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1、十年高考真题分类汇编（2 0 1 0 2 0 1 9）生物专题15生物技术实践【2020年】1.（2020山东卷）野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M 和苏氨酸依赖型菌株N 单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将 M、N 菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上,培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是（）A.操作过程中出现杂菌污染B.M、N 菌株互为对方提供所缺失
2、的氨基酸C.混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D.混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变【答案】B【解析】本题以大肠杆菌营养缺陷型为材料进行相关实验探究为情境，考查考生综合运用所学知识分析实验结果的能力。操作过程当中出现杂菌污染，基本培养基上生长的为杂菌，A 合理；若 M、N 菌株互为对方提供所缺失的氨基酸形成的菌落，需要MN混合在一起才能生存，而该菌落来自于单个细菌形成的菌落，单个细菌不可能混合培养的细菌。B 项不合理。M、N 菌株混合培养后在基本培养基上可以生存。推测可能是混合培养过程当中，菌株间发生了基因交流，获得了对方的遗传物质，C 合理；基因突变是不定向的，在混合培养过
3、程中，菌株当中已突变的基因也可能再次发生突变得到可在基本培养基上生存的野生型大肠杆菌，D 合理。故选B。2.（2020天津卷）阅读下列材料，回答下列小题。甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响。其生产工艺如下图所示。二 制 曲 二=4 加 盐 水、|发 酵、|y费 豆 瓣-且 辫 曲-循 酷-甜瓣子某研究团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺（盐度1 5%,温度37,发酵30天）进行了改良，改良后甜瓣子风味得以提升。新工艺参数如下表所示。时期时 段（天）盐 度（）温 度（）前期012612两种工艺的结果比较见下图。中期1216637
4、后期16301537086420L。SO.O.3(。0一、制如M然畿糖嗝O5050577665.6 12 18 24 30发酵时间(d)O050508.ZZ66(俞。亘)喜)翘思型24308发酵时间（d）24308发酵时间（d）6O6下列关于本研究的实验方法与原理的描述，错误的是（）A.发酵开始阶段的微生物主要来源于制曲过程的积累B,蚕豆瓣可提供微生物生长繁殖所需的碳源和氮源C.温度与盐度都影响微生物的生长繁殖D.定期取样，使用平板划线法统计活细菌总数【答案】D【解析】制曲过程中会有微生物的积累，是发酵开始阶段微生物的主要来源，A 正确；蚕豆瓣中有很多有机物，可以提供微生物生长繁殖所需的碳源和
5、氮源，B 正确；观察新工艺各个时期的活霉菌总数和活细菌总数的变化，从前期到中期，盐度不变温度升高，活霉菌总数下降，说明温度影响微生物的生长繁殖；从中期到后期，盐度升高温度不变，活细菌总数下降，说明盐度影响微生物的生长繁殖，C 正确；平板划线法不能用来计数，统计活细菌总数要用稀释涂布平板法，D 错误。故选D。3.（2020浙江卷）下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（）A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B,配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化【答案】A【解析】利用尿素固体
6、培养基，由于不能利用尿素做氮源的微生物不能生长繁殖，而保留利用尿素的微生物，并非杀死，A 错误；不同的微生物所需的p H 不同，所以配置培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH,B 正确；酵母菌不能直接利用淀粉，应用酒曲中的根霉和米曲霉等微生物把淀粉糖化，再用酵母菌发酵得到糯米酒，C正确；醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，D正确。故选A。4.（2020江苏卷）甲、乙两个实验小组分别进行了 酵母细胞固定化技术”的实验，结果如下图所示。出现乙组实验结果的原因可能为（）甲组实验姑柒 乙蛆实验站果A.CaCb溶液浓度过高 B.海藻酸钠溶液浓度过高C.注射器滴加速度过慢 D.滴加时注射器出口浸入
7、到CaCb溶液中【答案】B【解析】CaCb溶液浓度过大，会导致凝胶珠硬度大，易开裂：A错误；海藻酸钠溶液浓度过高会导致凝胶珠呈蝌蚪状，B正确；注射器滴加速度过快会导致凝胶珠呈蝌蚪状，C错误；注射器离液面过近会导致凝胶珠呈蝌蚪状，而非注射器口侵入到CaCb溶液中，D错误；故选B。5.（2020江苏卷）某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的实验报告，他的做法簿送的是（）A.选择新鲜的葡萄略珈冲洗，除去枝梗后榨汁B.将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁C.酒精发酵期间，根据发酵进程适时拧松瓶盖放气D.酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵【答案】B【解析】选择新鲜的葡萄洗1到2次，除去
8、枝梗后榨汁，A正确；葡萄汁不能装满，需装至玻璃瓶的2/3空间，B错误；酒精发酵期间会产生二氧化碳，故需适时拧松瓶盖，防止发酵瓶爆裂，C正确；醋酸菌是好氧菌，故醋酸发酵时应去除瓶盖，加一层纱布，D正确。故选B。6.（2020 江苏卷）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（）A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B.图中I、n 区的细菌数量均太多，应从m 区挑取单菌落C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色【答案】B【解析】分析平板结果可知，采用的接种方法为平板划线法，且划线顺序是I 区、n
9、区、in 区，可以看到n i区中出现了单菌落。倒平板后无需晃动，A错误；I 区、n 区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，故应从II【区挑取单菌落，B 正确；出现单菌落即达到了菌种纯化的目的，C 错误；刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，D 错误。故选B。7.（2020课标I）某种物质S（一种含有C、H、N 的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S 的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S 和 Y。
10、接种 稀释涂布平板 挑单菌落接种 多次筛选无菌水 甲 乙 甲回答下列问题：（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y 物质是。甲、乙培养基均属于 培养基。（2）实验中初步估测摇瓶M 中细菌细胞数为2x107个/m L,若要在每个平板上涂布1 0 0 9稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M 中的菌液稀释 倍。（3）在步骤的筛选过程中，发现当培养基中的S 超过某一浓度时，某菌株对S 的降解量反而下降，其原因可能是.（答 出 1 点即可）。（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤。（5）上述实验中，甲、乙两种培
11、养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即【答案】（1）.高压蒸汽灭菌 琼脂 选择（2）.1 0 4 （3）.S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长.取淤泥加入无菌水，涂 布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数 .水、碳源、氮源和无机盐【解析】（1）常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙为固体培养基，故需要加入Y 琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基。（2）若要在每个平板上涂布1 0 0 迎稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过2 0 0 个，则摇瓶M 中的菌液稀释的倍数至少为2 x 1 0 7+1 0 0 0 x 1 0 0+
12、2 0 0=1 x 1 0 4 倍。（3）当培养基中的S 超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。（4）要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数。（5）甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源。8.（2 0 2 0 课标I I ）研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的a-淀粉酶A 3,并对其进行了研究。回答下列问题：（1）在以淀粉为底物测定A 3 酶活性时，既可检测淀粉的减少，检 测 应 采 用 的 试 剂 是,也可采用斐林试剂检测 的增加。（2）在 A 3 的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电
13、泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加S D S,S D S 的作用是 和。（3）本实验中，研究人员在确定A 3 的最适p H 时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示 某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是。（4）在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是（答 出 1 点即可）。【答案】（1）.碘液 还原糖（或答：葡萄糖）（2）.消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响 使蛋白质发生变性（3）.在 pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同（4）.酶分子体积小,容易从包埋材料中漏出【解析】（1）测定酶活性时，可以通过检测反应物的减少或生成物的增加来反映酶活性，所
14、以可以用碘液检测淀粉的减少，也可用斐林试剂检测还原糖（或葡萄糖）的增加。（2）鉴定蛋白质纯度常用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法，凝胶中加入SDS可以消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响，并使蛋白质发生变性。（3）分析题中曲线可知，在 pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同，可推测缓冲系统的组分时能活性有影响。（4）由于酶分子体积小，容易从包埋材料中漏出，所以固定化酶时，一般不采用包埋法。9.（2020新课标H I）水果可以用来加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列问题：（1）制作果汁时，可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸
15、醐、（答出2 种即可）。纤维素酶可以分解植物（填细胞膜或细胞壁）中的纤维素。（2）用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是。（3）现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用 来表示。（4）获得的果汁（如苹果汁）可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要 菌，这一过程中也需要。2,。2的作用是“制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于（填好氧或厌氧）细菌。【答案】（1）.果胶分解酶、果胶酯酶 细胞壁（2）.温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶活性最高，出汁率最高（3）.在一定条件下，单位时间内、单位体
16、积中反应物的消耗量或者产物的增加量.酵母 促进有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖 好氧【解析】（1）由分析可知，果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等.植物细胞壁由纤维素和果胶构成，故可用纤维素酶分解细胞壁。（2）酶发挥催化作用需要适宜的温度和pH条件，在最适温度下，果胶酶的活性最高，出汁率最高。（3）酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力，酶活性的高低可以用在一定条件下，单位时间内、单位体积中反应物的消耗量或者产物的增加量来表示。（4）由分析可知，果酒的制作离不开酵母菌，在初期通入氧气，可以促进酵母菌的有氧呼吸，使其大量繁殖；醋酸菌是一种好氧细菌。10.（2020 江苏卷）产脂肪酶酵母可用
17、于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：（1）常规微生物实验中，下 列 物 品 及 其 灭 菌 方 法 错 送 的 是 （填编号）.编号物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧（2）称 取 L 0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经 后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其 中 10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了 46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌_ _ _ _ _ _ _ _ _个。（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行 育种。将辐照处理后的
18、酵母菌涂布在以 为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径 的菌落，纯化后获得A、B 两突变菌株。（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B 两菌株的相关性能,进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株 进行后续相关研究，理由是 o,学S.羁!-曲株B细胞密度-60 a 2 a 3；b 2 b 3 b 4,据此形成下列四种方案，其中最佳的是。方案一：a l和 b 2 组合。方案二：将每一种a的浓度分别与b 2、b 3、b 4 组合，根据酶活取其中的最佳组合。方案三：a l和 b 2 组合，a 2 和 b 3 组合，根据酶活
19、取其中的最佳组合。方案四：a l分别与每种氮源浓度组合，b 2 分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中的最佳组合。（5）如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活，则应选择图17 中的 固定化工艺。ABC图17【答案】（1）C （2）蔗 糖（3）酶活性0.6%0.8%1.0%1.2%1.4%第 1 组/第 2 组/第 3 组/平均值/（4）方案二（5）C【解析】（1）分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，有要在培养基中加入该特定的碳氮源，而分泌脂肪酶的细菌能在乳糖、酵母膏生长。（2）据表可知，当碳源为蔗糖时，酶活性最高，产脂肪酶菌株生长的理想碳源为蔗糖。（
20、3）题目给定浓度为0.1%,要求设浓度梯度的差值为0.2%,要根据这一点来设定。（4）题目的要求是确定碳氮源浓度的最佳组合，所以在有碳源，又要有氮源。a和 b组合后，就是看出碳源在何种浓度、氮源在何种浓度下生长最合适。（5）由于需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的成活性，图中只有C组。6 5.（2 0 13 新课标卷I -T 3 9）回答下列有关泡菜制作的习题：（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。（
21、3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。【答案】（1）消 灭 杂 菌 增 加 乳 酸 菌 含 量（2）无 氧 呼 吸 细 胞 质（3）温度、食盐用量、腌 制 时 间（4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少乳酸菌比杂菌更为耐酸【解析】（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。（2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。（3）都泡菜的制作过程中，影响
22、亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不足、腌制时间等。（4）从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。6 6.（2 0 1 3新课标卷I I-T 3 9）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用 法或 法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，在3 7 培养箱
23、中培养2 4 h,使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A：含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B:含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_ _ _ _ _ _ _ _;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最 好 应 选 择 抗 生 素。【答案】：（1）划线 稀释涂布（或涂布）（2）涂布（3）敏感 不
24、敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐 药 菌 （4）A【解析】：本题考查微生物的培养和应用。（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。67.（2013四川卷T10）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽胞杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。图甲中，过程需要的酶有。为达到筛选目
25、的，平板内的固体培养基应以作为唯一碳源。、过程需要重复几次，目 的 是。某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是；推测该同学接种时可能的操作失误是。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气，其原因是。用凝胶色谱法分离a-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较。【答案】10.（1）限制性内切酶和DNA连接酶 淀粉 筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（2）稀释涂布法 涂布不均匀（3）工程酵母 工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生CO?的速度也很快（4）小【解析】本题借“筛选可高效利用
26、淀粉的工程酵母菌菌种”创设情境，实际考查 生物技术实践中的微生物的实验室培养和蛋白质的提取和分离两个实验的原理或方法，属于选修部分的基础立意题。本题三道题都源于教材的相关基础设问，熟记相关知识即可回答。相对灵活的是题，关键是审出“先排气”的准确含义，是 指“发酵过程中首先排气”的意思，以此可知是高速利用淀粉的工程酵母菌，该酵母菌发酵时产生CO?的速度也很快。68.（2013上海卷T3）回答下列关于微生物的问题。阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10 15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01,以下为该菌株的鉴定过程。（1）为获得单菌落，可采用 法将初筛菌液接种在
27、 培养基上。（2）SM01的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生抱子，细胞核直径约lu m,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是 真 菌 的 是。A.菌落初期呈突起絮状 B.菌落粉白色C.有菌丝，白色致密 D.有细胞核，且有分生抱子(3)S M 0 1 还一定具有的结构有_ _ _ _ _ (多选)。A.细胞膜 B.核糖体 C.拟核 D.荚膜 E.芽抱 F.菌盖(4)表 4中培养液p H 均为6.0,若对S M 0 1 中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的 培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：(1);(2)；(3)4实验用培养
28、液配方培养液阿拉伯股X 拉 伯 gNaNO)牛肉骨K】HPO.MgSO.7HQKC1FeSO47H;OA25睚1睚0.5睚0.01B25gL3“g1JLO5g 糊状液体|柚 皮 精 油、乳酸菌A 培养液 乳 酸 菌 素/抑菌试验（1）柚皮易焦糊，宜采用 法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质。（2）筛选乳酸菌A 时可选用平板划线法或 接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是。实验前需对超净工作台进行 处理。（3）培养基镇南关的尿素可为乳酸菌A 生长提供。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度 o（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会
29、出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。【答案】（1）压 榨 过 滤（2）稀释涂布平板法（或稀释混合平板法）高压蒸汽灭菌锅 消毒（3）氮源 越慢（4）直 径（或大小）【解析】（1）如果利用水中蒸储法提取芳香油，柚皮易发生焦糊现象，而且有效成分柠檬烯容易水解,因此一般采用水蒸气蒸储法提取。除去固体杂质的方法是采用过滤。（2）对于筛选菌种一般用固体选择培养基，通常接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，培养基灭菌通常用高压蒸汽灭菌，对于工作台通常用紫外线消毒。（3）尿素属于有机物，能够为异养微生物提供碳源，尿素中含有氮元素，能够为微生物提供氮源；电泳法纯化
30、乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度越慢。（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。7 6.（2 0 1 0 全国卷I -T 3 4）下列是与微生物培养有关的问题，请回答：（1）某细菌固体培养基德组成成分是K H F O 、N a2H P 0 M g S 0,葡萄糖、尿素、琼脂和蒸镯水，其中凝固剂是，碳源是 氮源是。已知只有能合成胭酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型看，用 该 培 养 基 培 养 的 细 菌
31、属 于。（2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在一期取材；在生产中，常收集培养至_ _ _ _ _ _ _ _ 期的细菌用于次生代谢产物的提取。【答案】（1）琼 脂 葡 萄 糖 尿 素 选 择 合 成 异 养 型 （2）生长培养中的细菌以指数形式增长，取对数便于反映细菌群体的生长规律对数期稳定期【解析】第（1）小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成胭酶的细菌才
32、能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成胭酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。第（2）小题，在恒定容积的液体培养基上培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，之所以以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数目为纵坐标不利于作图。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在生产.中，常用培养至稳定期的细菌用于次级代谢产物的提取。（全国卷二）
33、3 4、（1 2 分）某种细菌体内某氨基酸（X）的生物合成途径如图：底物色中间产物1批中间产物2型 X这种细菌的野生型能在基本培养基（满足野生型细菌生长的简单培养基）上生长，而由该种细菌野生型得到的两种突变型（甲、乙）都不能在基本培养基上生长；在基本培养基上若添加中间产物2,则甲、乙都能生长；若添加中间产物1,则乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少量的X,甲能积累中间产物 1,而乙不能累。请回答：（1）根据上述资料推论：甲中酶 的功能丧失；乙中酶 的功能丧失，甲和乙中酶 的功能正常。由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的_ _ _ _ _（同一、不同）菌体中的不同发生了突变，从而
34、导致不同酶的功能丧失。如果想在基本培养基上添加.少 量的X来生产中间产物1,则应选用一（野生型、甲、乙）。（2）将接种于基本培养基上能长出少量菌落，再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长。上述混合培养时乙首先形成菌落，其原因是。（3）在发酵过程中，菌体中X含量过高时，其合成速度下降。若要保持其合成速率，可采取的措施是改变 菌 体 细 胞 膜 的,使 X 排出菌体外。【答案】（1）b a c 不 同 基 因 甲（2）保证自身生长产生菌落（其他合理答案也给分）（3）通透性【解析】由材料可知，在基本培养基上添加中间产物2,甲、乙都能生长，说明甲、乙中酶c的功能正常；添加中间产物1,则乙
35、能生长而甲不能生长，说明甲中醵b的功能丧失，乙中酶b的功能正常。甲、乙都不能在基本培养基上生长，故乙中酶a的功能丧失。甲、乙单独培养时都不能生长，只有甲、乙混合培养时才能生长，说明甲产生的中间产物1 可以供给乙。7 7.（20 1 0 浙江卷T1 7）请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每 空 1 分，共1 0 分。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。（1）图中用K M n O,的溶液浸泡苹果的目的是 黑曲霉提取液中含有的可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过方式将酶固定化，酶被固定在用蒸储水洗涤固定化柱是为了除去。（2）实验中，操作流程A和 B的先
36、后顺序为。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的混合，如果出现现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调。试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被使用。【答案】（1）消 毒 果 胶 酶 吸 附 未 被 固 定 的 酶 等（2）A B 阀 1 乙醇 浑 浊（沉淀）慢（3）重复【解析】在制作工艺中必须对原材料消毒，这样才能保证后续试验的成功。K M n O i 是强氧化,剂，可以起到对苹果的消毒作用。可使果胶水解的物质是果胶酶。在制备固定化酶时，石英
37、砂具有吸附作用。实验中应先制备好固定化酶，再对苹果进行榨汁处理，否则易使果汁被杂菌污染。在苹果汁澄清过程中，应将调节阀 1关闭，否则在产物中会混入较多的果胶能。78.（2010海南卷T25）葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是。（2）该 微 生 物 通 过 无 氧 呼 吸 可 分 解,产生的终产物是 和 o（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵,如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。注：各发酹瓶的左18管为充，管右侧管为摔气管据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的
38、错误是,导致发酵中出现的主要异常现象是 丙同学的错误是_ 导致发酵中出现的主要异常现象是。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是、（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是0【答案】（1）酵 母 菌（2 分）（2）葡萄糖 乙醇 他（每 空 1分，共 3 分）（3）未夹住发酵瓶的充气管（2 分）发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）瓶中发酵液过多，淹没J排气管在瓶内的管口（2 分）排气时发酵液从排气管流出葡 萄 醋（或果醋）（2 分）葡 萄 酒（或果酒）（1分）葡 萄 酒（或果酒）（1分）（4）未及时排气（2 分）【解析】（
39、1）酿酒所用的微生物主要是酵母菌，它进行无氧呼吸的产物是酒精与二氧化碳。（2）在进行酒精发酵时应为无氧的环境，所以进气口与排气口都耍关闭，每隔一段时间打开排气口，以排出产生的二氧化碳。79.（2010安徽卷T31）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：外植体 3 愈伤组织 芽、根 一 植株请回答：（1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取 作为外植体，其依据是。（2）在过程中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和_ _ _ _ _,在配制好的培养基中,常 常 需 要 添 加,有利
40、于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25 d,若发现外植体边缘局部污染，原因可能是 o（3）在过程中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是。【答案】（1）茎 尖（或根尖）茎 尖（或根尖）病毒极少，甚至无病毒（2）有机物 植物激素 外植体消毒不彻底（3）培养基中生长素浓度偏低【解析】培育无病毒植株苗，应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，植物组织培养培养基成分应包含大量元素、微量元素、有机物，另外常常需要添加植物激素诱导植物细胞分裂、分化，外植体边缘局部污染，说明消毒不彻底，不同植物激素的比例影响植物细胞发育方向，生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，
41、有利于根的分化、抑制芽的形成，比值高低，有利于芽的分化、抑制根的形成。80.（2010宁夏卷T37）下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸播法提取，其理由是玫瑰精油具有的性质。蒸储时收集的蒸储液（是、不是）纯的玫瑰精油，原因是。（2）当蒸储瓶中的水和原料量一定时，蒸播过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸储时间和。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸储时间的变化趋势是。（3）如果蒸锵过程中不进行冷却，则精油提取量会，原因是。（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方，目的是。（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时
42、采摘花的最卜蓄意期士卜开放期+衰老期T时间/d（6）从薄荷叶中提取薄荷油时（能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是。【答案】（1）易挥发，难溶于水，化学性质稳定 不是玫瑰精油随水蒸气一起蒸储出来，所得到的是油水 混 合 物（2）蒸储温度-定时间内的提取量随蒸播时间延长而增加，一定时间后提取量不再增加（3）下降部分精油会随水蒸气挥发而流失（4）较 低 减 少 挥 发 （5）a （6）能薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似【解析】植物芳香油的提取方法有蒸储、压榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。而水蒸气蒸储法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植
43、物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水,易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸储，所以用水蒸气蒸储法提取。8 1.（2 0 1 0山东卷3 4）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醉反应能够合成生物柴油（如下图）。用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用、方法从油料作物中提取。（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供,培养基灭菌采用的最适方法是法。（3）测定培养液中微生物数量，可选用 法直接计数；从微生物M
44、分离提取的脂肪酶通常需要检测以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用 技术使脂肪酶能够重复使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热D N A聚合酶催化的 技术。【答案】（1）压榨；萃 取（注：两空顺序无先后）（2）碳 源 高 压 蒸 汽 灭 菌（3）显微镜直接计数 酶 活 性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化细胞）（4）P C R （或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）【解析】（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸锵法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪醐。（4）利用P C R技术可以扩增基因。