动物生理学实验指导书.docx

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1、生 理 学试验指导10名目试验一 神经生理试验1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备1.2 神经干动作电位引导1.3 神经传导速度的测定试验二 血液生理试验2.1 红细胞计数2.2 红细胞渗透脆性试验试验三 循环生理试验之蛙心起搏点及心肌特性3.1 蛙心起搏点3.2 心肌特性试验四 循环生理试验之蛙心灌流4.1 蛙心灌流试验五 循环生理试验之动脉血压的直接测定及其影响因素5.1 动脉血压的直接测定及其影响因素试验六 消化生理试验7.1 胃肠运动的直接观看7.2 小肠吸取和渗透压的关系7.3 离体肠段运动描记试验七 泌尿生理试验8.1 尿的分泌及其影响与调整试验八 泌尿、循环、呼吸生理综合试验综合 打

2、算07 级 试验九 肌肉生理试验9.1 阈刺激、阈上刺激与最大刺激9.2 肌肉的单收缩9.3 肌肉的强直收缩和收缩总和试验一 神经生理试验年月日星期1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备目的和原理：蛙类的一些根本生命活动和生理功能与温血动物相像，它的离体组织所需要的生活条件又比较简洁，易于掌握和把握，因此在试验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经腓肠肌标原来争论神经肌肉的一般生理，如：神经干动作电位引导、神经传导速度测定、肌肉收缩的机能等。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：中式剪子，眼科剪，眼科镊，蛙板，玻璃分针玻璃勾，探针，锌铜弓，培育皿，大头针，棉花，线，任氏液，纱布等。试验方法：1、破坏脑脊髓 取一只蟾蜍或

3、蛙，用自来水冲洗干净。保定好，用探针从枕骨大孔垂直刺入，然后向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。此时蟾蜍四肢松软，呼吸消逝，表示脑脊髓破坏完全。2、剪除躯干上部及内脏，提起蟾蜍的背部，在骶髂关节水平以上0.5-1.0 厘米处剪断脊柱见图，用左手捏住蟾蜍骶髂关节以下的脊柱，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持中式剪刀，沿脊柱两侧剪除皮肤肌肉和一切内脏留意勿损伤坐骨神经，仅留骶尾联合以下的后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。3、剥皮 剪去泄殖腔外口的皮肤后，用镊子夹住脊柱断端的皮肤边缘，剥掉躯干及后肢的全部皮肤，然后将已剥掉皮肤的后肢，背位放在预先用任氏液浸湿过的清洁蛙板伤。4

4、、分别两腿 用玻璃分针分别和挑起坐骨神经丛，剪断神经下的骶骨及骨盆联合前缘的软组织，留下一块椎骨。沿脊髓正中线剪开脊椎，将剪开的脊椎骨连同神经分别放在左右大腿的肌肉上，此时须留意不得伤及两侧坐骨神经，最终在骨盆联合部猛然剪开两腿，将两条腿浸于盛有任氏液的培育皿中。5、分别坐骨神经 取一只腿，反面对上放在蛙板上，用玻璃分针沿股二头肌及半膜肌所形成的肌沟，剥离肌膜，露出位于肌沟深处的坐骨神经，然后沿神经走向认真分别坐骨神经。6、完成坐骨神经小腿标本 在膝关节上方将股骨四周全部的大腿肌肉完全分别，从膝关节四周剪掉肌肉，露出股骨后，在膝关节以上1 厘米处剪断股骨，即成为坐骨神经小腿标本。7、完成坐骨神

5、经腓肠肌标本 在跟腱下穿线结扎，贴股面剪下跟腱，使腓肠肌与四周组织脱离。在膝关节下将其他组织完全剪断，即成为有一段股骨的坐骨神经腓肠肌标本见图。8、用锌铜弓检查标本 用经任氏液润湿的锌铜弓快速接触坐骨神经，假设腓肠肌发生明显而灵敏的收缩，则表示标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培育皿中，已备试验之用。留意事项：1、在剥离标本时，不能用金属器械触碰神经干。2、分别时，肯定要把神经四周的结缔组织剥离干净。3、不能使皮肤分泌物和血液等玷污神经和肌肉，也不能用水冲洗，以免影响组织的兴奋性， 要随时用任氏液潮湿神经和肌肉，防止枯燥。4、从第4 步起每步均用锌铜弓检察标本的兴奋性，如兴奋性太低或

6、丧失，说明神经的构造或机能受到损伤，则应放弃此标本，重制作。试验结果分析：1、任氏液的生理作用是什么？2、为什么不能用金属物品触碰神经干？1.2 神经干动作电位引导目的和原理：了解双相和单相动作电位的形成和波形，并生疏 PcLab 生物信号采集处理系统的使用方法。双相动作电位：将两个记录电极置于神经干的正常部位时，描记出的曲线是双相的，叫做双相动作电位；假设将一记录电极置于正常部位，另一电极置于损伤处，则记录出的曲线是单相的，叫做单相动作电位：伪迹：刺激电流沿神经干外表的电解质液传导到记录电极下而被引导、放大出来的电信号，几乎与刺激信号同时消灭。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：示波器，前置放

7、大器，电子刺激器，神经屏蔽盒，蛙类手术器械，滤纸片，棉球，任氏液。试验方法：1、制备蟾蜍或蛙坐骨神经标本 与制备坐骨神经腓肠肌标本方法一样，只是将坐骨神经分别至趾部，然后两端结扎，将坐骨神经从机体上完全分别，不带任何组织。2、连接 PcLab 生物信号采集处理系统 刺激器使各仪器同步。3、将标本放入潮湿的屏蔽盒中，调整各仪器的参数至屏幕上明显地显示出伪迹和双相动作电位的波形。留意事项：1、神经的两端不行碰在屏蔽盒壁上，也不要把神经两端折叠在电极上，以免影响动作电位的大小及波形。2、刺激的强度要由弱到强，逐步增加至适宜强度，以免过强刺激损害神经标本。3、检查刺激电极与引导电极之间接地是否良好，并

8、承受各种方法削减伪迹。4、在操作过程中要防止神经标本因蒸发而枯燥。试验结果分析：试验中，在肯定范围内，神经干动作电位的幅度随刺激强度的转变而转变，这是否与单根神经纤维动作电位的“全或无”定律相冲突？为什么？试验二 血液生理试验年月日星期2.1 红细胞计数目的和原理：了解红细胞计数的原理并把握其计数的方法；用特制的计算红细胞的吸管， 吸取肯定量的血液，用稀释液将血液稀释 100 或 200 倍，然后将稀释后的血液置于记数室中，在显微镜下记数肯定容积的稀释血中的红细胞数，再将结果换算成每升血液内的红细胞数。试验对象 动物血液试验器材和药品 显微镜，采血针，酒精棉球，95%酒精，75%酒精，生理盐水

9、，蒸馏水， 血球计红细胞稀释吸管，记数板，手摇计数器，盖玻片，栽玻片，乙醚，1%的氨水。试验方法1、洗记数板和红细胞血管：吸血管中血迹先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗三遍，然后用95%酒精洗两次以除去管内的水分，最终，吸入乙醚1-2 次，以除去酒精。每次排解管内洗涤液时不行用嘴吹，以免吹入水气，可将橡皮管折叠积压数次，便可驱尽。计数板只能用自来水和蒸馏水相继冲洗，然后用擦镜纸轻拭，切不行用酒精和乙醚洗涤。2、了解血球计的构造 血球计由计数板和红细胞稀释吸管组成，计数板为长方形玻璃板， 中间有四条平行槽沟，在中间两条槽沟之间，有一条横槽沟，使其构成长方形的平台。平台比整个玻璃板的平面低 0.1mm

10、，所以当搁上一块玻璃片后，平台与盖玻片之间距离高度为 0.1mm。两平台中心局部各有一计数室见图，为每边 3mm 长的方格，并划分为 9个大方格，每个大方格的面积为 1 平方毫米，体积为 0.1 立方毫米。四角的大方格又各分为 16 个中方格，使用于白细胞计数。中心的一个大方格则由双线划分为 25 个中方格，每个中方格面积为 0.04 平方毫米，体积为 0.004 立方毫米，每个中方格又分为 16 个小方格， 适用于红细胞计数有的计数室划分为 16 个中方格，每个中方格也划分为 16 个小方格， 但其小方格的面积均一样。红细胞稀释细管如下图，其上有刻度 0.5、1.0、101。3、将血液样品混

11、匀 用红细胞稀释吸管准确吸血至刻度 0.5 处，然后马上吸取稀释液生理盐水至刻度 101 处，然后用手指按住吸血管的上下端，轻轻摇动，使血液与稀释液充分混合均匀，此时稀释倍数为 200 倍；假设吸血管是超过刻度 0.5，可进而吸至 1.0 处， 然后再吸入稀释液至 101 处，摇匀备用，此时稀释倍数为 100 倍。4、计数 调整好显微镜，要留意显微镜的载物台应确定水平，以免红细胞向一边集中，光线不行太强，可调整显微镜的虹彩和集光器。计数时，选用四角及中间的 5 个中方格共80 个小方格，数出其中全部的红细胞数，计数挨次如下图。对压线的红细胞，计数时按数上不数下，数左不数右的原则计数，计数出 8

12、0 个小方格中红细胞的数量。计算 n一个小方格中的红细胞数、个=5 个中方格的红细胞数/80 v立方毫米=1/20长*1/20宽*1/10 高k=稀释倍数 N红细胞数、个/mm3=n/v*k 然后将结果换算成个/L留意事项：1、吸血时不应将气泡吸入。2、中方格之间红细胞数相差超过 15 个时，表示红细胞分布很不均匀，应重做。3、吸血管、盖玻片及计数板等用过后，必需马上洗涤干净。2.2 红细胞渗透脆性试验目的和原理：测定正常动物的红细胞脆性。将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞膜对低渗透压的抵抗力有多大。开头消灭溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗。开头全部溶血的低渗盐

13、溶液浓度，为红细胞的最大抵抗。对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的渗透脆性高，反之表示脆性低。前者代表红细胞的最大脆性， 后者代表红细胞的最小脆性。试验对象：动物血液试验器材和药品：试管架，试管，滴管，吸管，1%NaCl 溶液，蒸馏水。试验方法：1、制备各种低渗盐溶液 取试管 10 个，作好编号，按挨次排列在试管架上。参照下表所示剂量向各试管中参加 1%NaCl 溶液，然后再加蒸馏水，制备成各种低渗盐溶液。2、将血液样品混匀 用吸管吸取血液向十个试管中分别滴加一滴，充分混合，然后在室温下静置 1 小时，观看试验结果。3、判定标准A、一小时后试管内液体变成完全透亮，说明红细胞完全溶血。引起红细胞刚

14、好全部溶血时的盐溶液的浓度，即为最大抵抗力。B、试管内上层为透亮红色液体，下层为浑浊红色，说明局部红细胞发生溶血，刚好引起局部红细胞发生溶血的盐溶液浓度，即为红细胞的最小抵抗力。试验记录：试验结果分析：1、何谓红细胞的渗透脆性？2、红细胞抵抗力与红细胞的脆性有何关系？试验三 循环生理试验之蛙心起搏点及心肌特性年月日星期3.1 蛙心起搏点目的和原理：观看蛙心脏各局部活动的先后挨次和频率，来分析心脏活动规律及其产生原 理，心脏的特别传导系统具有自动节律性，但各局部自律性的凹凸是不全都的。在哺乳动 物以窦房结两栖类叫静脉窦的自律性最高，正常的心脏搏动每次都由窦房结发出冲动， 沿传导组织引起心房、心室

15、收缩。所以窦房结又称为哺乳动物的心脏起搏点。蛙等两栖类 动物的起搏点是静脉窦。它收缩的先后挨次为静脉窦、心房、心室、动脉球。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：蛙板，探针，玻璃分针，中式小剪，眼科剪，镊子，蛙心夹，大头针， 线，滴管，任氏液。试验方法：1、取一只蟾蜍，用探针破坏脑和脊髓，仰卧固定在蛙板上。用镊子提起腹部中心的皮肤， 先剪一小口，然后将剪刀由切口伸入皮下，向左右两侧肩关节方向剪开皮肤，分别后剪掉， 用镊子轻轻提起甲状软骨，在腹肌上剪一小口，将剪刀深入体腔，沿皮肤切口方向剪下一 块三角形肌肉，即可看到心包内跳动着的心脏。留神剪快活包，暴露心脏。2、首先分清心脏各个局部，然后留意观看静

16、脉窦、心房、心室之间的活动挨次，并记录心搏频率。3、用小镊子在静脉窦与心房之间穿一丝线，进展结扎斯氏第一结扎，此时心房和心室均处于舒张状态，而静脉窦照旧搏动，记数其频率。待心房和心室又开头收缩后，记数单位时间内静脉窦和心房、心室的收缩频率。4、另取一线，在心房与心室之间结扎斯氏其次次结扎，观看心脏跳动有何变化，并记录静脉窦、心房、心室的收缩频率。5、在试验过程中要常常滴加任氏液。试验记录：试验结果分析：1、蛙心进展斯氏第一次结扎后，为何房、室消灭较长时间的停搏？为何又能恢复搏动？2、在第一次结扎后房、室搏动的频率与静脉窦的频率是否全都？为什么？其次次结扎后又如何？3.2 心肌特性目的和原理 理

17、解期前收缩与代偿间歇的发生原理，学习暴露蛙心脏的手术方法和在体心脏的机械描记方法。心肌细胞在一次兴奋之后，由于膜电位发生了变化，其兴奋也会发生 一系列的周期性变化。心肌兴奋性的特征之一是具有较长的不应期，确定不应期相当于整 个收缩期，在此期间赐予任何强度的刺激，都不能引起心肌兴奋和收缩。假设在相对不应期， 在窦房结两栖类为静脉窦发出的正常节律性兴奋下达之前，给心脏施加一较强的刺激阈上刺激，可引起一个提前消灭的收缩，称为期前收缩或额外收缩。期前收缩也同样具有确定不应期，当正常的节律性兴奋到达心室时，往往落在期前收缩确实定不应期中，因而不能引起心室发生反响，须在下一次的正常节律性兴奋传来时，才能发

18、生再次反响，因此在期前收缩之后，就会消灭一个较长时间的间歇期，称为代偿间歇。此外心肌还具有“全或无”的特性，即在其他条件都恒定的状况下，心肌对任何强度的阈上刺激均发生同样大小的反响。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：蛙板，探针，玻璃分针，中式小剪，眼科剪，镊子，蛙心夹，大头针， 线，滴管，任氏液，铁架台，双凹夹，刺激器等。试验方法：1、取蟾蜍一只，毁髓、暴露心脏，在心脏的舒张期用连有丝线的蛙心夹夹注心尖，再将丝线联结在 PcLab 生物信号采集处理系统的压力感受器上，另安装好刺激器。2、启动PcLab 生物信号采集处理系统，记录蛙心活动的根本曲线，并在曲线上分清哪一局部代表心室的收缩，哪一局部

19、代表心室的舒张。3、在心脏的收缩期，以中等强度的单个电震进展刺激，观看能否引起心脏活动的转变。4、在心脏的舒张期间，以中等强度的单个电震进展刺激，此时心脏即发生一次额外收缩， 其后伴有代偿间歇消灭。在图中区分出并加以标记。5、用丝线在静脉窦和心房之间做结扎斯氏其次次结扎，此时心脏即停顿跳动。然后从小到大给以强度间隔一样的阈下刺激和阈上刺激，观看蛙心收缩强度的变化每次刺激的间隔时间应不少于 15 秒，共刺激 7 次。试验结果分析：1、蛙心夹为什么要在心脏的舒张期夹住心尖？2、心肌具有较长的不应期有何生理意义？试验四 循环生理试验之蛙心灌流年月日星期4.1 蛙心灌流目的和原理：由于心脏具有自动节律

20、性，所以心脏离体后，如得到适宜的理化环境，仍能有节律的自动收缩、舒张，并可维持肯定的时间。假设环境的理化因素发生转变，心脏的活动就会随之发生相应的转变。本试验用离体蟾蜍心脏灌流的方法来观看温度和钠、钾、钙三种离子、酸碱度、肾上腺素和乙酰胆碱等各种因素对心脏活动的影响，验证维持心脏搏动的必要条件。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：蛙类手术器械一套，蛙心套管，试管夹，蛙心夹，铁架台，双凹夹，丝线，滴管，任氏液，2%NaCL，1%CaCL，1%KCL，2.5%NaHCO3，3%乳酸，0.1%肾上腺素溶液， 0.01%乙酰胆碱溶液。试验方法：1、取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓，仰卧固定于蛙板上，暴露心脏，并

21、在主动脉下面穿两条线。用蛙心夹夹住心尖，将心脏翻转，于心脏反面找到静脉窦，并在静脉窦之外用一条线结扎， 这样就阻断了血液连续流回心脏。在结扎时切勿损伤静脉窦，否则心脏会停顿跳动。2、将心脏放回原位，用眼科剪在主动脉的根部朝心室的方向剪一小口见图，以灌有任氏液的蛙心套管的尖端由此口插入动脉球，然后将插管稍后退，再转向心室中心的方向， 在心室的收缩期插入心室内。插套管时要特别留神，应渐渐摸索插入，以免损难过肌，套管插好后的斜口应向心室腔，以免心室收缩时堵塞斜口。假设套管插入深度深度和位置适宜，可见套管中有血液如喷发样在任氏液中升起，同时管中的液面随心脏的跳动而上升和下降。3、套管插好后，用丝线将动

22、脉套管与套管的尖端系牢，然后再将丝线系在套管壁的突起上， 如下图。最终，将与心脏相连的血管和其它组织在结扎处之外剪断，摘除心脏，用任氏液反复冲洗心脏至血液全部洗净为止。4、将连有心脏的蛙心套管固定在铁架台上，用蛙心夹将心脏连于 PcLab 生物信号采集处理系统的压力感受器上，留意蛙心套管内液面每次应保持一样的高度。然后开动 PcLab 生物信号采集处理系统描记以任氏液灌流的正常的心搏曲线，留意心搏的强度和频率。5、钠离子的影响：向套管内参加 2%NaCL 数滴，并与管中溶液混匀，同时用笔做一记号， 观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏

23、液，反复数次，至心搏恢复正常为止。6、钙离子的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 1%CaCL 1-2 滴，并与管中溶液混匀，2同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看， 快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。7、钾离子的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 1%KCL1-2 滴，并与管中溶液混匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看， 快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。8、碱性溶液的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 2.5%NaHCO 2-3 滴，并

24、与管中溶液混3匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。9、酸性溶液的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 3%乳酸 1-2 滴，并与管中溶液混匀， 同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看， 快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。10、肾上腺素的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 0.1%肾上腺素 1-2 滴，并与管中溶液混匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上 停顿观看，快速吸出套

25、管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。11、乙酰胆碱的影响：心搏恢复正常后，向套管内参加 0.01%乙酰胆碱 1-2 滴，并与管中溶液混匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，立 即停顿观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为 止。试验记录：试验结果分析：向套管中滴加钙离子与钾离子后，心搏消灭怎样的变化？为什么？试验五 循环生理试验之动脉血压的直接测定及其影响因素年月日星期5.1 动脉血压的直接测定及其影响因素目的和原理：了解直接测定动脉血压的方法及某些因素对血压的影响。动物的血压常常维持在肯定水平，这是由于神经和

26、体液不断调整心脏的活动和血管平滑肌紧急度的结果。当内外环境的某些因素发生转变时，动脉血压会发生相应的变化。试验对象：家兔试验器材和药品：手术器械， 20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，丝线，25%硫代硫酸钠或肝素生理盐水，动脉套管，水银检压计，0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱，刺激电极，双凹夹，注射器，PcLab 生物信号采集处理系统。试验方法：1、取家兔一只，从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯1 克/公斤进展麻醉。注射时随时观看动物的状态。当四肢松软，呼吸变慢，角膜反射迟钝时，说明已麻醉。2、将家兔仰卧保定于固定台上，用兔头夹将兔头固定，使颈部位置保持端正。在颈腹侧甲状软骨下方到胸骨上方之

27、间，距正中线两侧 1cm 范围内，剪毛并用湿布擦净。3、沿颈部正中线切开皮肤 5-6cm。分别皮下结缔组织，暴露出胸头肌和胸骨甲状舌骨肌， 分别此两肌肌缝之间的结缔组织，分别两侧的胸骨甲状舌骨肌，于气管两侧找出左右的血管神经束见图。4、区分颈总动脉和三条神经。其中迷走神经最粗，呈白色。交感神经稍细，略呈灰黄色。减压神经最细，呈白色，常与交感神经紧贴在一起。分清其位置后，依次分出减压、交感和迷走神经各约 2cmc 长，并分别穿不同颜色的线备用。再用玻璃分针分别左侧颈总动脉外的结缔组织膜，将动脉分别出 3-4cm，穿线备用。然后用同样方法分别右侧颈总动脉和神经并穿线。将右侧颈总动脉的离心端结扎，向

28、心端用动脉夹夹住尽量靠后。再穿一线作结扎动脉套管时用。5、将各试验仪器联结好，检查压力系统是否漏气，漏水。6、一切预备妥当后，先定标。此时动脉套管尖端应无气泡，如有应排出。7、用眼科剪在右侧颈总动脉结扎部位的下方朝向心方向剪一斜口，然后将装有抗凝剂的动脉套管从剪口处插入颈总动脉，用事先穿入的线结扎，并将余线结扎在动脉套管的侧管上， 以防止套管尖端滑脱。然后渐渐翻开动脉夹，可见有少量血液自颈总动脉内冲向动脉套管， 同时检压计浮标上的笔尖也随之上下浮动。8、以慢速开动 PcLab 生物信号采集处理系统，描记麻醉状态下的血压曲线。9、松开两后肢的固定绳，并快速将身体后部举起，观看地心引力对血压有何影

29、响。10、待血压恢复平稳后，以动脉夹夹注对侧的颈总动脉，观看血压有何变化。11、待血压恢复平稳后，用薄的乳胶手套将动物的鼻子和嘴套起，并使其中存有少量空气， 经过一段时间后，手套内的二氧化碳的浓度渐渐增高，此时观看血压有何变化。12、待血压恢复平稳后，先剪断一侧减压神经，观看血压有何变化。然后，以中等强度的连续电震刺激减压神经的向中端，观看血压有何变化。13、待血压恢复平稳后，结扎一侧迷走神经，并自结的向中端剪断，观看血压有何变化。然后提起神经，轻轻刺激神经的离中端，观看血压有何变化。14、待血压恢复平稳后，将另一侧迷走神经剪断，观看血压有何变化。然后再刺激减压神经，观看血压有何变化。15、待

30、血压恢复平稳后，自耳静脉注入0.01%肾上腺素 0.5ml肾上腺素注入后，应再补充数毫升的生理盐水，以使药物全部进入循环，观看血压有何变化。16、待血压恢复平稳后，自耳静脉注入 0.01%乙酰胆碱 0.5ml，观看血压有何变化。17、待血压恢复平稳后，做放血处理，观看血压有何变化。留意事项：1、进展一项试验后，须待血压恢复平稳后，在开头下一项试验。2、动脉套管与颈总动脉保持平行位置，防止刺破动脉或堵塞血流。3、试验过程中要留意保温，防止动物死亡。4、由于试验时间过久，动物会渐渐糊涂，此时应酌量补注少许麻醉剂。试验记录：试验结果分析：以中等强度的连续电震刺激已剪断的减压神经的向中端和迷走神经的离

31、中端时，血压如何变化？两者试验结果有何异同？为什么？试验六 消化生理试验年月日星期7.1 胃肠运动的直接观看目的和原理 直接观看动物在麻醉状态下胃肠运动的各种形式及神经和体液对胃肠运动的调整作用。胃肠肌肉属于平滑肌，所以胃肠道具有平滑肌运动的特性，由于胃肠道平滑肌构造不同，因此胃运动呈蠕动及紧急性收缩；而肠运动的主要方式为蠕动、分节运动及摇摆。试验对象：家兔试验器材和药品：家兔固定台，剪毛剪，止血钳，玻璃针，注射器，0.01%乙酰胆碱，0.1% 肾上腺素，20%氨基甲酸乙酯。试验方法：1、取兔一只，称重、麻醉、固定，剪去腹部被毛，剖开腹腔，暴露胃肠，认真观看分清胃、小肠、大肠等各部位。2、认清

32、各部位后，观看胃的蠕动及紧急性收缩，肠的蠕动、分节运动、摇摆。3、对胃肠进展机械性刺激，观看胃肠运动有何变化。4、在肠管壁上直接滴加 0.01%乙酰胆碱 0.5-1.0 毫升，观看胃肠运动有何变化。5、在肠管壁上直接滴加 0. 1%肾上腺素 0.5-1.0 毫升，观看胃肠运动有何变化。留意事项：1、在整个试验过程中，要时刻留意家兔的保温；2、每项试验完毕后要间隔 3-5 分钟，用药后要用生理盐水充分洗涤；3、为使胃肠运动明显，试验前一小时要饲喂饱家兔。试验结果分析：具体说明胃、肠运动有哪些形式。7.2 小肠吸取和渗透压的关系目的和原理 了解小肠吸取与肠内容物渗透压之间的关系。肠内容物的渗透压是

33、影响肠吸取的重要因素。同种溶液在肯定浓度范围内，浓度越大，吸取越慢；浓度过高时，反而消灭倒渗现象。使内容物的渗透压降低至肯定程度后，再被吸取。试验对象：家兔试验器材和药品：固定台，手术器械，饱和硫酸镁溶液，0.7%NaCL，丝线。试验方法：1、接试验 7.1，在家兔体内选取长约 16 厘米的一段空肠，在其中点用线结扎，另在距中点上下各 8 厘米处分别结扎，此时这一段空肠被结扎为等长的两段，结扎穿线时留意不要损伤肠系膜上的血管，也不要将血管结扎。2、结扎完毕后，向其中一段注入 5 毫升饱和硫酸镁溶液，另一段注入 30 毫升 0.7%氯化钠溶液。注射完毕后将空肠置入腹腔中，30 分钟后检查两段中各

34、有何变化。在此过程中要留意家兔的保温。试验结果分析：两段结扎的空肠在分别注入 5 毫升饱和硫酸镁溶液和 30 毫升 0.7%氯化钠溶液后发生了什么变化？为什么？7.3 离体肠断运动描记目的和原理：观看在离体状况下肠的运动状况以及某些因素对肠运动的影响。肠平滑肌具有自动节律性收缩的特性，并且受肠壁神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠断虽然失去外来神经的支配，但在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体肠段运动的装置还可以用来争论各种化学因素对平滑肌的影响。试验对象：家兔试验器材和药品：平滑肌槽，烧杯，温度计，铁架台，线， 0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱，台氏液等。1

35、、接试验 7.2，在家兔体内切取假设干段结扎以外的 3-厘米长的肠段十二指肠或空肠，放入 37-38oC 台氏液中，充分洗去肠内容物，选取一段用缝针在两端肠壁之间各穿上一条线，一断固定于平滑肌槽的通气管上，另一端与 PcLab 生物信号采集处理仪上的压力传感器相连，平滑肌槽内的温度掌握在 38-39oC 之内，并不断地进展通气至台氏液中。离体肠段的运动有时不会马上开头，有可能要经过 10-30 分钟才开头运动。2、离体肠段开头运动后，观看肠段的正常收缩曲线。3、渐渐降低台氏液的温度至 30oC，观看肠段运动有何变化。4、恢复温度，待肠段运动正常后，参加 0.01%肾上腺素数滴于平滑肌槽的通气管

36、中，观看肠段运动有何变化。然后用台氏液冲洗通气管。5、待肠段运动正常后，加 0.01%乙酰胆碱数滴于平滑肌槽的通气管中，观看肠段运动有何变化。留意事项：1、台氏液要配制的。2、要留意掌握平滑肌槽中台氏液的温度。试验结果分析：小肠平滑肌的生理特性与骨骼肌、心肌有何不同？试验七 泌尿生理试验年月日星期8.1 尿的分泌及其影响与调整目的和原理 了解一些生理因素对尿分泌的影响及其调整。尿是血液流过肾单位时经过肾小球滤过，肾小管重吸取和分泌而形成的。影响肾小球滤过作用的主要因素是有效滤过压， 有效滤过压的大小取决于肾小球毛细血管内的血压，以及血浆的胶体渗透压和囊内压。影响肾小管重吸取机能主要是管内液渗透

37、压的凹凸和肾小管上皮细胞的重吸取力量，后者又为多种激素所调整。试验对象：家兔试验器材和药品：注射器，手术台，手术器械，膀胱套管，PcLab 生物信号采集处理系统， 20%氨基甲酸乙酯，20%葡萄糖溶液，0.01%肾上腺素，垂体后叶激素，生理盐水，烧杯，缝合线，保护电极。试验方法：1. 取一只试验前給予充分饮水的家兔，耳静脉注射 20%氨基甲酸乙酯1g/kg，麻醉后固定，在颈局部别迷走神经，并在其下穿线备用。2. 在耻骨联合前方找到膀胱，在其腹面正中作一荷包缝合，再在中心剪一小口，插入膀胱套管，收紧缝线，固定膀胱套管，并在膀胱套管及所连接的橡皮管和直套管内注满生理盐水，在直套管下端连接记滴装置对

38、雌性动物为防止尿液经尿道流出，影响试验结果，可在膀胱颈部结扎。然后将记滴装置与 PcLab 仪连接，进展记滴描记。注：输尿管插管法： 找到膀胱后，将其移出体外，再在膀胱底部找出两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处分别输尿管，用细线在其下结一松结，在结下方的输尿管上剪一小口，向肾脏方向插入一条适当大小的塑料管，并将松结抽紧以固定插管，另一端则连至记滴器上。3. 记录比照状况下每分钟尿分泌的滴数。可连续记录 5-10 分钟，求其平均数并观看动态变化。4. 静脉注射 38oC 的生理盐水 20ml，记录每分钟尿分泌的滴数。5. 静脉注射 20%葡萄糖溶液 10ml,记录每分钟尿分泌的滴数。6. 静脉注射

39、0.01%肾上腺素 0.5-1.0ml，记录每分钟尿分泌的滴数。7. 切断两侧迷走神经，用保护电极以中等强度的电刺激连续刺激一侧迷走神经的离中端， 记录每分钟尿分泌的滴数。8. 静脉注射垂体后叶素 1-2 单位，记录每分钟尿分泌的滴数并观看何时开头消灭抗利尿作用。留意事项：1. 进展每一项试验时，必需待尿量根本恢复或相对稳定后再开头下一项试验。2. 每项试验后要有比照记录。试验记录：正常生理盐水葡萄糖肾上腺素迷走神经垂体后叶素尿量滴/分 尿量滴/分试验结果分析：静脉注射葡萄糖溶液和生理盐水后，尿量有何变化？为什么？试验八 泌尿、循环、呼吸生理综合试验打算 07 级 年月日星期目的和原理：了解几

40、种因素对血压、呼吸、尿分泌的影响。动物的血压常常维持在肯定水平，这是由于神经和体液不断调整心脏的活动和血管平滑肌紧急度的结果。正常哺乳动物的呼吸运动能够有节律地进展，并能适应机体代谢的需要，是由于受神经和体液的调整所致。尿是血液流过肾单位时经过肾小球滤过，肾小管重吸取和分泌而形成的。影响肾小球滤过作用的主要因素是有效滤过压，有效滤过压的大小取决于肾小球毛细血管内的血压， 以及血浆的胶体渗透压和囊内压。影响肾小管重吸取机能主要是管内液渗透压的凹凸和肾小管上皮细胞的重吸取力量，后者又为多种激素所调整。试验对象：家兔试验器材和药品：手术器械，20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，丝线，25%硫代硫酸钠或肝

41、素生理盐水，动脉套管，水银检压计，玛俐氏气鼓，气管套管，橡皮管，胸套管，电磁标，生理多用仪或感应圈，刺激电极，双凹夹，注射器，膀胱套管，0.01%肾上腺素，0.01% 乙酰胆碱， 20%葡萄糖溶液，0.01%肾上腺素，垂体后叶激素，生理盐水，烧杯，缝合线， 保护电极，PcLab 生物信号采集处理系统。试验方法：1、取家兔一只，从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯1 克/公斤进展麻醉。注射时随时观看动物的状态。当四肢松软，呼吸变慢，角膜反射迟钝时，说明已麻醉。2、将家兔仰卧保定于固定台上，用兔头夹将兔头固定，使颈部位置保持端正。在颈腹侧甲状软骨下方到胸骨上方之间，距正中线两侧 1cm 范围内，剪

42、毛并用湿布擦净。3、沿颈部正中线切开皮肤 5-6cm。分别皮下结缔组织，暴露出胸头肌和胸骨甲状舌骨肌， 分别此两肌肌缝之间的结缔组织，分别两侧的胸骨甲状舌骨肌，于气管两侧找出左右的血管神经束。4、区分颈总动脉和三条神经。其中迷走神经最粗，呈白色。交感神经稍细，略呈灰黄色。减压神经最细，呈白色，常与交感神经紧贴在一起。分清其位置后，依次分出减压、交感和迷走神经各约 2cmc 长，并分别穿不同颜色的线备用。再用玻璃分针分别左侧颈总动脉外的结缔组织膜，将动脉分别出 3-4cm，穿线备用。然后用同样方法分别右侧颈总动脉和神经并穿线。将右侧颈总动脉的离心端结扎，向心端用动脉夹夹住尽量靠后。再穿一线作结扎

43、动脉套管时用。5、将各试验仪器联结好，检查压力系统是否漏气，漏水。6、一切预备妥当后，先定标。此时动脉套管尖端应无气泡，如有应排出。7、用眼科剪在右侧颈总动脉结扎部位的下方朝向心方向剪一斜口，然后将装有抗凝剂的动脉套管从剪口处插入颈总动脉，用事先穿入的线结扎，并将余线结扎在动脉套管的侧管上， 以防止套管尖端滑脱。然后渐渐翻开动脉夹，可见有少量血液自颈总动脉内冲向动脉套管， 同时检压计浮标上的笔尖也随之上下浮动。8、以慢速开动 PcLab 生物信号采集处理系统，描记麻醉状态下的血压曲线。9、T 字形切开气管，插入气管套管，用线结扎，并与玛俐氏气鼓相连，留意描记时气鼓上的笔尖和电磁标上的笔尖都应对

44、齐在一条垂直的直线上。10、开动记纹鼓，描记一段正常的呼吸曲线，观看呼吸运动与曲线的关系。11、在耻骨联合前方找到膀胱，在其腹面正中作一荷包缝合，再在中心剪一小口，插入膀胱套管，收紧缝线，固定膀胱套管，并在膀胱套管及所连接的橡皮管和直套管内注满生理盐水，在直套管下端连接记滴装置对雌性动物为防止尿液经尿道流出，影响试验结果， 可在膀胱颈部结扎。然后将记滴装置与 PcLab 仪连接，进展记滴描记。注：输尿管插管法：找到膀胱后，将其移出体外，再在膀胱底部找出两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处分别输尿管，用细线在其下结一松结，在结下方的输尿管上剪一小口，向肾脏方向插入一条适当大小的塑料管，并将松结抽紧以固

45、定插管，另一端则连至记滴器上。12、结扎一侧迷走神经，并自结的向中端剪断，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。13、将另一侧迷走神经剪断，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。14、自耳静脉注入 0.01%肾上腺素 0.5ml肾上腺素注入后，应再补充数毫升的生理盐水， 以使药物全部进入循环，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。15、自耳静脉注入 0.01%乙酰胆碱 0.5ml，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。16、做放血处理，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。留意事项：1、进展一项试验后，须待血压恢复平稳后，在开头下一项试验。2、动脉套管与颈总动脉保持平行位置，防止刺破动脉或堵塞血流。3、试验过程中

46、要留意保温，防止动物死亡。4、由于试验时间过久，动物会渐渐糊涂，此时应酌量补注少许麻醉剂。5、进展每一项试验时，必需待尿量根本恢复或相对稳定后再开头下一项试验。6、每项试验后要有比照记录。试验记录：试验结果分析：1、切断双侧迷走神经后，呼吸频率、血压、尿量有何变化？2、静脉注入乙酰胆碱，血压、呼吸频率、尿量有何变化。为什么？试验九 肌肉生理试验年月日星期9.1 阈刺激、阈上刺激与最大刺激目的和原理 应用电刺激方法，测出肌肉阈刺激、阈上刺激与最大刺激的强度值，以了解刺激与肌肉收缩的关系。肌肉和其它任何组织一样，都具有兴奋性。当受刺激而发生兴奋时，便表现出收缩活动。但并非任何强度的刺激都能引起肌肉

47、收缩反响，必需到达强度阈值才能引起肌肉的收缩。测定能引起肌肉收缩反响的刺激强度，电刺激方法较为抱负。用单个感应电震，由弱到强依次进展刺激，从阈刺激起始，随着刺激强度的增加，肌肉收缩也相应地增大。当刺激强度增加到肯定限度时，肌肉收缩也到达最大限度，如再增大刺激强度，肌肉收缩也不再增大。试验对象：蟾蜍试验器材和药品：PcLab 生物信号采集处理系统，电刺激器，肌槽，铁架台，任氏液，培育皿。试验方法：1. 参照试验 1.1 制备蛙坐骨神经腓肠肌标本，将制备好的标本浸泡在任氏液中备用。2. 将腓肠肌标本的股骨端固定在肌槽的固定孔内，跟腱端与 PcLab 生物信号采集处理系统的压力感受器相连，调整杠杆螺丝，使腓肠肌标本保持适当的松紧度。3. 对腓肠肌标本进展测定：将感应圈的副线圈移至最远处，用断电感应电震进展刺激，观看肌肉有无收缩反响。如无收缩反响，则将副线圈向原线圈推动 0.5-1.0cm，再进展刺激， 直至电流强度到某一强度时，肌肉开头消灭稍微收缩反响，并在 PcLab 生物信号采集处理系统的显示屏上记录一条收缩曲线，这一强度称为阈刺激刺激强度用副线圈与原线圈之间距离