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1、第二十章第二十章脑脊液标本脑脊液标本(biobn)的细菌学检验的细菌学检验第一页，共二十三页。概述概述(i sh)正常人体正常人体(rnt)脑脊液是无菌的脑脊液是无菌的细菌性脑膜炎属于临床医学急症细菌性脑膜炎属于临床医学急症引起脑脊液感染的常见菌有引起脑脊液感染的常见菌有革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阳性菌革兰阳性菌第二页，共二十三页。引起脑脊液感染引起脑脊液感染(gnrn)的常见菌的常见菌革兰阴性菌革兰阴性菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌流感嗜血流感嗜血(sh xu)杆菌杆菌肠杆菌科肠杆菌科非发酵菌非发酵菌类杆菌属类杆菌属多杀巴斯德菌多杀巴斯德菌第三页，共二十三页。引起脑脊液感染
2、引起脑脊液感染(gnrn)的常见菌的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(1)金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌凝固凝固(nngg)酶阴性葡萄酶阴性葡萄球菌球菌肺炎链球菌肺炎链球菌B群链球菌群链球菌A群链球菌群链球菌肠球菌属肠球菌属消化链球菌消化链球菌第四页，共二十三页。引起脑脊液感染引起脑脊液感染(gnrn)的常见菌的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(2)结核结核(jih)分枝杆菌分枝杆菌产单核李斯特菌产单核李斯特菌炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌第五页，共二十三页。引起引起(ynq)脑脊液感染的常见菌脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(3)新型新型(xnxng)隐球隐球菌菌假丝酵母菌属假丝酵
3、母菌属第六页，共二十三页。标本的采集标本的采集(cij)和运送和运送标本采集指征标本采集指征发热发热头痛头痛(tutng)恶心恶心呕吐呕吐颈项强直和反射增强颈项强直和反射增强第七页，共二十三页。标本标本(biobn)的采集和运送的采集和运送采集方法采集方法经腰椎穿刺获得经腰椎穿刺获得(hud)从从Ommaya管采集管采集第八页，共二十三页。标本的采集标本的采集(cij)和运送和运送标本的运送标本的运送采集标本后在常温下采集标本后在常温下立即立即(lj)送检送检不可置冰箱冷藏或低不可置冰箱冷藏或低温保存温保存第九页，共二十三页。标本的验收标本的验收(ynshu)、培养、分离和鉴定、培养、分离和鉴
4、定标本的验收标本的验收培养瓶是否有渗漏、破损培养瓶是否有渗漏、破损(p sn)或明显污染或明显污染培养瓶上是否有标签培养瓶上是否有标签培养瓶上的标签与申请单是否相符培养瓶上的标签与申请单是否相符脑脊液是否足量，并在申请单上注明标脑脊液是否足量，并在申请单上注明标本量本量第十页，共二十三页。革兰染色革兰染色(rns)第十一页，共二十三页。标本的验收标本的验收(ynshu)、培养、分离和鉴定、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（标本的显微镜检查（2）抗酸染色抗酸染色(rns)4000rpm离心离心30min，沉淀物涂片抗酸染色，沉淀物涂片抗酸染色或金胺或金胺“O”染色染色第十二页，共二十三页。抗酸染
5、色抗酸染色(rns)第十三页，共二十三页。标本的验收、培养、分离标本的验收、培养、分离(fnl)和鉴定和鉴定标本的显微镜检查（标本的显微镜检查（3）墨汁墨汁(mzh)染色染色3000rpm离心离心1015min，沉淀物涂片墨汁染，沉淀物涂片墨汁染色色第十四页，共二十三页。墨汁墨汁(mzh)染色染色第十五页，共二十三页。标本标本(biobn)的验收、培养、分离和鉴定的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（1）需氧培养需氧培养血血琼琼脂脂(qingzh)、巧巧克克力力琼琼脂脂(qingzh)、麦麦康康凯凯或或EMB、营养肉汤、营养肉汤510%CO2孵育孵育第十六页，
6、共二十三页。标本的验收标本的验收(ynshu)、培养、分离和鉴定、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（2）厌氧培养厌氧培养血琼脂、血琼脂、PEA或或CAN、厌氧肉汤、厌氧肉汤厌氧气厌氧气(yngq)体孵育体孵育第十七页，共二十三页。标本的验收、培养、分离标本的验收、培养、分离(fnl)和鉴定和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（3）真菌真菌(zhnjn)培养培养沙保弱葡萄糖琼脂沙保弱葡萄糖琼脂 30 C C孵育孵育 第十八页，共二十三页。标本的验收标本的验收(ynshu)、培养、分离和鉴定、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴
7、定（4）选取平板选取平板(pngbn)上生长的菌落作革兰上生长的菌落作革兰染色，根据染色结果作细菌的初步分染色，根据染色结果作细菌的初步分群群根据初步分群的结果进行种的鉴定根据初步分群的结果进行种的鉴定第十九页，共二十三页。标本的验收、培养、分离标本的验收、培养、分离(fnl)和鉴定和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（5）也可根据革兰染色结果也可根据革兰染色结果(ji gu)直接将分离直接将分离株种入各种商业鉴定板进行鉴定株种入各种商业鉴定板进行鉴定第二十页，共二十三页。报告及解释报告及解释(jish)阳性结果报告阳性结果报告初级初级(chj)报告报告涂片或培养阳性应立即电话
8、报告涂片或培养阳性应立即电话报告最终报告最终报告报告细菌种属名报告细菌种属名报告标准抗生素敏感试验结果报告标准抗生素敏感试验结果 第二十一页，共二十三页。报告报告(bogo)及解释及解释阴性结果报告阴性结果报告普通普通(ptng)培养两天培养两天48h培养未见细菌生长培养未见细菌生长疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间第二十二页，共二十三页。内容(nirng)总结第二十章脑脊液标本的细菌学检验。第二十章脑脊液标本的细菌学检验。标本的采集和运送标本采集指征。标本的采集和运送采集方法。标本的采集和运送标本的运送。4000rpm离心30min，沉淀物涂片抗酸染色或金胺“O”染色。标本的验收、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（3）。血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯或EMB、营养肉汤。血琼脂、PEA或CAN、厌氧肉汤。根据初步分群的结果(ji gu)进行种的鉴定第二十三页，共二十三页。