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1、2 0 0 8 高考真题分章汇总：现代生物科技专题2 0 1 3-0 7-0 7 1 0:4 1:1 5 1 分类：高考真题I 标签：2 0 0 8 高考分章真题 I 字号订阅一、基因工程（0 8 上海生物）2 3.阻止病人的致病基因传给子代的方法通常是将正常基因导入病人A.体细胞的细胞质 B.生殖细胞的细胞质C.体细胞的细胞核 D.生殖细胞的细胞核答案：D（0 8 江苏生物）1 8.下列叙述中错误的是A.改变N a C l 溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.加盐和加酒都能抑制微生物的生长D.密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染答案：A
2、（0 8 江苏生物）3 2.（8分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规P C R 方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是。（2）P C R 过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表 1 为根据模板设计的两对引物序列，图 2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？o（3）图 1步骤所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专-性要求？。（4）为将外源基因转入马
3、铃薯，图 1 步骤转基因所用的细菌B通常为（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的的均可将识别位点完全切开，请根据图1 中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用Ec o R 1 和 P s t I 酶切，得到 种 DNA片断。采用E c o R I 和 S m a I 酶切，得到 种 DNA片断。答案：（1）耐 高 温 2）引物对B （3）否（4）农杆菌（5）2 1（08广东生物）3 9.（现代生物科技专题，1 0分）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母
4、菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建。（2）若要鉴定淀粉醐基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是，若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶,可采用 检测或将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一段时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？答案：限制酶（限制性内切酶）DNA连接酶 导入受体细胞（2）DNA分子杂交技
5、术 抗 原 抗 体 杂 交（08海南）26.（1 8分）（选修模块3：现代生物科技专题）图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切醵E c o R I、B a m H I 的酶切位点，a m p R 为青霉素抗性基因，t c t R 为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，o r i 为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括E c o R I、B a m H I 在内的多种酶的酶切位点。（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用E c o R I 醵切，酸切产物用DNA连接酶进行连接后，其 中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、三 种。若 要 从 这 些 连 接 产 物
6、中 分 离 出 重 组 质 粒，需 要 对 这 些 连 接 产 物 进行。（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。（3）目的基因表达忖，RNA聚合醐识别和结合的位点是，其合成的产物是。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶时。答案：（1 8 分）（1）目的基因一载体连接物 载体-载体连接物 目的基因-目的基因连接物 分离纯化（每空2分，共 8分）（其他合理答案也给分）（2）载体-载体连接物（2分）；目的基因-载体连接物（1 分）、载体-载体连接物（1 分）（3
7、）启动子 m R N A （每空2分,共 4分）（4）E c o R I 和 B a m H I （2分）（只答一个酶不给分）（0 8 山东）3 5.【生物一现代生物技术专题】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切醐作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或 b”）（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，
8、既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。答案：（l）a a（2）基因枪法（花粉管通道法）（3）植物组织培养（1 分）脱分化（去分化）再分化（4）耐盐基因（目的基因）一定浓度的盐水浇灌（移栽到盐碱地中）二、细胞工程（08江苏生物）2 0.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养利调节渗透压B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D.同株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同答案：D（08理 综 1）5.下列关于细胞工程的叙
9、述，错误的是A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B 淋巴细胞融合可制务单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同答案：D（08天津）2.下列有关生物膜的叙述，正确的是A.大鼠脾细胞与兔造血干细胞的细胞膜能够发生融合B.用蛋白酶处理生物膜可改变其组成，不改变其通透性C.在生长激素的合成和分泌过程中，生物膜只发生结构上的联系D.兴奋在神经纤维上传导和在神经元间传递时，生物膜发生的变化是相同的答案：A（08上海生物）1 1.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术
10、包括细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植A.B.C.D.答案：A（0 8 北京）2 9.（1 8 分）白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为2 0、1 8。以白菜为母本、甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜一甘蓝”杂种幼苗。请回答问题:（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在 隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过 的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜一甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础是植物细胞具有。（2）为观察“白菜一甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的做临时装片，用染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是（3）二倍体“白菜一甘蓝”的染色体数为。这种植株通常不育，
11、原因是减数分裂过程中。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜一甘蓝”,这种变异属于。答案：（1）生殖杂 交（有性生殖）全能性（2）根 尖（茎尖）醋酸洋红（龙胆紫、碱性）有丝分裂中期(3)1 9没有同源染色体配对的现象染色体变异（0 8 海南）2 5.（1 8 分）（选作模块3；现代生物科技专题）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：（1）图中表示的是该花粉培养过程中的 过程，表示的是 过程，X代表的是，表示的是 过程，表示的是诱导 过程。（2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及最
12、后其浓度配比，获得的来源于未成熟花粉的完整植株都程为植 株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有。（3）植株甲进行，才能使其结实，产 生 后 代（乙），否则植株甲只有通过的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是 植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉基因组成种类数为 种，该群体植株产生可育花粉的 基 因 组 成 种 类 数 为 种。花 粉 培 育 在 育 种 上 的 特 殊 意 义是，从而开辟育种新途径。答案：（1 8分）（1）脱分化 再分化 胚状体 分 化（或发育）生 根（每 空1分，共5分）（2）激素 单倍体 细胞的全能性（每空2分，共6分）（3）
13、染色体加倍（其他合理答案也给分）无性生殖乙（或经过染色体加倍）一 多（每 空1分，共5分）缩短育种周期（2分）（0 8宁夏）3 8.生物一选修3现代生物科技专题（1 5分）回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酣处理，可用的醐是（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。（3）现用某种大分
14、子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。（5）在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。答案：3 8、生物一选修3现代生物科技专题（1 5分）（1）相互接触 接触抑制 单 层（或 一 层）胰蛋白酶（2）衰老甚至死亡不死性 降低 减少（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由
15、于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）（4）中 冷 冻（或超低温、液氮）酶 新陈代谢 抗原三、胚胎工程（0 8 江苏生物）3 4.选 做 题（6分）本题有A、B两题，请任选一题在答题卡指定位置作答，并把所选题目对应字母后的方框涂满涂黑。（0 8 江苏生物）B题。下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。（1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光 照 1 4 h,黑 暗 1 0 h）饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是。再在3 7,5%C O
16、2 条件下，精卵共同作用4 h,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第 5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎期开始的标志。（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是。（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，山重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于。（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入
17、导致受精卵死亡的最可能原因。答案：（1）促进排卵（或超数排卵）使精子获能 囊胚（2）容易获得纯合子并缩短育种时间（3）小 鼠 甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因（4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达（2 0 1 1 年浙江卷）6、a d a （腺甘酸脱氮酶基因）通过质粒p E T 2 8 b 导入大肠杆菌并成功表达腺甘酸脱氨酶。下列叙述错误的是A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个a d aD.每个插入的a d a 至少表达一个腺甘酸脱氨酶分子答案：C【解析】
18、大肠杆菌成功表达出腺甘酸脱氨酶，说明这些大肠杆菌都至少含有一个重组质粒，A正确；作为载体的必备条件之一是至少含有一个至多个限制酶切位点，所以作为载体的质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点，B正确；作为基因表达载体应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因，但并不是每个酶切位点都至少插入一个a d a,C错误；由于这些目的基因成功表达，所以每个a d a 至少表达一个腺甘酸脱氨醐分子，D正确。（20 1 1 海南生物卷）3 1.（1 5 分）回答有关基因工程的问题：（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA 后，可能产生粘性末端，也可能产生 _ 末端。若要在限制酶切割目的基因和质
19、粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 （相同，不同）粘性末端的限制前。（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA 杂交，该杂交技术称为。为了检测胰岛素基因转录的mRNA 是否翻译成，常用抗原-抗体杂交技术。（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌T i质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通 过 DNA 重组将目的基因插入植物细胞的 上。答案：（
20、1）平 相同（2）提供RNA 聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录 C a C 1 2溶 液（C a 2+）分子杂交技术 胰岛素原（蛋白质）(3)T-D N A染色体D N A【解析】（1）限制酶能识别特定的DNA序列，并在特定位点上切割D N A,形成粘性末端或平末端；要使目的基因和质粒直接进行连接，应使用同种限制酶进行切割，时二者产生相同的粘性末端。（2）启动子为DNA序列，具 有 RNA聚合酶结合位点，能启动转录，合成 RNA；将基因表达载体导入大肠杆菌时，常用Ca2+处 理,；检测目的基因时常用分子杂交技术检测目的基因是否转录出mRNA,用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白
21、质。（3）用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，先将目的基因导入农杆菌Ti质粒的 T-DNA中，再利用农杆菌侵染植物细胞，通过基因重组将目的基因插入到植物细胞的染色体的DNA上。（2011上海生命科学卷）（九）回答下列有关基因工程的问题。（10分）57.基因工程中使用的限制酶，其特点是。答案：特异性地识别和切割DNA（1分）【解析】限制酶具有专一性，能特异性地识别和切割DNA。下图四种质粒含有E1和 E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Ter表示抗四环素的抗性基因。58.将 两 端 用 E1切开的Ter基因与用E1切开的质粒X-1 混合连接，连接后获得的质粒类型有。（可多选）
22、A.X-1 B.X-2 C.X-3 D.X-4答案：ABC（2 分）【解析】用 E1切开的Ter基因与用E1切开的质粒X1混合连接，三个片段之间的连接是随机的，连接后形成的质粒类型包括题中的A、B、C 三项。59.若将上图所示X l、X2、X3、X4 四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有、。答案：无质粒细胞（1分）含 X3 的 细 胞（1分）【解析】X-1 含有Apr基因，该基因表达后对青霉素有抗性，X2 含有Ter基因，该基因表达后对四环素有抗性，X-3 不含抗性基因，X-4 同时含有Apr和 Ter基因，Apr和
23、 Ter基因表达后，对青霉素、四环素都有抗性。故而在含有青霉素或四环素的两种培养基上不能生长的大肠杆菌中不含Xl、X-2、X-4,即无质粒细胞和含X-3 的细胞。60.如果X-1 用 E1酶切，产 生 850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X-2（Ter基因的长度为1200对碱基）用 E2酶切后的片段长度为 对碱基。答案：4750（2 分）【解析】用 E1酣切X-1,产生850对碱基的Apr基因大部分碱基片段和3550对碱基含有E2酶切位点的片段。与 Ter基因形成含有4750个碱基对的X-2 质粒。用 E2酶切割质粒,由环状变为链状，碱基对数不变。6 1.若将外源的Ter基因两端用E
24、2切开，再与用E2切开的X-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含 X4 的细胞数与含X1的细胞数之比为1 3,增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？。原因是。答案：不 能（1分）DNA连接酶对DNA片段没有选择性/两段DNA末端相同（1分）【解析】含 X4 的细胞数与含X1的细胞数的比值与形成这两种质粒的数量有关。这两种质粒的形成是通过末端随机结合形成碱基对，再 由 DNA连接酶连接缺口，而 DNA连接酶对该DNA片段无选择作用，故增加DNA连接前的用量，不改变题中的比值。（11年重庆卷）31.（16分）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种
25、皮为深褐色（TT）,某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。（1）与拟南芥t 基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为A G A,其末端序歹IJ成 为“-AGCGCGACCAGAACUCUAA-“，则 Tn比 t 多编码 个氨基酸（起始密码子位置相同，UGA、UAA为终止密码子）。（2）图中应为。若不能在含抗生素K an的培养基上生长，则原因是.若的种皮颜色为，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同。（3）假设该油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t 基因，则中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为；同时，的叶片卷曲
26、（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为；取的茎尖培养成16颗植珠，其性状通常（填不变或改变）。（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥（填是或者不是）同一个物种。答案：31.（16分）（1）2（2）重组质粒（重组DNA分子）重组质粒未导入 深褐色（3）TnTntt；黄色正常、黄色卷曲：不变（4）是【解析】通过对基因工程和遗传知识相结合来考查学生对该部分知识的掌握，属中档题，较难。（1 ）油 菜 T n 基 因 的 m R N A 中 U G A 变为 AGA,而 末 端 序 列 为“-AGCGCGACC
27、AGACUCUAA，在拟南芥中的UGA本是终止密码子不编码氨基酸，而在油菜中变为AGA可编码一个氨基酸，而 CUC还可编码一个氨基酸，直到UAA终止密码子不编码氨基酸。（2）示意图显示是由质粒与油菜Tn基 因（即目的基因）连接而成的，故而是重组质粒（重组DNA分子）；若不能在含抗生素Kan的培养基上生长，说明对抗生素Kan没有抗性，即中没有抗生素Kan抗性基因，进而说明重组质粒未导入；由题意可知，拟南芥 T 基因控制的种皮颜色为深褐色，若油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同，则的种皮颜色为深褐色。（3）假设油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其是一个t 基因，注意拟南芥是指实验有的突变体t t
28、,所以转基因拟南芥基因型为T n t,减数分裂联会时形成四分体是由于染色体进行了复制，基因也进行了复制，因而基因型为TnTntt。设转基因拟南芥的叶片卷曲与正常叶是由B、b基因控制，正常叶为显性，而该对性状与种皮性状为独立遗传，则这两对性状遵循基因的分离与自山组合定律。则：转基因拟南芥X双杂合拟南芥Tntbb TtBb进行逐对分析：亲本TntX Tt杂交，子 代 l/4TnT、l/4Tnt、1/4 T t、l/4tto由于Tn和 T 的功能相同，所以表示为3/4T-（深褐色）、l/4tt（黄色）。亲本bbX Bb杂交，子 代 1/2 Bb（正常叶）、1/2 bb（卷曲叶）。两对基因自山组合，所
29、以后代中有四种表现型：3/8种皮深褐色正常叶、3/8种皮深褐色卷曲叶、1/8种皮黄色正常叶、1/8种皮黄色卷曲叶。取转基因拟南芥的茎尖培养为植物组织培养为无性生殖，所以后代性一般不变。（排除基因突变）（4）由上可知所得转基因拟南芥Tnt和野生型拟南芥TT两个品种之间不存在生殖隔离,能杂交产生可育后代，因此是同一个种。（11年山东卷）35.（8 分）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠 中获取。（2）图 中 的 高 血 压 相 关 基 因 作 为,质粒作为
30、二者需用 切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有 有关。（3）子代大鼠如果 和,即可分别在水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所 用 到 的 主 要 胚 胎 工 程 技 术 是、早期胚胎培养和胚胎移植。答案：（1）卵巢（2）目 的 基 因 载 体 同 种 限 制 性 核 酸 内 切 酶（或同种限制酶）限制酶识别位点（3）检测到体内有相关蛋白 出现高血压（4）体外受精【解析】（1）卵母细胞采集的方法通常是从活体输卵管或刚宰杀的雌性动物的卵巢中获取。（2）图中显示将高血压相关基因与质粒连接后导入小鼠细胞内，因此，高血压相关基
31、因是目的基因，质粒作为运载体，二者通常需要用同种限制酶处理；含有高血压相关基因的DNA片段与质粒上都有限制的识别位点。（3）基因控制蛋白质的合成过程即为基因的表达过程。目的基因是否成功表达，在分子水平上可以通过检测转基因生物体内是否有相关目的基因的表达产物（相关蛋白质）；生命活动的主要承担者是蛋白质，目的基因若是成功表达必然会引起转基因生物相应性状的改变，因此在个体水平上还可以通过转基因生物是否出现高血压症状来衡量。（4）胚胎工程用到的生物技术有体外受精、早期胚胎培养，胚胎移植等。（2011年江苏卷）33.（8 分）请回答基因工程方面的有关问题：（1）利 用 PCR技术扩增目的基因，其原理与细
32、胞内D N A复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A 的 DNA片段所占的比例为。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核甘酸链等长的DNA片段。（2）设计引物是PCR技术关键步骤之、某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如卜图），请分别说明理由。第 1组:第 2 组:（3）PCR反应体系中含有热稳定D NA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DN A聚合酶的 功 能，这是因为。（4）用限制酶EcoRV、M bol单独或联合切割同一种质粒，得到的DN A片段长度如下图（1 kb即1000个碱基对），请在答题卡的
33、指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。答案：33.（8分）15/16 三（2）引物I和引物H局部发生碱基互补配对而失效引物r自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效（3）D N A聚合酶只能将单个脱氧核甘酸连续结合到双链D N A片段的引物链上（4）见右图【解析】（1）由图示PCR扩增D N A图示可知，在第二轮循环结束时，产物D N A中首次出现含引物A的子链DNA,且比例为3/4,第三轮中含引物A的D N A片段所占比例为7/8,即所有D N A片段中，只有一个片段不含引物A,故推测在第四轮中，含引物A的D N A片段所占比例为15/16 o （2）第一组两引物有部分碱基对应互补
34、配对，可能在扩增时失效；第二组引物I 可能自身首尾互补配对而失效。（3）D NA聚合酶的作用是把游离的脱氧核甘酸连接到引物D N A的3 端，形成磷酸二酯键。（4）据两种酶单独和联合切割的结果分析，在质粒上有一个EcoRV限制酶的切割位点，有两个M bol限制酶的切割位点，以上三个酶切位点不存在重叠现象，故可标注如下图（图见答案）。（11年北京卷）31.（16分）T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收
35、获种子（称为T 1代）。（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除，因为后者产生的会抑制侧芽的生长。（2）为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T 2代）。（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需 将T 2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性。（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被
36、插入的基因片段。其过程是：提取 植株的D N A,用限制酶处理后，再用 将获得的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从 图 中 A、B、C、D 四种单链D N A 片断中选取作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。答案：31（16分）（1）顶芽 生长素（2）（一定浓度的）除草剂（3）（一定浓度的）盐（4）野生型 1（5）降低（6）突变体 DNA连接酶 B、C【解析】（1）顶芽产生的生长素向下运输会积累在侧芽部位抑制侧芽的生长。（2）野生型拟南芥是否被农杆菌转化，可在个体水平进行检测，看它是否具有抗除草剂性状。因此可将T1代种植在含除草剂的培养基中。（3）为筛选出具有抗盐性
37、状的突变体，需将T2代播种在含 有（一定浓度）除草剂的培养基上，获得所需个体。（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与野生型植株进行杂交,再自交1代后统计性状分离比。如果出现3：1的分离比，则为单基因突变。（5）这 个“该突变体”应 指 第（4）小题的抗盐突变体，所以T-DNA的插入造成了抗盐基因功能丧失，之而野生型基因的表达导致植物的抗盐性降低。（6）因为要扩增的是被插入基因片段，所以应提取突变体植株的DNA。将 DNA片段连接起来的酶是DNA连接酶。图示中表示出了 DNA合成方向是：引物A 是顺时针方向，那么，B、D 就是逆时针方向，
38、C 也是顺时针方向。利用 A、D 这对引物扩增的将是T-DNA片段，而利用B、C 这对引物扩增的才是被插入的基因片段。（2011年安徽卷）31.（21分）II.（9 分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。（1）进行转基因操作前，需用 酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 和 之间。（3）采 用 PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该 PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含 Mg2+）、水，4 种脱氧核糖甘酸、模
39、板DNA、和.（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以 增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。答案：（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）（2）启动子 终止子（3）热稳定DNA聚 合 酶（或 Taq酶）对干扰素基因特异性的DNA引物对（4）增大细胞贴壁生长的附着面积【解析】考查的知识点为动物细胞培养和基因工程.（1）为了使组织分散为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。（2）启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端。（3）PC R 反应体系的主要成分应扩增缓冲液（含 Mg2+）、水，4 种脱氧核糖甘酸、模板D NA、热稳定
40、DNA聚合醐、两种引物。（4）细胞离体培养时通常表现出：贴壁生长和接触抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量.（11天津理综卷）6.某致病基因h 位于X 染色体上，该基因和正常基因H 中的某特定序列 Bell醐切后，可产生大小不同的片段（如 图 1,bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图 2 为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是A.h 基因特定序列中Bel 1前切位点的消失是碱基序列改变的结果B.H-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲C.H-2的基因诊断中出现142bp,99bp和 43bp三个片段，其基因型为XHXhD.II-3的丈夫
41、表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2.答案：D【解析】由图1可见，H 突变为h 后，h 基因特定序列就不能被Bel I 酶切，应是碱基序列改变导致相应酶切位点消失（限制酶专一性识别酶切位点），故 A 正确；因为该致病基因h位于X 染色体上，II-1是男性患者，基因型为X hY,该男性的X 染色体来自母亲，故 B 正确；II-2的基因诊断中出现I42bp、99bp和43bp三个片段，说明含一个正常基因H和一个致病基因h,基因型为XHXh,C正确；H-3的基因型为XHXH或XHXh（概率各占1/2）,其丈夫表现型正常，基因型必为XHY。其儿子的基因诊断中若出现142bp片
42、段，儿子基因型就是XhY。这对夫妇儿子患该病的概率为1/2（XHXh）X 1/2（Xh）=1/4,故D错。（I I年四川卷）5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是A.过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，C.过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达答案：B【解析】真核生物体内的基因含有
43、不能编码蛋白质的序列（内含子）等因素，导致逆转录合成的H的基因与原基因有较大的差异，所以人工合成的H的基因不能用于比H鱼基因组测序，A选项错误；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多，抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B选项正确；农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的最常用方法，不是为了筛选含有标记基因的质粒，c选项错误；应用DNA探针技术，可以检测转基因植物中目的基因的存在，但不能完成对目的基因表达的检测，D选项错误专题2、细胞工程（2011年江苏卷）16.下列有关植物
44、组织培养的叙述，正确的是A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得答案：D【解析】愈伤组织是一团无定形状态的薄壁细胞，A错误；二倍体植株的花粉经脱分化与再分化处理后会得到单倍体植株，然后再经秋水仙素处理，得到能稳定遗传的二倍体植株，B错误；胚状体、不定芽、顶芽或腋芽外包上人工薄膜，可制成人工种子，C 错误；添加适量NaCl的培养基是选择培养基，耐盐突变体可在其上生长，D 正确。（2011上海生命科学卷）2 2.下列关于植
45、物组织培养的表述，错误的是A.外植体可以来自于植物的任何细胞 B.培养应在无菌条件下进行C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同答案：A【解析】外植体（即离体的器官、组织或细胞）一般用幼嫩的细胞，这样可以使组织培养容易成功。（2011年江苏卷）1 4.关于现代生物技术应用的叙述，错误的是A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育答案：B【解析】蛋白质工程与基因工程不同，基因工程产生的是自然界中原有的蛋白质，而蛋白质工程可
46、合成自然界中不存在的蛋白质，A 项正确。体细胞杂交技术是植物细胞工程中培养杂种植株的一项技术，动物细胞工程中克隆动物常利用细胞核移植技术，而制备单克隆抗体常利用动物细胞融合技术，B 项错误。用茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗，因为茎尖的细胞刚分裂产生还未被病毒感染，C 项正确。动物细胞培养技术可为动物的转基因技术提供受体细胞等，D 项正确。（2011年浙江卷）31.（12分）实验分组：甲组：培养液+Y 细胞+3H-TdR（3H标记的胸腺喀啜脱氧核甘）+生理盐水乙组：培养液+Y 细胞+3H-TdR+X（生理盐水配制）每组设置若干个重复样品。（2）分别测定两组的CRD（细胞内的放射性强度），求每组
47、的平均值。（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其CRD,求每组平均值并进行统计分析。（与说明，答题时用X、CRD、3H-TdR表示相关名词；Y 细胞是能增殖的高等动物体细胞）请回答：（1）实验目的：。（2）预测实验结果集结论：。（3）实验中采用3H-TdR的原因：o答 案:31.（13分）（1）探究X 对 Y 细胞增殖（DNA合成）的影响（2）如果乙组CRD明显高于甲组，说明X 对 Y 细胞增殖（DNA合成）有促进作用。如果乙组CRD与甲组基本相同，说明X 对 Y 细胞增殖（DNA合成）无影响。如果乙组CRD明显低于甲组，说明X 对 Y 细胞增殖（DNA合成）有抑制作用。（3）3H-
48、TdR是 DNA合成的原料之一，可根据CRD变化来判断细胞增殖（DNA合成）情况。【解析】本所考查的知识点是有关细胞增殖以及实验设计的内容。根据意，本实验的目的是探究X 对 Y 细胞中的DNA的复制和细胞增殖的影响，实验的自变量为是否加入物质X,因变量是细胞内的放射性强度，即 CRD。然后比较两组的CRD而得出相应的结论。由于3H-TdR 只能存在于DNA分子中，是 DNA合成的原料之一，所以可以根据CRD变化来判断细胞增殖和DNA复制情况。（11天津理综卷）8.（14分）絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提
49、高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如F。据图回答：（1）溶菌酶的作用是 o（2）PEG的作用是。（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B 难以生长。图 中 A B 融合菌能生长和繁殖的原因是o（4）目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的高分子化合物，又能在含有的培养基上生长的A B融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
50、 为对照组。经搅拌、静置各3 分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高），计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。（6）目的菌的种群增长曲线是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 型。在 4044小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是。答案：8（14分）（1）分解细胞壁（2）诱导原生质体融合（3）两亲本失活部位不同，融合后活性部位互补（4）石油（5）不加发酵液的石油浅水（6）S 此期间，目的菌及其产生的絮凝活性高分子化合物的含量高【解析】解析：本题主要考查细胞融合、种群增长等相关知识，意在考查考生的理解能力和运用