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1、第三章 微生物的繁殖与代谢第一节 细菌的繁殖与代谢一、细菌生长繁殖的条件 1.营养物质（1）水份（2）碳源（3）氮源（4）无机盐类：如磷、硫、镁、铁、钾、钠、钙、锰、锌、钴、铜、氯等无机盐类。（5）生长因子：是细菌生长过程中不可缺少的微量有机化合物，主要包括维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。2 一、细菌的生长繁殖第二节 第二节 细菌的生理 细菌的生理2.温度：大多数病原菌最适温度为373.酸碱度(pH)：多数病原菌最适PH为7.27.64.气体根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类：（1）专性需氧菌（2）微需氧菌（3）兼性厌氧菌（4）专性厌氧菌 5.渗透压：一般G+菌渗透压为2025个大气压，G
2、-菌为56个大气压。（一）细菌生长繁殖的条件3二、细菌生长繁殖的方式与速度1繁殖方式：二分裂。2.繁殖速度：2030min繁殖一代。42.繁殖方式：分裂中的葡萄球菌 分裂中的葡萄球菌 X87000 X87000 分裂中的霍乱弧菌 分裂中的霍乱弧菌 X 70000 X 70000无性二分裂法3.速度：快结核杆菌 慢 将一定数量的细菌接种于合适的培养基中，在适宜的温度培养时，细菌的生长过程具有规律性。以培养时间为横坐标，培养物中活菌数的对数为纵坐标，可将细菌的增殖规律绘出一条曲线，称为生长曲线（growth curve）。3.细菌的生长曲线64.细菌的群体繁殖totallivinglogarith
3、micstationarydeclinelag返回至目录：稳定期（：稳定期（stationary phase)stationary phase)细菌生长速度渐减细菌生长速度渐减,死亡数增加死亡数增加,细菌形态、染细菌形态、染色性色性,和生理性状发生改变和生理性状发生改变,细菌的芽胞、外毒素细菌的芽胞、外毒素及抗生素等代产物一般在此期产生。及抗生素等代产物一般在此期产生。：衰亡期（：衰亡期（decline phasedecline phase）此期细菌繁殖速度越来越慢，细菌形态发生显此期细菌繁殖速度越来越慢，细菌形态发生显著改变，出现衰退型或菌体自溶，代谢活动趋于著改变，出现衰退型或菌体自溶，代
4、谢活动趋于停滞，此期细菌难以鉴定。停滞，此期细菌难以鉴定。：迟缓期（：迟缓期（lag phaselag phase）：为细菌进入新境后的短暂适应阶段为细菌进入新境后的短暂适应阶段,体积增大、体积增大、代谢活跃，但繁殖极少，主要为细菌的分裂繁殖代谢活跃，但繁殖极少，主要为细菌的分裂繁殖合成并积累充足的酶、辅酶和中间代谢产物。时合成并积累充足的酶、辅酶和中间代谢产物。时间长短随菌种、接种菌龄和菌量以及营养物等不间长短随菌种、接种菌龄和菌量以及营养物等不同而有差异，一般为同而有差异，一般为1-41-4小时。小时。：对数期（：对数期（logarithmic phaselogarithmic phase
5、）：该期细菌生长迅速该期细菌生长迅速,细菌的形态、染色性及生理细菌的形态、染色性及生理活性等都较典型活性等都较典型,所以研究细菌的生物学性状应所以研究细菌的生物学性状应该选用该期细菌该选用该期细菌三、细菌的代谢产物细菌生化反应的细菌生化反应的概念概念：各种细菌所具有的酶不完全相同，对营养物各种细菌所具有的酶不完全相同，对营养物质的分解能力亦不同，所以不同的细菌的代谢质的分解能力亦不同，所以不同的细菌的代谢产物也会有不同，根据这个特点，利用生物化产物也会有不同，根据这个特点，利用生物化学方法来鉴别不同细菌的试验即称为细菌生化学方法来鉴别不同细菌的试验即称为细菌生化反应试验。反应试验。1、细菌的分
6、解代谢产物及其生化反应（1）糖发酵试验返回至目录糖发酵试验（2）尿素酶试验 某些细菌（比如：幽门螺杆菌）生长繁殖过程分泌尿素酶，尿素酶分解尿素产生氨，使培养基变为碱性，酚红指示剂呈红色，此为尿素酶试验阳性。（3）吲哚试验回至目录（3）硫化氢试验H2S 试验2.细菌合成产物 11）热原质）热原质2）毒素和酶3）色素2.细菌合成产物 11）热原质）热原质2）毒素和酶3）色素色素分：脂溶性色素（如金黄色葡萄球菌的金黄色色素）和水溶性色素(绿脓杆菌的绿脓素)4）抗生素5）细菌素）维生素 热原质许多细菌能合成一种物质，注入人体或动物能引起发热反应。本质是脂多糖。耐热 特点：低营养、低温度（22-28）、
7、低PH(4.0-6.0)、高湿度和氧 培养基：沙保培养基 繁殖方式：第二节 真菌的增殖与培养 单细胞-出芽 多细胞-孢子n 菌落：单细胞酵母型菌落、类酵母型菌落（假菌丝）多细胞丝状菌落 染色：乳酚棉蓝染色法 酵母型菌落单细胞菌落类酵母型菌落曲霉属多细胞菌落青霉菌落第三节 病毒的增殖与培养吸附穿入脱壳核酸游离早期mRNA转录早期蛋白质转译病毒DNA复制后期mRNA转录晚期蛋白质合成组装成熟释放病毒的复制周期一、病毒的增殖（一）病毒的复制周期 1.吸附（adsorption）是病毒表面结构成分与宿主细胞表面受体的结合，主要由病毒包膜或无包膜病毒衣壳表面的病毒吸附蛋白与细胞表面的特异性受体相结合。如
8、HIV表面gp120的受体是人类T淋巴细胞表面的CD4分子。（一）病毒的复制周期 2.穿入（penetration）病毒与细胞表面受体结合吸附于易感细胞后，穿过胞膜进入细胞。3.脱壳（uncoating）病毒穿入细胞后，脱去蛋白衣壳，将核酸游离释放。4.生物合成（biosynthesis）包括子代病毒核酸的复制与蛋白质的合成。在这个阶段用血清学方法和电镜检查都无法在细胞内找到任何病毒颗粒，称为隐蔽期（一）病毒的复制周期 4.生物合成（biosynthesis）以DNA病毒为例：早期mRNA转录早期蛋白质转译（功能蛋白）复制子代核酸晚期mRNA转录晚期蛋白质转译（结构蛋白）一、病毒的增殖（一）病毒的复制周期 5.装配（assembly）病毒将生物合成的蛋白质和核酸，在宿主细胞内组装成子代核衣壳。6.成熟（maturation）无包膜病毒的成熟主要是针对潜在的病毒吸附蛋白进行修饰与改造，有包膜病毒的成熟是在释放时获得包膜，并在包膜表面表达刺突。7.释放（release）无包膜病毒装配成的核衣壳即为成熟病毒体，从宿主细胞释放可导致细胞破裂。（一）病毒培养 1细胞培养 主要方法用于分离鉴定病毒；实验研究；生产疫苗 2鸡胚培养（接种）流感病毒（最敏感）简易、价格低 3.动物接种 少用乙脑病毒、柯萨奇病毒等分离鉴定湖南中医药大学卢芳国制作