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1、课堂互动探究案1微生物的培养和利用考点一微生物的实验室培养(国考5年7考)(全国卷：2020全国卷；2019全国卷、；2018全国卷、)任务驱动探究突破任务1据某微生物培养基的配方表回答下列问题编号成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL(1)此培养基按物理性质划分属于_培养基，因为没有凝固剂(如琼脂)；按功能划分属于_培养基，因为没有碳源，只有_微生物才能生长(利用空气中的CO2)。(2)此培养基含有微生物所需的营养成分包括水、_和_三类，若加入氨基酸，则它可充当的营养成分包括_、_和生长因子。(3)若要观察微生物的
2、菌落特征，培养基中应添加的成分是凝固剂(琼脂)。(4)若用该培养基来分离尿素分解菌，应除去表中_成分(填表中序号)，加入_和不含氮元素的有机物。师说拓展1培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等来确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：真菌为5.06.0，细菌所需pH为6.57.5，放线菌为7.58.5，故培养不同微生物所需pH 不同。2培养基的营养构成(1)各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。(2)不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。3微生物对主要营养物质的需求
3、特点(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐，碳源可来自大气中的CO2；氮源可由含氮无机盐提供，如硝酸盐等。(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，如糖类、脂肪酸等；氮源也主要由有机物提供，如尿素、牛肉膏等，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。任务2据两种接种方法产生的培养效果图完成下列问题(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是_、_。(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，其最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？任务3大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基操作步骤倒平板的操作方法及注意事项a.写出上图正
4、确的倒平板操作流程：_。b乙中的灭菌方法是_。c丁中的操作需要等待_后才能进行。(2)纯化大肠杆菌的方法纯化培养原理：设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤是_。常用的微生物接种方法有两种a平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面_的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的_，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。系列稀释操作(如下图所示)：涂布平板操作(如下图所示)：(3)菌种的保存方法对于频繁使用的菌种，可以采用_的方法。对于需要长期保存的菌种，可以采用_的方
5、法。特别提醒(1)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项倒平板的适宜温度是50 左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(2)平板划线操作的注意事项第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。灼烧接种环，应待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。划线时最后一区不要与第一区相连。划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个微生物繁殖形成的纯培养物。考向分类对点落实考向一 培养基及其制备方法分
6、析1.经典模拟下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mLA.从物理性质看，该培养基属于液体培养基；从用途看，该培养基属于选择培养基B该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C该培养基缺少提供生长因子的物质D该培养基调节合适的pH后就可以接种使用22022安徽省黄山市高三 “八校联考”蓝白斑筛选是基因工程中筛选重组目的基因常用的一种方法，表现为培养基上出现蓝白颜色的菌落，可以通过颜色为依据直接筛选重组菌。用于筛选的菌为半乳糖苷酶缺陷型菌株，这种宿主菌中编码半乳糖苷酶的部
7、分缺失，不具有生物活性。用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌半乳糖苷酶缺失部分补全的序列，在这段序列中还含有多个限制性酶切位点，便于插入目的基因。半乳糖苷酶能够作用于一种无色化合物Xgal，使其变成蓝色物质。回答下列问题：(1)玻璃和金属材质的实验器材利用_方法灭菌。(2)培养基灭菌后，需要冷却到_左右时，才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要将平板倒扣，其原因是_。(3)为防止杂菌污染，培养基中要添加_。蓝白斑筛选能成功，是因为培养基中添加了_。(4)最终培养基出现的白色的菌落是()A目的基因和载体结合的菌株B只含目的基因的菌体C只含载体的菌体(5)若需要长期保存该菌种，可采用的方法
8、是_。考向二 无菌技术的操作3.经典模拟微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是()煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌ABC D考向三 大肠杆菌的纯化方法及过程分析4.2022甘肃兰州一中高三试题平板冷却凝固后要将平板倒置，其目的是()A利于大肠杆菌的生长B防止空气进入C利于培养基的冷却D防止皿盖冷却水滴入培养基造成污染52022河南省安阳
9、市高三第一次调研一个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库大学的科学家组成的研究小组开发出一种通过大肠杆菌制造丙烷的新技术。科研人员欲对大肠杆菌进行研究和利用，首先要纯化大肠杆菌，请结合所学知识，回答下列问题：(1)纯化大肠杆菌首先需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其步骤是计算、称量、溶化、灭菌、_。对培养基进行灭菌的方法是_，检验培养基是否有杂菌污染的最有效的方法是_。(2)可以估算出样品中大肠杆菌数量的接种方法是_，用该方法得到的结果一般比实际值_(填“偏大”或“偏小”)。(3)某实验小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培
10、养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中_的含量和营养物质的利用率。使用过的培养基及培养物必须经过_后才能丢弃，以防止培养物扩散。(4)如果要检测食品中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入_(填物质)，以观察是否出现_(填颜色)的菌落。考向四 微生物培养与分离的考查6.2022河北省保定市高三二模冰箱并没有灭菌的功能，如果生冷食物长期放在冰箱这个密封的空间里，就会滋生细菌，使冰箱产生难闻的异味。某学习小组利用冰箱内烤肠作样本，在实验室做了微生物培养。请回答下列问题：(1)实验用到的培养基用_法灭菌，灭菌后的培养基需要倒置，原因是_。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一
11、段时间，这样做的目的是_。(2)为了观察培养的微生物种类及数量，需要用_法进行接种，培养适宜时间后，培养基中出现多种形态和颜色不同的_，说明烤肠样品中有多种微生物。(3)一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，用含抗生素的滤纸片处理培养基上分离出的大肠杆菌，观察大肠杆菌生长状况，看滤纸片附近是否出现了抑菌圈，再从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌接种培养并重复以上抗生素处理，在连续培养几代后，抑菌圈的平均直径_(填“不变”、“变小”或“变大”)，原因是_。考向五 微生物实验室培养的拓展应用7.全国卷，37在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃
12、和金属材质的实验器具_(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能_。在照射前，适量喷洒_，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过_(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是_。8经典高考临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性
13、。回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37 培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况
14、下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。师说拓展1消毒与灭菌比较条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器2.纯化微生物的接种方法比较比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线一系列的梯度稀释；涂布平板法操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释
15、度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度菌体获取在具有显著的菌落特征的菌落中挑取菌体从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板9经典高考有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围
16、分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。考点二 微生物的分离、计数与筛选(国考5年4考)(全国卷：2019全国卷、；2018全国卷；2017全国卷)任务驱动探究突破任务1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)实验原理分解尿素的原理土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成_，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_作用。筛选菌株的原理微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物
17、才能够生长。(2)统计菌落数目的方法显微镜直接计数法a.原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。b.方法：用血球计数板计数。c缺点：不能区分死菌与活菌。间接计数法(活菌计数法)a原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。b操作：()设置重复组，以增强实验的说服力与准确性。()为了保证结果的准确，一般应选择菌落数在30300的平板进行计数。c计算公式：每克样品中的菌株数(CV)M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释
18、液的体积(mL)，M代表稀释倍数。(3)实验流程土壤取样_微生物的培养与观察细菌的_。名师提醒(1)一般选用相差不大的平板计算平均值，选用菌落数在30300的平板进行计数。(2)设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，设置三个以上的平板。(3)在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目，如果某个平板的菌落数与其他组差别甚远，说明该平板操作过程中出现失误，应舍弃。(4)统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
19、任务2分解纤维素的微生物的分离(1)实验原理纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，该复合酶具有催化分解纤维素的作用，其作用过程如下：筛选原理a培养基：以_为唯一碳源的选择培养基。b.方法：刚果红染色法。刚果红纤维素_复合物纤维素分解菌,纤维素酶红色消失，出现_，即可根据是否产生_来筛选纤维素分解菌。(2)筛选流程土壤取样_梯度稀释将样品涂布到_的培养基上挑选产生_的菌落。土壤取样：选择富含_的环境。将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。a制备鉴别培养基：主要碳源是_。b刚果红染色法。()先培养_，再加入刚果红进行颜色反应；()_时加入刚果红。进一步鉴定a为确定得到的
20、菌是否是纤维素分解菌，还需进行_的实验。b测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_进行定量测定。(3)分离纤维素分解菌的几个关键步骤分离纤维素分解菌的实验中应先用_，再用_。选择培养基为_培养基，以纤维素作为_的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。鉴别培养基含琼脂，为_培养基，因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落，刚果红染色法应用的就是此种培养基。任务3筛选微生物的两个实例比较比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离方法利用以_为唯一氮源的选择培养基进行选择培养利用_的选择培养基进行
21、选择培养原理只有分解尿素的细菌能够合成脲酶，才能在以_为唯一氮源的培养基上生长因为培养基中含有丰富的纤维素，因此能够_的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖鉴别在培养基中加入_，_说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌刚果红染色法，周围出现_的菌落为分解纤维素的微生物的菌落任务4选择培养基的应用实例(1)选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，其目的是培养、分离出特定微生物。(2)选择培养基的应用实例加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分)改变培养基的营养成分利用培养基“特定化学成分”分离通过某些“特殊环境”分离归纳拓展自养型与异养型微生
22、物培养基的区别(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐，碳源可来自大气中的CO2，氮源也可由含氮无机盐提供。(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要是由有机物提供的，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。任务5选择培养基与鉴别培养基的比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据_而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入_分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生_而设计鉴别不同种类的微生物_可以鉴别大肠杆菌特别提醒目的微生物选择的三种方法(
23、1)利用平板划线法或稀释涂布平板法接种在固体平板培养基上，根据目的微生物特定的菌落特征挑选目的微生物。(2)利用选择培养基直接筛选目的微生物。(3)利用鉴别培养基鉴别筛选目的微生物。考向分类对点落实考向一 微生物分离与计数的考查1.土壤中含有多种微生物，某研究小组欲分离能在Fe2污染的土壤环境下生存的希瓦氏菌，进行了相关研究。回答下列问题：(1)配制培养基：加入牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl、H2O及_等并灭菌；该培养基按功能划分，属于_培养基。(2)分离希瓦氏菌：将10 g土样溶于90 mL蒸馏水中，再稀释成多个倍数，取多个稀释倍数的土壤样品液0.1 mL分别接种到多个平板上，这样做的目的是
24、_；培养一段时间后，A、B研究员在105稀释倍数下得到的结果：A涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310；B涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、165、175、184，则每克土壤样品中的希瓦氏菌数量最可能为_个。(3)进一步纯化希瓦氏菌：采用平板划线法接种培养一段时间后，发现第一划线区域上都不间断地长满了菌落，第二划线区域上几乎无菌落，分析出现此现象的原因可能是_(答出两点)。(4)研究人员还欲采用测定ATP含量的方法估算希瓦氏菌数，该方法的依据是_，此方法与显微镜直接计数相比，得到的希瓦氏菌数目_(填“多”或“少”)，原因是_。2全国卷已知微生物A可以产生油脂，微生
25、物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用_染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用_直接计数；若要测定其活菌数量，可选用_法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6
26、mg，则上述三个温度中，_条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_设计后续实验。3全国卷为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过_灭菌。在第二次及以后的划线
27、时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)示意图A和B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。考向二 菌种筛选的拓展应用4.全国卷植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_分解成_。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成_色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：酵母膏无机盐淀粉纤维
28、素粉琼脂CR溶液水培养基甲培养基乙注：“”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_；培养基乙_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。考向三 土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌5.2022广东省湛江市高三调研有些细菌可以分解纤维素，从而消除纤维素长期堆积对土壤造成的污染。某生物小组欲从土壤中筛选出能高效降解纤维素的菌株。请回答问题：(1)纤维素分解菌可产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，其中能使纤维素分解成纤维二糖的酶是_和_。(2)筛选纤维素分解菌的常用方法是_，当纤维素被分解后，培养基中会出现_。接种过程中，要将
29、土壤样品稀释液接种于以_作为唯一碳源的固体培养基，从功能上来说，该培养基属于_培养基。(3)制作培养基的过程中，一定要注意灭菌，除灼烧灭菌外，实验室常用的灭菌方法有_和_。(4)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法是_和_。网络建构提升长句应答必备1无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。2培养基的制备过程包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤，倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水珠落入培养基以造成污染。3大肠杆菌的纯化包括平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法要求多次划线，稀释涂布平板法要求将菌液充
30、分稀释。4微生物的计数要求制作多个平板，且每个平板上能长出30300个菌落。5尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基，前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。翻阅教材品原味12020全国卷，37某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题：(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_。甲、乙培养基均属于_培
31、养基。(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2107个/mL，若要在每个平板上涂布100 L 稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_倍。(3)在步骤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是_(答出1点即可)。(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：_。(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即_。人教选修1P14(高考VS教材)2全国卷，37已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养
32、基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45 g/L)。回答下列问题。(1)在号培养基中，为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_，其原因是_。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_。(4
33、)假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_和_。人教选修1P15(高考VS教材)人教选修1P22(高考VS教材)人教选修1P22(高考VS教材)人教必修1P94(高考VS教材)3全国卷，37物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择_菌落进一步纯
34、化，选择的依据是_。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_，三处滴加量相同。一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_。人教选修1P22(高考VS教材)人教选修1P28(高考VS教材)4全国卷，37回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是_。硝化细菌在没有碳源的培养基上_(填“能够”或“不能”)生长，原因是_