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1、学习必备 欢迎下载 选修内容 基因工程 1（10浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是 A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸 B.用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组 DNA 分子导入原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 2（11天津理综卷）6、某致病基因 h 位于 X染色体上，该基因和正常基因 H中的某一特定序列 BclI 酶切后，可产生大小不同的片段（如图 1，bp 表示碱基对），据此可进行基因诊断。图 2 为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是 A h 基因特定序列中 Bcl 1 酶切位点的消失是碱基序列
2、改变的结果 B II-1 的基因诊断中只出现 142bp 片段，其致病基因来自母亲 C II-2 的基因诊断中出现 142bp，99bp 和 43bp 三个片段，其基因型为 XHXh D II-3 的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现 142bp 片段的概率为 1/2.3（10江苏卷）18下列关于转基因植物的叙述。正确的是 A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中 B转抗虫基因的植物不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C动物的生长激素基因转人植物后不能表达 D如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题 4（11天津理综卷）5.土壤农杆菌能将自身 Ti 的质粒的 T-DN
3、A 整合到植物染色体 DNA 上，诱发植物形成肿瘤。T-DNA 中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R）,它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。据图分析，下列叙述错误的是 A 当细胞分裂素与生长素的比值升高时，诱发肿瘤生芽 B 清除肿瘤中的土壤农杆菌后，肿瘤不再生长与分化 C 图中肿瘤组织可在不含细胞分裂与生长的培养基上生长 D 基因通过控制酶的合成控制代谢，进而控制肿瘤组织生长与分化 5（11年四川卷）5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有 11 个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的
4、过程示意图，有关叙述正确的是 学习必备 欢迎下载 A 过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B 多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，C 过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D应用 DNA 探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 6（2011年浙江卷）6、ada（酸脱氨酶基因）通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 ad
5、a D.每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 答案：C 若选择同尾酶分别切割目的基因和质粒，再由 DNA 连接酶作用形成重组质粒，可能无法被限制性核酸内切酶识别。但实际上在构建重组质粒时，要求连接形成的“接点”序列，必须能被特定的限制性核酸内切酶识别、切割，以便回收插入质粒的目的基因。如出现目的基因不表达、表达水平过低或过高、表达产物的氨基酸序列差错等情况，需要回收目的基因，并进行加工修饰，最终使目的基因表达出人们所预期的效果。因此 B 选项正确。当然准确地说应该至少含有两个限制性核酸内切酶识别位点。7（10 江苏卷）27（8 分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈 l
6、、圈 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图 1 所示的质粒分子经 Sma 切割前后，分别含有个游离的磷酸基团。（2）若对图中质粒进行改造，插入的 Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越。（3）用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，不能使用 Srna 切割，原因是。（4）与只使用 EcoR I 相比较，使用 BamH 和 Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA 的优点在于可以防止。（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。（7）为了从 cDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导
7、入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。【答案】（1）0、2 （2）高 （3）Sma会破坏质粒的抗性基因、外源 DNA 中的目的基因（4）质粒和含目的基因的外源 DNA 片段自身环化 （5）DNA 连接（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞 （7）蔗糖为唯一含碳营养物质 8（2011年安徽卷）31.（21 分）.（9 分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自 cDNA 文
8、库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_和_之间。(3)采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改 PCR 反应体系的主要成分应该包含：扩增是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因
9、植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将自身的质粒的整合到植物染色体上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基学习必备 欢迎下载 缓冲液（含 Mg2+）、水，4 种脱氧核糖苷酸、模板 DNA、_和_。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。答案：（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）（2）启动子 终止子（3）TaqDNA 聚合酶 对干扰素基因特异性的 DNA 引物对 （4）增大细胞贴壁生长的附着面积 9（11年北京卷）31.（16 分）T-DNA
10、 可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的 T-DNA 上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为 T1代）。（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。（2）为筛选出已转化的个体，需将 T1代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为 T2代）。（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将 T2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基
11、因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。（5）若上述 T-DNA 的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。（6）根据 T-DNA 的已知序列，利用 PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取 植株的 DNA，用限制酶处理后，再用 将获得的 DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中 A、B、C、D四种单链 DNA片断中选取 作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。答案：31（16 分）（1）顶芽 生长素（2）（一定浓度的）除草剂（3）（一定浓度的）盐（4）野生型 1 （5）降低 （6）
12、突变体 DNA 连接酶 B、C 10（11 年重庆卷）31.（16 分）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。（1）与拟南芥 t 基因的 mRNA 相比，若油菜 Tn基因的 mRNA 中 UGA 变为，其末端序列成为“”，则 Tn比多编码个氨基酸（起始密码子位置相同，、为终止密码子）。（）图中应为。若不能在含抗生素的培养基上生长，则原因是。若的种皮颜色为，则说明油菜nT基因与拟南芥 T基因的功能相同。（3）假设该油菜nT基因连接到拟南芥染
13、色体并替换其中一个 t 基因，则中进行减数分裂的细胞在联会是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将自身的质粒的整合到植物染色体
14、上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基学习必备 欢迎下载 时的基因为；同时，的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比例最小的个体表现为；取的茎尖培养成 16 颗植珠，其性状通常（填 不变或改变）。（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥（填是或者不是）同一个物种。答案：31.（16分）（1）2 （2）重组质粒（重组 DNA 分子）重组质粒未导入 深褐色（3）TnTntt；黄色正常、黄色卷曲；不变 （4）是 P C R 12（2011年江苏卷）33请回答基因工程方面的有关问题：(1)利用
15、PCR 技术扩增目的基因，其原理与细胞内 DNA 复制类似（如下图所示）。图中引物为单链 DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA片段所占的比例为 。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。(2)设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。第 1 组：；第 2 组：。(3)PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶，下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能，这是因为。(4)用限制酶 EcoRV、Mbol 单独或联合切割同一种质粒，得到的
16、DNA 片段长度如下图(1 kb 即 1000 个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上 EcoRV、Mbol 的切割位点。33（8 分）(1)15/16 三(2)引物 I 和引物局部发生碱基互补配对而失效 引物 I自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA 聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链 DNA 片段的引物链上(4)见右图 是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基
17、因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将自身的质粒的整合到植物染色体上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基学习必备 欢迎下载 细胞工程 13（2011年江苏卷）16下列有关植物组织培养的叙述，正确的是 A愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工
18、种子 D植物耐盐突变体可通过添加适量 NaCl 的培养基培养筛选而获得 14（2011年江苏卷）14关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 15（2010安徽理综）II（9 分）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：外植体 愈伤组织 芽、根 植株 请回答：（1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取_作为外植体，其依据是_ _。
19、（2）在过程中，常用的 MS 培养基主要成分包括大量元素、微量元素和_，在配制好的培养基中，常常需要添加_，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后 25d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是_。（3）在过程中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是_。答案：茎尖、根尖 不含病毒 有机物 植物激素 外植体消毒不彻底 培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低 16（10新课标）38（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全
20、部 。(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是 (脱落酸、2，4-D)。（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过
21、程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将
22、自身的质粒的整合到植物染色体上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基学习必备 欢迎下载【答案】遗传性、快、遗传信息；（2）微生物；（3）下生根、细胞分裂素、2,4-D；（4）逐渐减小 先增加后下降、不能；（5）降低 17（2011年浙江卷）31.(12 分)(1)实验分组：甲组：培养液+Y细胞+3H-TdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生理盐水 乙组：培养液+Y细胞+3H-TdR+X(生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。（2）分别测定两组的 CRD（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其 CRD，求每组平均值并进行统计
23、分析。（与说明，答题时用 X、CRD、3H-TdR表示相关名词；Y 细胞是能增殖的高等动物体细胞）请回答：（1）实验目的：（2）预测实验结果集结论：_。（3）实验中采用3H-TdR的原因：_。答案：31.（13分）（1）探究 X 对 Y 细胞增殖（DNA 合成）的影响（2）如果乙组 CRD 明显高于甲组，说明 X 对 Y 细胞增殖（DNA 合成）有促进作用。如果乙组 CRD 与甲组基本相同，说明 X 对 Y 细胞增殖（DNA 合成）无影响。如果乙组 CRD 明显低于甲组，说明 X 对 Y 细胞增殖（DNA 合成）有抑制作用。（3）3H-TdR是 DNA 合成的原料之一，可根据 CRD 变化来判
24、断细胞增殖（DNA 合成）情况 胚胎工程 19（10江苏卷）17老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的 一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降某些基因的突变会导致 一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是 A胚胎移植技术 B胚胎干细胞技术 C单克隆抗体技术 D基因治疗技术 20（10 海南卷）26（18 分）（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、以及在母体中发育和产出等过程。（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该
25、时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和。（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是。26（1）早期胚胎培养 胚胎移植（2）获能 第一极体（3）促性腺激素（其他合理答案也给分）细胞分裂 1（6 分）下图表示某种生物的细胞内染色体及 DNA 相对量变化的曲线图。根据此曲线图回答下列问题：(注：横坐标各个区域代表细胞分裂的各个时期，区域的大小和各个时期所需的时间不成比例)(1)图中 8 处发生的生理过程叫_，(2)若该生物体细胞中染色体数为 20 条，则一个细胞核中的 DNA 分子数在 46 时期为_。是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连
26、接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将自身的质粒的整合到植物染色体上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基学习必备 欢迎下载 (3)以该生物体细胞中的两
27、对同源染色体为例,请画出该生物细胞处于 67 时期的细胞分裂示意图。受精作用 20 图略 2（2011 上海）28右图表示雄果蝇进行某种细胞分裂时，处于四个不同阶段的细胞（）中遗传物质或其载体（）的数量。下列表述与图中信息相符的是 A所处阶段发生基因自由组合 B代表初级精母细胞 C代表染色体 D中的数量比是 2：4：4：1 是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸用连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组分子导入原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞天津理综卷某致病基因位于染色体上该基因和正常基因中的某一特定序列因特定序列中酶切位点的消失是碱基序列改变的结果的基因诊断中只出现片段致病基因来自母亲的基因诊断中出现和三个片段基因型为的丈夫表现型正常儿子的基因诊断中出现片段的概率为江苏卷下列关于转基因植物的叙述正确的物的生长激素基因转人植物后不能表达如转基因植物的外源基因来源于自然界则不存在安全性问题天津理综卷土壤农杆菌能将自身的质粒的整合到植物染色体上诱发植物形成肿瘤中含有植物生长素合成酶基因和细胞分裂素合成酶基