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1、水果中维生素含量测定第1页，本讲稿共11页不平凡的维不平凡的维Cv1497年年7月月9日到日到1498年年5月月30日日 达伽马，非洲达伽马，非洲印度，印度，160多名船员，多名船员，100多人死于多人死于坏血病坏血病v1519年麦哲伦太平洋年麦哲伦太平洋南美洲，南美洲，200多人，仅多人，仅35人存活人存活v1768年到年到1780 库克船长，无人死于坏血病库克船长，无人死于坏血病v一直到一直到1911年，人类才确定它是因为缺乏维生素年，人类才确定它是因为缺乏维生素C而产生的。而产生的。第2页，本讲稿共11页维生素维生素C的功能的功能v胶原蛋白的合成胶原蛋白的合成v治疗坏血病治疗坏血病v预防
2、牙龈萎缩、出血预防牙龈萎缩、出血v抗衰老、抗癌抗衰老、抗癌v治疗贫血治疗贫血v预防动脉硬化预防动脉硬化v提高人体的免疫力提高人体的免疫力第3页，本讲稿共11页第4页，本讲稿共11页一、实验目的v维生素维生素C是生物体内抗氧化体系成员之一。是生物体内抗氧化体系成员之一。因此，维生素因此，维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。通过本实验掌握用育良种的鉴别指标。通过本实验掌握用2,6-二二氯酚靛酚钠法测定植物组织维生素氯酚靛酚钠法测定植物组织维生素C含量的方含量的方法。法。第5页，本讲
3、稿共11页二、实验原理v2，6-二氯酚靛酚钠是氧化性染料，可将还原态的维生二氯酚靛酚钠是氧化性染料，可将还原态的维生素素C氧化成脱氢维生素氧化成脱氢维生素C，而染料本身从深蓝色被还原，而染料本身从深蓝色被还原成无色的衍生物。成无色的衍生物。v2，6-二氯酚靛酚钠在酸性条件下呈红色。在滴定终二氯酚靛酚钠在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的点之前，滴下的2，6-二氯酚靛酚钠立即被还原成无二氯酚靛酚钠立即被还原成无色。当溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。色。当溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。第6页，本讲稿共11页v新鲜生菜新鲜生菜三、实验材料四、设备与试剂滴定管、三角瓶、研钵、量
4、筒、移液管滴定管、三角瓶、研钵、量筒、移液管 1草酸，草酸，0.1%2，6-二氯酚靛酚钠溶液二氯酚靛酚钠溶液第7页，本讲稿共11页五、实验步骤v（一）维生素（一）维生素C的提取的提取v称取称取1.0 g新鲜样品（已称好），置研钵中，分次加新鲜样品（已称好），置研钵中，分次加20ml 1草酸，研成匀浆草酸，研成匀浆（用（用1%的草酸定容的草酸定容20ml）。通过纱布过滤后。通过纱布过滤后取取10ml放于离心机中放于离心机中3000r/min离心离心10min,吸取上清使用。吸取上清使用。v（二）维生素（二）维生素C的测定的测定v吸取滤液吸取滤液10 ml，放入，放入50 ml三角瓶中，立即用三角
5、瓶中，立即用0.1%2，6-二氯酚二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的粉红色在靛酚钠溶液滴定至出现明显的粉红色在15 s内不消失为止。记录内不消失为止。记录所用滴定液体积（另取所用滴定液体积（另取10ml 1%草酸作空白对照草酸作空白对照）。）。第8页，本讲稿共11页v（三）标准液的标定（三）标准液的标定v取取1mg/ml抗坏血酸溶液抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加置于锥形瓶中，加9ml 1%草草酸，用酸，用0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色二氯酚靛酚滴定至淡红色15s不消失。不消失。计算出计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 1%草草酸作空白对照
6、）。酸作空白对照）。1ml 染料相当于染料相当于0.7mg抗坏血酸抗坏血酸第9页，本讲稿共11页v（四）含量计算（四）含量计算v维生素维生素C（mg/g样品）样品）=（样品消耗染料体（样品消耗染料体积积-空白消耗染料体积）空白消耗染料体积）提取定容后的体提取定容后的体积积 1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数染料能氧化抗坏血酸的毫克数/滴定滴定用的样品体积用的样品体积 水果质量水果质量第10页，本讲稿共11页六、注意事项六、注意事项v1.操作要尽可能快，并防止与铁、铜器具接操作要尽可能快，并防止与铁、铜器具接触，以减少维生素触，以减少维生素C的氧化。的氧化。v2.草酸及样品的提取液避免日光直射。草酸及样品的提取液避免日光直射。第11页，本讲稿共11页