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1、ICS65.020.20CCS B 3121辽宁省地方标准DB21/T 38142023植物组织培养职业技能等级Vocational Skill Level for Plant Tissue Culture2023-09-30 发布2023-10-30 实施辽宁省市场监督管理局发 布DB21/T 38142023I目次前言.II1 范围.12 规范性引用文件.13 术语和定义.14 等级划分.15 初级职业技能要求.16 中级职业技能要求.37 高级职业技能要求.5附录 A（资料性）植物组织培养常用灭菌方法.8附录 B（资料性）植物组织培养常用灭菌剂种类.9参考文献.10DB21/T 3814
2、2023II前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省教育厅提出并归口。本文件起草单位：辽宁农业职业技术学院、海城市三星生态农业有限公司。本文件主要起草人：刘淑芳、梁春莉、陈杏禹、张青、关丽霞、于红茹、胡小凤、宋丹、刘艳红、翟秋喜、白百一、柳玉晶、于强波、孟凡丽、李洪忠、衣冠东、刘迪、崔颂英。本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。归口管理部门通
3、讯地址：辽宁省教育厅，沈阳市皇姑区崇山东路46-1号，联系电话：024-86896846。文件起草单位通讯地址：辽宁农业职业技术学院，营口市鲅鱼圈区，联系电话：0417-7020001。DB21/T 381420231植物组织培养职业技能等级1范围本文件规定了植物组织培养职业技能等级划分和各等级职业技能要求。本文件适用于植物组织培养职业技能培训、考核、鉴定和评价。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T 1882 林木组织培养技
4、术规程NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程3术语和定义LY/T 1882、NY/T 2306界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1培养基Medium人工配制的、满足植物材料生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。3.2培养基母液Medium Stock Solution按试剂种类和性质分别配制的高于培养基配方浓度的溶液（常见的有 MS 培养基母液、B5培养基母液、White 培养基母液、WPM 培养基母液和 N6培养基母液等）。来源：LY/T 1882-2010，3.5，有修改4等级划分参照教育部发布的职业技能等级标准开发指南（试行）（2020 年版），结合植物组织培养生产实际情况，将
5、植物组织培养职业技能划分为初级、中级、高级三个等级。三个等级依次递进，高等级涵盖低等级职业技能要求。5初级职业技能要求5.1总体要求根据植物组织培养典型工作任务流程，完成母液配制、培养基制备、无菌操作、组培苗培养、驯化、移栽养护、组培苗包装和运输等工作，能够运用基本技能完成本职业的常规工作。DB21/T 3814202325.2母液配制5.2.1母液计算5.2.1.1能按照不同扩大倍数和母液体积，准确计算 MS 培养基母液中药品用量。5.2.1.2能准确计算 MS 培养基中添加的其它物质用量。5.2.2母液配制5.2.2.1能根据不同药品用量正确选用天平。5.2.2.2能准确称量各种药品。5.
6、2.2.3能准确配制 MS 培养基母液。5.2.2.4能正确贮存 MS 培养基母液。5.3培养基制备5.3.1培养基制备5.3.1.1能准确移取 MS 培养基母液。5.3.1.2能制备 MS 培养基。5.3.1.3能准确调整 MS 培养基的酸碱度。5.3.1.4能正确分装 MS 培养基。5.3.2培养基灭菌5.3.2.1能安全规范使用高压灭菌锅对培养基进行灭菌。5.3.2.2能正确贮存培养基。5.4无菌操作5.4.1接种前准备5.4.1.1能完成接种用品准备工作。5.4.1.2能采用 1 种2 种方法对组培用具、工作台面、双手等进行灭菌（见附录 A）。5.4.1.3能采用 1 种2 种物理或化
7、学方法对接种空间进行灭菌（见附录 A）。5.4.2外植体处理5.4.2.1能正确采集茎尖、茎段等常见外植体。5.4.2.2能完成茎尖、茎段等常见外植体的初次修整。5.4.2.3能选用 1 种2 种灭菌剂组合完成茎尖、茎段等常见外植体的表面灭菌（见附录 B）。5.4.3无菌操作5.4.3.1能完成茎尖、茎段等常见外植体的接种及试管苗继代等无菌操作。5.4.3.2能正确切割继代、生根培养过程中的培养材料。5.4.3.3能准确对培养材料进行标记。5.5培养与管理5.5.1培养条件DB21/T 381420233能正确调节培养室的温度、湿度和光照。5.5.2调查与管理5.5.2.1能及时挑选出污染苗。
8、5.5.2.2清楚植物组培技术指标，并能编制试管苗观察表。5.6驯化移栽5.6.1试管苗驯化5.6.1.1能够搭建试管苗驯化的简易设施。5.6.1.2能完成试管苗驯化操作。5.6.2试管苗移栽5.6.2.1能独立完成常用移栽基质的消毒、装盘等操作。5.6.2.2能独立完成简易移栽棚的搭建。5.6.3移栽后管理5.6.3.1能调整移栽后组培苗生长所需的温度、湿度、光照等环境条件。5.6.3.2能对移栽后的组培苗进行肥水管理。5.7组培苗包装和运输5.7.1组培苗包装5.7.1.1能参照组培苗分级标准进行组培苗分级。5.7.1.2能根据运输要求进行组培苗运输前的装箱。5.7.2组培苗运输5.7.2
9、.1能正确搬运组培苗包装箱。5.7.2.2能及时将组培苗包装箱装车摆放。6中级职业技能要求6.1总体要求根据植物组织培养典型工作任务流程，熟练完成母液配制、培养基制备、无菌操作、组培苗培养、驯化、移栽养护、组培苗包装和运输、简易组培室设计和组培技术研发等工作。能够运用基本技能独立完成并指导普通工人进行组培常规工作，能够运用专业技能解决组培过程的常见问题。6.2母液配制6.2.1母液计算6.2.1.1能根据培养目的、植物种类选择基本培养基。6.2.1.2能按照不同扩大倍数和母液体积，准确计算各种培养基母液中药品用量。6.2.2母液配制DB21/T 3814202346.2.2.1能准确配制和贮存
10、各种培养基母液。6.2.2.2能正确溶解植物生长调节剂并配制母液。6.3培养基制备6.3.1培养基制备6.3.1.1能准确移取常用培养基母液。6.3.1.2能准确标记常用培养基。6.3.1.3能独立制备常用培养基。6.3.2培养基灭菌6.3.2.1能判断培养基灭菌过程中出现的一般问题。6.3.2.2能判断培养基灭菌后出现的异常现象。6.4无菌操作6.4.1接种前准备6.4.1.1能采用 3 种以上方法对组培用具、工作台面、双手等进行灭菌（见附录 A）。6.4.1.2能采用 3 种以上物理或化学方法对接种空间进行灭菌（见附录 A）。6.4.2外植体处理6.4.2.1能准确判断不同外植体的采集时期
11、。6.4.2.2能完成不同外植体的预处理。6.4.2.3能选用 3 种以上灭菌剂组合完成不同外植体的表面灭菌（见附录 B）。6.4.3无菌操作6.4.3.1能完成植物组培快繁中的切割、分离、继代等无菌操作。6.4.3.2能完成微茎尖剥离、切割和接种等无菌操作。6.5培养与管理6.5.1培养条件能够根据试管苗的生长情况，正确调节培养室的温度、湿度和光照。6.5.2调查与管理6.5.2.1能够准确调查组培数据。6.5.2.2能准确辨别试管苗的异常现象。6.6移栽驯化6.6.1试管苗驯化能针对不同植物的试管苗，制定驯化方案。6.6.2试管苗移栽6.6.2.1能针对不同移栽基质，独立完成消毒、装盘等操
12、作。DB21/T 3814202356.6.2.2能针对不同植物的试管苗，独立完成清洗、消毒等移栽操作。6.6.3移栽后管理6.6.3.1能根据移栽后组培苗的生长情况，调整所需的温度、湿度、光照等环境条件。6.6.3.2能根据移栽后组培苗的生长情况，判断所需肥料类型和用量。6.7组培苗包装和运输6.7.1组培苗包装6.7.1.1能判断组培苗是否达到出圃标准。6.7.1.2能根据实际情况确定组培苗包装材料和规格尺寸。6.7.2组培苗运输6.7.2.1能确定组培苗运输工具。6.7.2.2能提供组培苗运输条件，保证组培苗运输中完好。6.8组培室设计与管理6.8.1组培室设计6.8.1.1能够设计简易
13、组培室，并绘制平面设计图纸。6.8.1.2能为简易组培室配备常用的仪器设备。6.8.2组培室管理6.8.2.1会使用组培室的常用仪器设备。6.8.2.2能按照 NY/T 2306 进行培养容器和接种器械的清洗。6.8.2.3能科学管理组培室。6.9组培技术研发6.9.1组培信息收集6.9.1.1能准确收集组培技术信息。6.9.1.2能完成组培苗市场调研。6.9.2试验方案设计能根据实际工作需要，设计简单试验并做出对比分析。7高级职业技能要求7.1总体要求根据植物组织培养典型工作任务流程，完成培养基制备、无菌操作、组培苗培养、驯化、移栽养护、组培苗包装和运输、组培育苗工厂设计、组培苗生产计划制定
14、、组培技术研发等工作。能够运用基本技能和专门技能完成较为复杂的工作，能培训和指导组培行业从业者掌握相关技能，能及时发现并协调解决生产中存在的问题。DB21/T 3814202367.2培养基制备7.2.1培养基制备7.2.1.1能及时发现母液贮存中出现的问题，并提出解决方案。7.2.1.2能及时发现培养基制备过程中出现的问题，并提出解决方案。7.2.2培养基灭菌能及时发现培养基灭菌过程中出现的问题，并提出解决方案。7.3无菌操作7.3.1外植体处理7.3.1.1能针对不同外植体选择适宜的灭菌剂种类并调节浓度。7.3.1.2能针对不同外植体调节适宜的消毒时间。7.3.2无菌操作7.3.2.1能完
15、成植物组培快繁和脱毒苗培养。7.3.2.2能够采用核算检测法完成试管苗的病毒检测。7.4培养与管理7.4.1培养条件能够依据植物种类和生长阶段，正确调节培养室的温度、湿度和光照等环境条件。7.4.2调查与管理7.4.2.1能对试管苗的异常现象做出合理的分析，并提出解决方案。7.4.2.2能提出高效的组培快繁方法。7.5组培苗包装和运输7.5.1组培苗包装能根据生产实际制定组培苗包装方案。7.5.2组培苗运输7.5.2.1能根据生产实际制定组培苗运输方案。7.5.2.2能及时发现并解决组培苗运输中出现的问题。7.6组培室设计与管理7.6.1组培室设计7.6.1.1能够设计组培育苗工厂，并绘制设计
16、图纸。7.6.1.2能为组培育苗工厂配备完整的仪器设备。7.6.2组培室管理7.6.2.1能够保养维护组培育苗工厂的仪器设备。DB21/T 3814202377.6.2.2能管理组培育苗工厂。7.6.2.3能制定组培苗生产计划。7.6.2.4能核算组培生产成本并进行效益分析。7.7组培技术研发7.7.1组培信息收集7.7.1.1能制定组培技术信息和市场信息搜集计划。7.7.1.2能分类整理和保存组培信息资料。7.7.2试验方案设计7.7.2.1能完成不同植物的组培试验设计，并撰写试验方案。7.7.2.2能依据组培试验设计独立完成试验过程并得出试验结论。DB21/T 381420238附录A（资
17、料性）植物组织培养常用灭菌方法植物组织培养常用的灭菌方法见表A.1。表 A.1 植物组织培养常用灭菌方法一览表序号灭菌方法序号灭菌方法1紫外线灭菌7高温灭菌器灭菌2臭氧灭菌8烘烤灭菌3湿热灭菌9喷雾杀菌4超声波灭菌10涂抹杀菌5干热灭菌11浸泡灭菌6灼烧灭菌12熏蒸灭菌注：不同等级的培训、考核、鉴定和评价可根据相应等级要求选择灭菌方法。DB21/T 381420239AA附录B（资料性）植物组织培养常用灭菌剂种类植物组织培养常用的灭菌剂种类见表B.1。表 B.1 植物组织培养常用灭菌剂种类一览表序号灭菌剂常用浓度/%1氯化汞0.1-0.22酒精70-753次氯酸钠24漂白粉饱和溶液5过氧化氢10-126新洁尔灭0.57硝酸银18抗菌素0.4-510-3注：不同等级的培训、考核、鉴定和评价可根据相应等级要求选择灭菌剂种类和浓度。DB21/T 3814202310参考文献1 国家职业技能标准（2019 年版），中华人民共和国人力资源和社会保障部制定2 国家职业技能标准编制技术规程（2018 年版），中华人民共和国人力资源和社会保障部制定3 职业技能等级标准开发指南（试行）（2020 年版），教育部职业技术教育中心研究所组织编制