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1、课时跟踪练34一、选择题1(2020河南开封模拟)关于灭菌和消毒的理解,正确的是()A灭菌是指杀灭物体内外的一切微生物,但不包括芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是相同的C常用的灭菌法有灼烧灭菌、干热灭菌、酒精灭菌D常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、化学药物法解析:灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子;消毒是指用较为温和的物理、化学等方法杀死物体表面或内部的部分微生物,它们的本质不同,A、B错误。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌,C错误。常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法或化学药物消毒法等,D正确。答案:D2下列有关平板划
2、线操作的说法,正确的是()A使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C要将最后一区的划线与第一区的划线相连D最后将平板倒置,放入培养箱中培养解析:接种环在使用过程中需要多次灭菌,第一次灭菌是为了杀死接种环上原有的微生物,每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种,A错误。打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞,B错误。划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连,因为最后一区是细菌最稀少的,而第一区是细菌最致密的,如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果,C错误。最后将平板倒置,防止皿盖上的水
3、滴下落引起污染,D正确。答案:D3(2020山东聊城模拟)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述,正确的是()A分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的B倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D若实验组菌落平均数为37个/平板,空白对照平板上有3个菌落,则本组菌落数的平均值为34个/平板解析:分解尿素的细菌是异养型细菌,不能以CO2为碳源,A错误;倒平板时,正确的做法是用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(1020 mL
4、)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,B错误;无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH的稳定,所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定,C正确;在完全正确的操作情况下,空白对照组中不应出现菌落,若空白对照组出现菌落,说明操作过程中存在杂菌污染,属于实验失误,所有实验数据均不应采用,D错误。 答案:C4(2020上海模拟)下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是()A步骤倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置B步骤将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后进行平板划线C步骤应多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落D步骤培养箱培养后可用来对X细菌
5、进行计数解析: 在倒好平板后,不能立即将其倒置,否则会使液体流出,应待液体凝固后倒置,故A错误;接种环在火焰上灼烧后,应待其稍微冷却后再蘸取菌液,否则温度过高,会使细菌死亡,故B错误;在平板划线时,要从多个方向划线,可以使菌液逐渐稀释,培养后出现单菌落,从而对菌种进行分离,故C正确;步骤通过平板划线可得到单个的细菌,能对细菌进行分离,若要对细菌进行计数,需采用稀释涂布平板法,故D错误。答案:C5(2020东莞模拟)三个培养皿中分别加入10 mL 不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36 h后,计算菌落数,结果如下表所示。下列选项正确的是()培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、
6、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0A该实验采用的是液体培养基B该实验采用平板划线法接种C和对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D和对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:根据题表分析可知,培养基中都加入了琼脂,说明该实验采用的是固体培养基,A错误;微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,二者均可以分离菌种,但是平板划线法无法计数,本题需要计算菌落数,因此接种方法为稀释涂布平板法,B错误;和有两个自变量,没有遵循单一变量原则,不能形成对照实验,不能说明大肠杆菌的生长不需要生长因子,而与对照可说明大肠杆菌的生长需要生长因子,C错误;和对照,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖,D正确。答案:D6
7、(2021河北邯郸模拟改编)精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶,不能在缺少精氨酸的培养基上生长,但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。下图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌并进行筛选的过程示意图,过程将紫外线照射处理的菌液接种在某培养基上,培养至菌落不再增加时,平板上的菌落如图甲所示。过程向培养基中添加某种物质,继续培养,得到如图乙所示平板。下列相关叙述正确的是()A紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体变异B图乙中菌落B为精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌C过程向培养基中添加的某种物质是鸟氨酸D过程所用培养基是一种鉴别培养基解析:谷氨酸棒
8、状杆菌是原核生物,没有染色体,紫外线照射只能导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变,A错误;与图甲平板相比,图乙平板上菌落数多,说明过程往培养基中添加的某种物质是精氨酸,新出现的菌落为精氨酸依赖营养缺陷型菌株,B正确,C错误;图甲平板上只有野生型菌株,因此该培养基是一种选择培养基,不是鉴别培养基,D错误。答案:B二、非选择题7(2021佛山一模)2,4D是一类广泛应用于单子叶作物田间的除草剂,其过量施用会导致土壤污染。某研究小组采集土样,按如图所示流程,从土壤中筛选2,4D降解菌株,并获得了菌种。 回答下列问题: (1)该实验应从_的土壤中采样。 (2)选择培养基中应添加2,4D作为唯一碳源,选择培养
9、的目的是_。(3)与选择培养基相比,用于划线纯化的培养基中还应适量添加_(物质)。从纯化结果判断土壤中含有多种2,4D分解菌,判断依据是_。 (4)现欲从多种2,4D分解菌中筛选出2,4D高效降解菌株,请完善以下实验思路: _; 将各组液体培养基放置在相同且适宜的条件下培养一段时间; _。解析:(1)筛选目的菌株,应该到相应的环境中取样,故该实验应从富含2,4D的土壤中采样。(2)选择培养基中以2,4D作为唯一碳源,选择培养的目的是使能够分解2,4D的微生物大量繁殖,不能分解2,4D的微生物不能生存。 (3)选择培养基是液体培养基,划线纯化的培养基是固定培养基,故应该在划线培养基中添加琼脂,可
10、根据菌落的形状、大小、颜色、隆起程度、光滑程度等观察菌落,从而判断从土壤中筛选出多种 2,4D分解菌。(4)设计实验方案要遵循单因子变量原则、对照原则等,无关变量相同且适宜。欲从多种2,4D分解菌中筛选出2,4D高效降解菌株,可设计如下实验思路:将多种2,4D 分解菌分别等量加入某一相同浓度的2,4D溶液中(已灭菌彻底的2,4D溶液,且此浓度可通过预实验锁定);将各组液体培养基放置在相同且适宜的条件下培养一段时间;分别测定每组2,4D溶液中的2,4D残留量。 答案:(1)长期使用2,4D(2)富集可降解2,4D的菌株(3)琼脂 培养基上出现多种(特征不同的)菌落(4)将不同菌落分别等量接种到含
11、有等量2,4D的液体培养基中检测各组培养基中2,4D剩余量8(2021江门一模)香蕉是我国南方四大果品之一,长期以来,人们只食其果肉,而对占整果重量超过35%的果皮随意丢弃,未有充分的开发利用。单宁是一种多酚类物质,溶于水及乙醇,具有止血愈伤、抑菌等功效。某研究小组开展了香蕉皮单宁提取与抑菌性研究,请分析并回答相关问题。 (1)制备固体培养基,以_方法灭菌。用_法分别将细菌、霉菌、酵母菌接种到上述培养基中。 (2)将吸水性强的滤纸用打孔器打成直径6 mm的圆形小纸片,分装于洁净干燥的培养皿中,灭菌后将滤纸片放入0.5%的提取液中浸泡24 h,另有2组以无菌水和0.5%山梨酸钾(常用食品防腐剂)
12、水溶液作为对照。将处理后的滤纸片放入已接种的培养基中,在培养箱中培养适宜时间后,测量各种供试菌的抑菌圈直径,结果如表所示。 供试菌种抑菌效果0.5%单宁提取物0.5%山梨酸钾无菌水大肠杆菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌黑曲霉黄曲霉啤酒酵母注:为无抑菌圈,菌落基本覆盖整个培养基的表面;为抑菌圈直径6.08.0 mm;为抑菌圈直径8.010.0 mm;为抑菌圈直径10.012.0 mm;为抑菌圈直径12.0 mm。 香蕉皮单宁提取物是否比山梨酸钾能更好地抑制微生物导致的食物中毒?请根据表实验结果,简述你的观点。 (3)为了避免偶然性因素对实验结果带来误差,该实验方案应如何改善? 解析:(1) 制备固体
13、培养基,以高压蒸汽方法灭菌。用稀释涂布平板法分别将细菌、霉菌、酵母菌接种到上述培养基中。 (2)由分析可知,香蕉皮单宁提取物对金黄色葡萄球菌等细菌抑制效果强于山梨酸钾,对黑曲霉等真菌抑制效果弱于山梨酸钾,由此推测香蕉皮单宁提取物可能更适合用于抑制细菌导致的食物中毒,故不能确定香蕉皮单宁提取物是否比山梨酸钾能更好地抑制微生物导致的食物中毒。 (3)为了避免偶然性因素为实验结果带来误差,需要进行多次重复实验,测量抑菌圈直径取平均值。答案:(1)高压蒸汽稀释涂布平板(2)不一定,香蕉皮单宁提取物对金黄色葡萄球菌等细菌抑制效果强于山梨酸钾,对黑曲霉等真菌抑制效果弱于山梨酸钾。(3)进行多次重复实验,测
14、量抑菌圈直径取平均值。9(2021韶关一模)科学家在垃圾填埋场的土壤中筛选出一种能够降解聚氨酯的细菌假单胞菌TDA1,该菌通过分泌细胞外酶,催化聚氨酯转变为可生物降解的化合物。筛选分离培养聚氨酯分解菌的流程如下: 土壤取样振荡培养聚氨酯分解菌分离、筛选聚氨酯分解菌分解效果的鉴定确定聚氨酯分解菌为假单胞菌TDA1 (1)振荡培养时,培养基应以_作为唯一碳源,分离筛选可用_法将菌液接种到固体培养基上。 (2)筛选过程中振荡培养的目的是_。 (3)若将振荡培养后的培养液稀释106倍后,每个平板接种0.1 mL稀释培养液,当平板生长的平均菌落数为_个,可认为每mL培养液中活菌数达到了6108个活细胞。
15、解析:(1)因为要筛选能够降解聚氨酯的细菌,所以培养基应以聚氨酯作为唯一碳源,能分解聚氨酯的细菌才能在此培养基上繁殖。固体培养基上进行接种的方式有:稀释涂布平板或平板划线法。 (2)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量,且可以使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,从而有利于菌体的繁殖,提高菌体浓度。 (3)由题可知,若将振荡培养后的培养液稀释106倍后,每个平板接种0.1 mL稀释培养液,假设平板平均菌落数为m,则每mL培养液中活菌数为(m0.1)1066108个活细胞,由此可以计算出平板生长的平均菌落数m60个。 答案:(1)聚氨酯稀释涂布平板或平板划线(2)提高培养液中溶解氧的含量
16、,使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,从而提高菌体浓度(3)6010(2021深圳龙岗一调)自从法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用以来,人们认识到微生物在发酵食品的加工中起着极其重要的作用,如今形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题: (1)果酒制作过程中严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物,通常所指的发酵条件包括_。 A温度控制B溶氧控制CpH控制 D酶的控制 (2)苹果酒在_(填微生物)的作用下,经过深层发酵可形成苹果醋。乳酸菌与酿制果醋的菌种在代谢方式上的主要区别是_。 (
17、3)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,乳酸菌仍不能正常生长,还需要在培养基中添加_。应用平板划线法分离乳酸菌时,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线,并划线数次,其原因是_。 (4)生物工程常需分离酵母菌和Taq耐热菌,分离方法常用选择培养基。例如,用加高浓度食盐的适宜培养基分离金黄色葡萄球菌。请提出从含细菌、酵母菌和Taq耐热菌的培养液中分离酵母菌和Taq耐热菌的方案。 分离酵母菌:用添加_的培养基分离酵母菌,按功能分,该培养基称为_。分离Taq耐热菌:用_培养条件分离Taq耐热菌。解析:(1)酵母菌发酵需要控制条件:温度1825 ;溶氧控制,即要先通气后密封;pH
18、控制,偏酸性,故选A、B、C。(2)苹果醋制作的菌种是醋酸菌,乳酸菌和醋酸菌都是原核生物,在代谢方式的区别是乳酸菌是厌氧型细菌,醋酸菌是好氧型细菌。(3)乳酸菌的生长繁殖除了基本的营养物质外,还需要满足添加维生素等特殊要求。平板划线的目的是微生物的分离纯化,每次划线总是从上一次划线的末端开始划线,这是由于线条末端细菌数目比较少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(4)选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长,而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。分离酵母菌时,由于酵母菌属于真菌,故可用加抗生素的选择培养基分离酵母菌;分离Taq耐热菌可根据该菌的特点用高温条件进行选择培养。答案:(1)A、B、C(2)醋酸菌乳酸菌是厌氧型细菌,醋酸菌是好氧型细菌(3)维生素线条末端细菌数目比较少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落(4)抗生素选择培养基高温