庆市高三调研我国生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37 、24 h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：（1）用三角瓶取水样前，可采用（填灭菌方法）对三角瓶灭菌；取水池的水龙头用酒精擦拭后，再通过的方法灭菌；在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑和渗透压等条件。（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10 mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上培养，培养时应将平板倒置，其目的
4、是，经过24 h培养，得到的结果为：平板1中41个菌落、平板2中35个菌落、平板3中38个菌落，则所取水样测定结果（填 “符合”或“不符合”）饮用水的标准。（3）若要鉴别水样中的大肠杆菌，培养基中还应加入的非营养物是，若要长时间保存大肠杆菌，可以采用；使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止。62022重庆高三诊断北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆时火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题，努力寻找能分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答：（1）根据甲图，选择培养纤维素分解菌要用培养基。为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加
5、入。为了统计样品中活菌的数目常用方法除稀释涂布平板法外，还有的方法。（2）乙图是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是（填数字），纤维素分解菌将纤维素最终分解为。从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是_。（3）为了长期保存该微生物，可以采用的方法。7微博传言手机细菌比马桶按钮多，央视和北京卫视通过实验展示调查结果如下图。回答下列相关问题：（1）该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、。（2）据图可知，两电视台均采用法接种，该方法需要（多选）。A接种环 B酒精灯C移液管 D涂布器E无菌水（3）通过观察菌落的，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正
6、确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为其原因是：_。（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为个/cm2。该实验的对照组该如何设置_。82022四川省遂宁市高三三诊幽门螺杆菌（Hp菌）因为其导致胃痛、胃癌，成为最臭名昭著的细菌之一。它是一种异养微厌氧菌，胃里面还有胃酸（pH为1.5左右），绝大部分的细菌都适应不了。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请回答下列问题：（1）上述培养过程中，
7、能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是。梯度稀释操作时如何防止杂菌污染。（2）有的化工厂会产生尿素废水，研究者提出用幽门螺杆菌来处理废水，如果该方法可行，根据题干信息可知，该处理过程对温度和氧气的要求是_。（3）实践证明有一种尿素分解菌比幽门螺杆菌处理尿素废水的能力强很多，最可能的原因是前者比后者产生的多，科学家用分配色谱法分离该物质主要是利用了该物质与其他物质的不同。在凝胶色谱柱的装填过程中，装柱前需要根据色谱柱的内体积计算需要的凝胶量的原因是_。（4）为了证明不分餐能导致胃幽门螺杆菌交叉传播，研究者提取了某胃炎患者家庭的100 g剩菜，加入无菌水稀释。取上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适
8、宜的条件下进行培养，三个平板上胃幽门螺杆菌菌落数均介于30300之间且相差不大，求平均值得到菌落数为B个。根据上述情景不能计算出每克剩菜中的幽门螺杆菌的数量，原因是_。课后定时检测案381解析：碳源分为有机碳源和无机碳源，当有机物作为碳源物质时，该物质既是碳源，又可作为能源；当无机物作为碳源物质时，该物质只能作为碳源，不能作为能源；该微生物碳源物质是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。答案：B2解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是：计算称量溶化灭菌倒平板，其顺序不能颠倒；牛肉膏容易吸潮，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸；待培养基
9、冷却到50 左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时开始倒平板，平板冷却凝固后才能倒置。答案：A3解析：配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之前调节pH，避免灭菌之后调pH造成杂菌污染，A错误；选择培养时，为分离分解纤维素的微生物菌种，应使用纤维素为唯一碳源的培养基，B正确；进行梯度稀释时，为了无菌操作，应在酒精灯火焰旁完成各种操作，C正确；挑选菌株后，为了防止造成污染，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃，D正确。答案：A4解析：缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养
10、基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。答案：A5解析：灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢与孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。统计菌落数目使用的方法有显微镜直接计数法和活菌计数法，其中活菌计数法即稀释涂布平板法，一般选择菌落数目在30300的平板进行计数。（1）用无菌三角瓶取水样前
11、，取样器（玻璃制品）需高压蒸汽 （干热）灭菌；水龙头需要通过灼烧灭菌，在微生物培养过程中，需要合适的条件以利于微生物的生长，包括营养条件、温度、 pH和渗透压等。（2）平板倒置后可防止冷凝水滴落培养基，造成污染，影响实验结果；根据测定结果，10 mL水中大肠杆菌的平均值为（413538）/338，小于100，所以符合饮用水标准。（3）鉴别大肠杆菌需要加入伊红美蓝试剂，使菌落呈黑色；长时间保存菌种可采用甘油管藏法；为防止培养物扩散对环境造成污染，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃。答案：（1）高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法灼烧温度、 pH（2）防止冷凝水滴落污染培养基符合（3）伊
12、红美蓝甘油管藏法培养物的扩散，对环境造成污染6解析：（1）从土壤样液中筛选能分解纤维素的细菌所用的培养基是选择培养基。在培养基中加入刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈 ，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。统计样品中活菌的数目常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数。 （2）透明圈的大小反应了细菌分解纤维素能力的大小，培养基中大的透明圈就是分解纤维素多的地方，所以乙图中最适合分解秸秆的两个菌落是1和4；纤维素是多糖，最终被分解菌分解成葡萄糖；从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能是土壤中纤维素分解菌较少，稀释
13、的倍数太大所致。（3）长期保存菌种可用甘油管藏的方法。答案：（1）选择刚果红（CR）显微镜直接计数（2）1和4葡萄糖土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大（3）甘油管藏7解析：（1）微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。（2）据图分析可知，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。（3）不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，其原因可能是手机的取样和马桶按钮的取样都不相同。（4）根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数（4850
14、52）31020.110（55）2104（个/cm2）。答案：（1）氮源和无机盐（2）稀释涂布平板BCDE（3）形态、大小手机的取样和马桶按钮的取样都不相同（4）2104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养，其它条件与实验组相同且适宜8解析：（1）据图分析可知，“选择培养”为“浓缩”幽门螺杆菌的过程。梯度稀释操作时，无菌操作很关键，要注意试管口和移液管应该在离火焰12 cm处（或者火焰附近）进行实验操作。（2）胃幽门螺杆菌是一种异养微厌氧菌，生活环境具有胃酸（pH为1.5左右），故用幽门螺杆菌来处理废水应该在37 左右、低氧（或无氧）环境中进行。（3）能合成脲酶的细菌才能分解尿素，若一种尿素分解菌比幽门螺杆菌处理尿素废水的能力强很多，最可能的原因是前者比后者产生的脲酶多。科学家用分配色谱法分离该物质主要是利用了该物质与其他物质的相对分子质量不同。根据色谱柱的内体积计算需要的凝胶量的原因是干的凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶的体积差别很大。（4）不知道稀释倍数和接种体积，无法计算出每克剩菜中的幽门螺杆菌的数量。答案：（1）选择培养试管口和移液管应该在离火焰12 cm处（或者火焰附近）进行实验操作（2）37左右、低氧（或无氧）（3）脲酶相对分子质量干的凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶的体积差别很大（4）因为不知道稀释倍数和接种体积