《(27)--第3.1章单克隆抗体的制备一.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《(27)--第3.1章单克隆抗体的制备一.ppt（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、单克隆抗体的制备一单克隆抗体的制备一主要内容主要内容p 定义定义 p 制备原理制备原理p 纯化与鉴定纯化与鉴定p 特点特点p 应用应用单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。4定义定义严谨严谨 求是求是 勤奋勤奋 进取进取5单克隆抗体单克隆抗体（第二代抗体（第二代抗体1984年的诺贝尔奖年的诺贝尔奖）：）：1975年，年，Kohler和和Milstein绵羊红细胞免疫脾细胞绵羊红细胞免疫脾细胞+小鼠骨髓小鼠骨髓瘤细胞瘤细胞融合融合杂交瘤细胞杂交瘤细胞均一抗体均一抗体单克隆抗体单克隆抗体 阿根廷阿根廷C.Mils
2、tein德国德国G.J.F.Kohler发现发现6严谨严谨 求是求是 勤奋勤奋 进取进取杂交瘤细胞杂交瘤细胞未融合的未融合的B细胞、细胞、骨髓瘤细胞分泌抗体分泌抗体寿命短寿命短不分泌抗体不分泌抗体寿命长寿命长融合融合融合的B细胞、骨髓瘤细胞6致敏致敏B细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞制备原理制备原理-杂交瘤技术杂交瘤技术筛选、扩增筛选、扩增l离心离心l过滤过滤l盐析盐析l亲和层析亲和层析纯化纯化l抗体效价：凝集反应或ELISAl抗体特异性：免疫荧光法、ELISA、免疫印迹法lIg类型：IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgM、IgA鉴定鉴定l 产生单克隆抗体的杂交瘤细胞能在体外“永久”地
3、存活并传代l 用不纯的抗原即可获得大量高度特异的、均一的抗体l适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法l可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗优点优点l固有固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围范围l反应反应强度不如多克隆抗体，只能产生弱凝胶反应，并且多数不引起强度不如多克隆抗体，只能产生弱凝胶反应，并且多数不引起沉沉淀反应淀反应l单单克隆抗体克隆抗体制备技术复杂、费时费工、价格较高制备技术复杂、费时费工、价格较高；l单克隆抗体单克隆抗体稳定性相对较差，易受环境稳定性相对较差，易受环境pHpH、温度和盐类浓度的影响，、温度和盐类浓度的影响，使其活性降低甚至消失使其活性降低甚至消失；l制备制备周期长，制备成本较高。周期长，制备成本较高。缺缺点点l作为作为诊断诊断试剂试剂l可用可用于蛋白质的于蛋白质的纯化纯化l肿瘤肿瘤的导向的导向治疗治疗l放射放射免疫显像免疫显像技术技术应用应用思考题请通过查阅文献，找出利妥昔单抗的制备请通过查阅文献，找出利妥昔单抗的制备原理？原理？