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1、第第33讲细胞工程胞工程课程内容课程内容核心素养核心素养提考能提考能1.简述植物的组织培养简述植物的组织培养2.利用植物组织培养技术培育菊花或其他利用植物组织培养技术培育菊花或其他植物幼苗，并进行栽培植物幼苗，并进行栽培3.简述动物的细胞培养与体细胞克隆简述动物的细胞培养与体细胞克隆4.收集单克隆抗体在临床上实际应用的资收集单克隆抗体在临床上实际应用的资料，并进行交流分享料，并进行交流分享5.举例说出细胞融合与单克隆抗体制备举例说出细胞融合与单克隆抗体制备科学思维科学思维建立植物细胞工程和单克隆建立植物细胞工程和单克隆抗体制备基本流程模型抗体制备基本流程模型科学探究科学探究 细胞工程的应用细胞
2、工程的应用社会责任社会责任植物组织培养在生产生活中植物组织培养在生产生活中的应用，克隆动物及对人类的应用，克隆动物及对人类社会可能的影响社会可能的影响1.细胞工程细胞工程(1)原理：细胞生物学和分子生物学。原理：细胞生物学和分子生物学。(2)操作水平：操作水平：_。(3)目的：按照人的意愿来改变细胞内的目的：按照人的意愿来改变细胞内的_或获得或获得_。考点一植物细胞工程考点一植物细胞工程细胞水平或细胞器水平细胞水平或细胞器水平遗传物质遗传物质细胞产品细胞产品2.植物细胞的全能性植物细胞的全能性遗传信息遗传信息完整生物体完整生物体全部遗传信息全部遗传信息离体离体营养、激素营养、激素3.植物组织培
3、养技术植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有原理：植物细胞具有_。(2)过程：过程：全能性全能性人工种子人工种子脱分化脱分化再分化再分化(3)培养条件：培养条件：无菌：培养基无菌：培养基_、培养材料和培养器械、培养材料和培养器械_。固体培养基：大多由无机营养成分、固体培养基：大多由无机营养成分、_、激素、琼脂四部分组成。、激素、琼脂四部分组成。光照：光照：_阶段不需要光照。阶段不需要光照。激素调控：培养基中激素调控：培养基中_和和_的比例调控组织培养进程。的比例调控组织培养进程。(4)实例：菊花的组织培养过程实例：菊花的组织培养过程选材：一般选择选材：一般选择_植株的茎上部新生的侧枝。植株的
4、茎上部新生的侧枝。培培养养基基：常常用用_，其其主主要要成成分分有有大大量量元元素素、微微量量元元素素、有有机机物物，常常需需要要添加添加_。灭菌灭菌消毒消毒有机营养成分有机营养成分脱分化脱分化生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素未开花未开花MS培养基培养基植物激素植物激素实验操作过程实验操作过程70%酒精酒精无菌水无菌水酒精灯火焰酒精灯火焰火火焰灼烧焰灼烧无菌箱无菌箱4.植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术(1)概概念念：将将_的的植植物物体体细细胞胞，在在一一定定条条件件下下融融合合成成_，并并把把杂杂种种细细胞培育成胞培育成_的技术。的技术。(2)原原理理：体体细细胞胞杂杂交交利利用用了了细
5、细胞胞膜膜的的_，杂杂种种细细胞胞培培育育成成杂杂种种植植株株利利用用了了植植物细胞的物细胞的_。不同种不同种杂种细胞杂种细胞新的植物体新的植物体流动性流动性全能性全能性(3)过程过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的意义：克服不同种生物远缘杂交的_性。性。纤维素酶和果胶纤维素酶和果胶物理物理PEG细胞壁细胞壁不亲和不亲和5.植物细胞工程的实际应用植物细胞工程的实际应用(1)植物繁殖的新途径植物繁殖的新途径微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。作物脱毒技术：选取作物作物脱毒技术：选取作物_(如茎尖如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的
6、技术。进行组织培养，获得脱毒苗的技术。遗传特性遗传特性无毒组织无毒组织人人工工种种子子：以以植植物物组组织织培培养养得得到到的的_、不不定定芽芽、顶顶芽芽和和腋腋芽芽等等为为材材料料，经经过人工薄膜包装得到的种子。过人工薄膜包装得到的种子。胚状体胚状体(2)作物新品种的培育作物新品种的培育单倍体育种单倍体育种a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。c.优优点点：后后代代不不发发生生性性状状分分离离，都都是是_，能能够够稳稳定定遗遗传传，明明显显_。单倍体幼苗单倍体幼苗纯合子纯合子纯合子纯合子缩短了育种年限缩短了育种年限突突变变体体的的利利用用
7、：在在植植物物组组织织培培养养过过程程中中，由由于于培培养养细细胞胞一一直直处处于于不不断断的的分分生生状状态态，因因此此容容易易受受到到培培养养条条件件和和外外界界压压力力(如如射射线线、化化学学物物质质等等)的的影影响响而而发发生生突突变变。从从这这些些产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体，进而培育成产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体，进而培育成_。(3)细胞产物的工厂化生产细胞产物的工厂化生产细胞产物：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等细胞产物：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等培养阶段：培养阶段：_阶段阶段技术基础：植物组织培养技术技术基础：植物组织培养技
8、术新品种新品种愈伤组织愈伤组织1.植物组织培养的关键植物组织培养的关键(1)条件：离体，一定营养物质，激素条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素)等。等。(2)培养基状态：固体培养基培养基状态：固体培养基(需再分化生根培养基及生芽培养基需再分化生根培养基及生芽培养基)(3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。(4)光照的应用光照的应用脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。2.植物激素在植物组织培养中的
9、作用植物激素在植物组织培养中的作用生长素生长素/细胞分裂素的比值细胞分裂素的比值作用效果作用效果比值高时比值高时促进根分化、抑制芽形成促进根分化、抑制芽形成比值低时比值低时促进芽分化、抑制根形成促进芽分化、抑制根形成比值适中比值适中促进愈伤组织形成促进愈伤组织形成3.杂种植物遗传物质的变化杂种植物遗传物质的变化(1)遗遗传传特特性性：杂杂种种植植株株中中含含有有两两种种植植物物的的遗遗传传物物质质，故故杂杂种种植植株株具具备备两两种种植植物物的的遗遗传特性。传特性。(2)染色体组数染色体组数染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。植植物物体体细细胞胞
10、杂杂交交形形成成的的杂杂种种植植株株，有有几几个个染染色色体体组组就就称称为为几几倍倍体体，属属于于异异源源多多倍倍体，变异类型属于染色体变异。体，变异类型属于染色体变异。若若一一植植物物细细胞胞含含有有2x条条染染色色体体，2个个染染色色体体组组，基基因因型型为为Aabb，另另一一植植物物细细胞胞含含有有2y条条染染色色体体，2个个染染色色体体组组，基基因因型型为为ccDd，则则新新植植株株应应为为异异源源四四倍倍体体，其其体体细细胞胞中染色体为中染色体为(2x2y)条，条，4个染色体组，基因型为个染色体组，基因型为AabbccDd。(1)(人教版人教版选修三修三P36“小知小知识”)固体培
11、养基大多数都是由无机营养成分、固体培养基大多数都是由无机营养成分、_、激素、琼脂四部分组成。、激素、琼脂四部分组成。(2)(人人教教版版选修修三三P40“小小知知识”)化化学学诱诱变变一一般般是是利利用用一一些些化化学学诱诱变变剂剂进进行行处处理理。常常见见的的有有甲甲基基磺磺酸酸乙乙酯酯(EMS)和和叠叠氮氮化化钠钠(SA)等等。物物理理诱诱变变一一般般采采用用电电离离辐辐射射处处理理。电电离辐射主要包括离辐射主要包括射线、射线、射线、中子等。射线、中子等。有机营养有机营养成分成分1.(20184月月浙浙江江选考考节选)取取田田间间不不同同品品种种水水稻稻的的幼幼胚胚，先先进进行行，然然后后
12、接接种种到到培培养养基基中中培培养养，幼幼胚胚发发生生形形成成愈愈伤伤组组织织，并并进进行行继继代代培培养养。用用含含重重组组质质粒粒的的农农杆杆菌菌侵侵染染愈愈伤伤组组织织，再再培培养养愈愈伤伤组组织织，以以便便获获得得抗抗虫虫的的转转基基因因水水稻稻。影影响响愈愈伤伤组组织织能能否否成成功功再再生生出出植植株株的的因因素素有有：培培养养条条件件如如光光、温温度度、培培养养基基配配方方如如植植物物激激素配比、以及素配比、以及_(答出答出2点即可点即可)。解解析析不不同同种种类植植物物或或同同种种植植物物的的不不同同基基因因型型个个体体之之间存存在在遗传的的差差异异，细胞胞全全能能性性的的表表
13、达达程程度度大大小小不不同同，小小麦麦水水稻稻等等作作物物在在多多次次继代代培培养养后后，会会丧失失细胞胞全全能能性性的的表达能力。表达能力。答案答案消毒脱分化水稻的基因型、愈伤组织继代的次数消毒脱分化水稻的基因型、愈伤组织继代的次数2.(2017海海南南卷卷，31)甲甲、乙乙两两名名同同学学分分别别以以某某种种植植物物的的绿绿色色叶叶片片和和白白色色花花瓣瓣为为材材料料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：(1)以以该该植植物物的的绿绿色色叶叶片片和和白白色色花花瓣瓣作作为为外外植植体体，在在一一定定条条件件下下进进行行组组织织培培养养
14、，均均能能获得试管苗，其原理是获得试管苗，其原理是_。(2)甲甲、乙乙同同学学在在诱诱导导愈愈伤伤组组织织所所用用的的培培养养基基中中，均均加加入入一一定定量量的的蔗蔗糖糖，蔗蔗糖糖水水解解后后可得到可得到。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是(填填“具有完整的细胞核具有完整的细胞核”“具有叶绿体具有叶绿体”或或“已转入抗性基因已转入抗性基因”)。(3)图图中中A、B、C所所示示的的是是不不同同的的培培养养结结果果，该该不不同同结结果果的的出出现现主主要要是是由由于于培培养养基基中中两两种种激激素素用用量量的的不不同
15、同造造成成的的，这这两两种种激激素素是是。A中中的的愈愈伤组织是叶肉细胞经伤组织是叶肉细胞经形成的。形成的。(4)若若该该种种植植物物是是一一种种杂杂合合子子的的名名贵贵花花卉卉，要要快快速速获获得得与与原原植植株株基基因因型型和和表表现现型型都都相相同同的的该该种种花花卉卉，可可用用组组织织培培养养方方法法繁繁殖殖，在在培培养养时时，(填填“能能”或或“不不能能”)采采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是_。解解析析(1)利利用用绿色色叶叶片片和和白白色色花花瓣瓣作作为外外植植体体，进行行组织培培养养的的原原理理是是高高度度分分化化了了的的植物
16、植物细胞仍具有全能性。胞仍具有全能性。(2)蔗蔗糖糖属属于于二二糖糖，其其单位位是是一一分分子子果果糖糖和和一一分分子子葡葡萄萄糖糖，具具有有完完整整细胞胞核核的的植植物物细胞胞才具有全能性。才具有全能性。(3)在在组织培培养养过程程中中，常常需需要要添添加加的的两两种种植植物物激激素素为细胞胞分分裂裂素素和和生生长素素，由由叶叶肉肉细胞形成愈胞形成愈伤组织的的过程程为脱分化。脱分化。(4)杂合合子子经减减数数分分裂裂形形成成不不同同基基因因型型的的花花粉粉，若若用用花花粉粉离离体体培培养养，所所得得到到的的个个体体基基因因型与原植株不同。型与原植株不同。答案答案(1)绿色叶片和白色花瓣的细胞
17、具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的细胞核葡萄糖、果糖具有完整的细胞核(3)细胞分裂素、生长素脱分化细胞分裂素、生长素脱分化(4)不不能能对对杂杂合合子子的的植植株株来来说说，其其体体细细胞胞的的基基因因型型相相同同，而而花花粉粉粒粒的的基基因因型型与与体体细细胞胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株1.动物细胞培养动物细胞培养(1)地位：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、地位：动物细
18、胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、_等。其中等。其中_是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。考点二动物细胞工程考点二动物细胞工程动物细动物细胞融合胞融合动物细胞培养动物细胞培养(2)培养过程培养过程胰蛋白酶胰蛋白酶原代培养原代培养二氧化碳二氧化碳培养箱培养箱胰蛋白酶胰蛋白酶传代传代(3)培养条件培养条件营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入_等一些天然成分。等一些天然成分。适宜的温度：适宜的温度：36.50.5；适宜的；适宜的pH：7.27.4。抗生素抗生素培养液培
19、养液血清、血清、血浆血浆细胞代谢细胞代谢2.动物体细胞克隆技术动物体细胞克隆技术(核移植技术核移植技术)(1)原理：原理：_。(2)核移植分类：核移植分类：_移植和体细胞核移植。移植和体细胞核移植。(3)核移植过程核移植过程(以克隆高产奶牛为例以克隆高产奶牛为例)(4)应应用用：加加速速家家畜畜_进进程程，促促进进优优良良畜畜群群繁繁育育。保保护护_。生产医用蛋白。生产医用蛋白。作为异种移植的供体。作为异种移植的供体。用于组织器官的移植。用于组织器官的移植。动物细胞核具有全能性动物细胞核具有全能性胚胎细胞核胚胎细胞核细胞融合细胞融合移植移植去核去核遗传改良遗传改良濒危物种濒危物种3.动物细胞融
20、合和单克隆抗体的制备动物细胞融合和单克隆抗体的制备(1)动物细胞融合动物细胞融合原理：原理：_。融合方法：聚乙二醇融合方法：聚乙二醇(PEG)、_、电激等。、电激等。意意义义：突突破破了了_的的局局限限，使使_成成为为可可能能，也也为为制制造造_开辟了新途径。开辟了新途径。细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活的病毒灭活的病毒有性杂交方法有性杂交方法远缘杂交远缘杂交单克隆抗体单克隆抗体(2)单克隆抗体单克隆抗体制备过程制备过程优点：特异性强、优点：特异性强、_，并可大量制备。，并可大量制备。用途：作为用途：作为_；用于治疗疾病和；用于治疗疾病和_。杂交瘤细胞杂交瘤细胞能产生所需抗体能产生所需抗体灵敏
21、度高灵敏度高诊断试剂诊断试剂运载药物运载药物4.胚胎干细胞胚胎干细胞(ES或或EK细胞细胞)(1)来源：来源：_。(2)特特点点：形形态态上上，体体积积小小、细细胞胞核核大大、核核仁仁明明显显；功功能能上上，具具有有_；体外培养条件下可以体外培养条件下可以_。(3)培养过程培养过程早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺发育的全能性发育的全能性增殖而不分化增殖而不分化(4)应用应用治疗人类的某些顽症治疗人类的某些顽症培育人造组织器官培育人造组织器官研究体外细胞分化的理想材料研究体外细胞分化的理想材料1.动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较项目项目动物细胞培养动物
22、细胞培养动物体细胞核移植动物体细胞核移植原理原理细胞增殖细胞增殖动物细胞核的全能性动物细胞核的全能性过程过程结果结果获得细胞群获得细胞群获得与供体遗传物质基本相同的个体获得与供体遗传物质基本相同的个体2.核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同的核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同的3个原因个原因克克隆隆动动物物细细胞胞质质基基因因来来源源于于另另一一个个亲亲本本，与与植植物物组组织织培培养养不不同同(来来自自一一个个亲亲本本)，即即克克隆隆动动物物遗遗传传物物质质来来自自两两个个亲亲本本。在在发发育育过过程程中中可可能能发发生生基基因因突突变变、染染色色体体变变异异导致性状改
23、变。导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。1.(人教版人教版选修三修三P37、P52拓展拓展)动物细胞融合和植物体细胞杂交有何不同？动物细胞融合和植物体细胞杂交有何不同？提提示示主主要要有有三三点点不不同同：融融合合前前的的处理理不不同同：植植物物体体细胞胞杂交交用用纤维素素酶和和果果胶胶酶去掉去掉细胞壁，制胞壁，制备原生原生质体才能融合，而体才能融合，而动物物细胞可以直接融合。胞可以直接融合。诱导方式不同：方式不同：动物物细胞融合特有的胞融合特有的诱导方式是用方式是用灭活的病毒活的病毒处理。理。目目的的不不同同：植植物物体体细胞胞杂交交的的
24、目目的的是是为了了培培育育杂种种植植株株，动物物细胞胞融融合合只只是是为了了获得得杂种种细胞。胞。2.(人教版人教版选修三修三P48图221)动物体细胞核移植技术为何选用去核卵动物体细胞核移植技术为何选用去核卵(母母)细胞？细胞？提提示示此此类细胞胞体体积大大，易易于于操操作作；卵卵黄黄多多，可可为发育育提提供供充充足足的的营养养；卵卵母母细胞的胞的细胞胞质中存在激中存在激发细胞核全能性表达的物胞核全能性表达的物质。1.(2018全国卷全国卷，38)生物生物选修选修3：现代生物科技专题：现代生物科技专题2018年年细细胞胞期期刊刊报报道道，中中国国科科学学家家率率先先成成功功地地应应用用体体细
25、细胞胞对对非非人人灵灵长长类类动动物物进进行克隆，获得两只克隆猴行克隆，获得两只克隆猴“中中中中”和和“华华华华”。回答下列问题：。回答下列问题：(1)“中中中中”和和“华华华华”的的获获得得涉涉及及核核移移植植过过程程，核核移移植植是是指指。通通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目_(填填“减半减半”“”“加倍加倍”或或“不变不变”)。(2)哺哺乳乳动动物物的的核核移移植植可可以以分分为为胚胚胎胎细细胞胞核核移移植植和和体体细细胞胞核核移移植植，胚胚胎胎细细胞胞核核移移植植获获得得克克隆隆动动物物的的
26、难难度度 (填填“大大于于”或或“小小于于”)体体细细胞胞核核移移植植，其其原原因因是是 。(3)在在哺哺乳乳动动物物核核移移植植的的过过程程中中，若若分分别别以以雌雌性性个个体体和和雄雄性性个个体体的的体体细细胞胞作作为为核核供供体体，通通常常，所所得得到到的的两两个个克克隆隆动动物物体体细细胞胞的的常常染染色色体体数数目目(填填“相相同同”或或“不不同同”)，性染色体组合，性染色体组合(填填“相同相同”或或“不同不同”)。解解析析(1)动物物核核移移植植是是将将动物物的的一一个个细胞胞的的细胞胞核核，移移入入一一个个已已经去去掉掉细胞胞核核的的卵卵母母细胞胞中中，使使其其重重组并并发育育成
27、成一一个个新新的的胚胚胎胎，这个个新新的的胚胚胎胎最最终发育育为动物物个个体体。用用核核移移植植的的方方法法得得到到的的动物物称称为克克隆隆动物物，与与核核供供体体相相比比，其其细胞胞的的染染色色体体数数目目不不变。(2)由由于于动物物胚胚胎胎细胞胞分分化化程程度度低低，恢恢复复其其全全能能性性相相对容容易易，而而动物物体体细胞胞分分化化程程度度高高，恢恢复复其其全全能能性性十十分分困困难，所所以以，胚胚胎胎细胞胞核核移移植植获得得克克隆隆动物物的的难度度明明显低低于于体体细胞胞核核移移植植。(3)哺哺乳乳动物物雌雌性性和和雄雄性性个个体体的的体体细胞胞中中常常染染色色体体数数目目相相同同，所
28、所以以分分别以以雌雌性性和和雄雄性性个个体体的的体体细胞胞为供供体体，克克隆隆动物物体体细胞胞的的常常染染色色体体数数目目相相同同，但但其其性性染染色色体体组合不同。合不同。答案答案(1)将动物的一个细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变将动物的一个细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变(2)小于胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易小于胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易(3)相同不同相同不同2.(2018山山东重重点点高高中中模模拟)抗抗人人T淋淋巴巴细细胞胞CD3抗抗原原单单克克隆隆抗抗体体主主要要用用于于治治疗疗和和预预防防肾肾脏等器官移植病人的急性排斥反应。如图是该抗体
29、的研发和生产流程。请回答：脏等器官移植病人的急性排斥反应。如图是该抗体的研发和生产流程。请回答：(1)图中甲是图中甲是细胞，乙是细胞，乙是细胞。细胞。(2)过过程程需需要要加加入入诱诱导导细细胞胞融融合合，之之后后需需用用特特定定的的选选择择性性培培养养基基进进行行第第一一次次筛筛选选，目目的的是是除除去去其其他他细细胞胞，保保留留细细胞胞。经经上上述述筛筛选选获获得得的的细细胞胞产产生生的的抗抗体体还还不不是是单单克克隆隆抗抗体体，这这是是因因为为。经经克克隆隆化化培培养养后后，利利用用抗抗体体能能与与分分子子特特异异性性结结合合的的原原理理，再再次次筛筛选选得得到到能能分分泌泌所所需需抗体
30、的细胞。抗体的细胞。(3)表表示示将将丁丁细细胞胞注注射射到到小小鼠鼠内内，之之后后从从相相应应液液体体中中提提取取该该单单克克隆隆抗抗体体。该该单单克克隆隆抗抗体体能能够够治治疗疗和和预预防防器器官官移移植植时时的的排排斥斥反反应应，这这(填填“能能”或或“不不能能”)证明免疫排斥主要是细胞免疫引起的。证明免疫排斥主要是细胞免疫引起的。解解析析(1)要要获得得抗抗人人T淋淋巴巴细胞胞CD3抗抗原原单克克隆隆抗抗体体，需需要要向向小小鼠鼠体体内内注注射射的的抗抗原原是是人人T淋淋巴巴细胞胞；从从小小鼠鼠体体内内提提取取的的是是在在接接受受特特定定抗抗原原(人人T淋淋巴巴细胞胞)刺刺激激后后形形
31、成成的的B淋淋巴巴细胞胞。(2)动物物细胞胞融融合合的的诱导物物是是聚聚乙乙二二醇醇(PEG)或或灭活活的的病病毒毒，诱导细胞胞融融合合之之后后需需用用特特定定的的选择性性培培养养基基进行行第第一一次次筛选，目目的的是是在在除除去去其其他他细胞胞的的同同时保保留留杂交交瘤瘤细胞胞。经第第一一次次筛选获得得的的细胞胞产生生的的抗抗体体还不不是是单克克隆隆抗抗体体，这是是因因为从从小小鼠鼠脾脾脏内内提提取取的的B淋淋巴巴细胞胞不不止止一一种种。经克克隆隆化化培培养养后后，利利用用该抗抗体体能能与与CD3分分子子特特异异性性结合合的的原原理理，再再次次筛选得得到到能能分分泌泌所所需需抗抗体体的的细胞
32、胞。(3)表表示示将将丁丁细胞胞注注射射到到小小鼠鼠腹腹腔腔内内。该单克克隆隆抗抗体体能能够治治疗和和预防防器器官官移移植植时的的排排斥斥反反应，这不不能能证明明免免疫疫排排斥斥主主要要是是细胞免疫引起的，因胞免疫引起的，因为体液免疫和体液免疫和细胞免疫胞免疫过程中都有程中都有T淋巴淋巴细胞的参与。胞的参与。答案答案(1)人人T淋巴淋巴(必须答出必须答出“人人”和和“T淋巴淋巴”)B淋巴淋巴(2)聚聚乙乙二二醇醇(PEG或或灭灭活活的的病病毒毒)杂杂交交瘤瘤从从小小鼠鼠脾脾脏脏内内提提取取的的B淋淋巴巴细细胞胞不不止止一一种种(杂交瘤细胞不止一种杂交瘤细胞不止一种)CD3(3)腹腔不能腹腔不能
33、澄清易错易混澄清易错易混强化科学思维强化科学思维易错易混易错易混易错点易错点1不清楚植物脱毒苗培养时选材要求及原理不清楚植物脱毒苗培养时选材要求及原理点点拨拨由由于于植植物物分分生生区区附附近近(如如茎茎尖尖)的的病病毒毒极极少少，所所以以常常采采用用茎茎尖尖利利用用组织培培养养技技术获得脱毒苗。得脱毒苗。易错点易错点2对植物组织培养的目的和人工种子的实质理解不透对植物组织培养的目的和人工种子的实质理解不透点点拨拨(1)组织培培养养的的目目的的不不同同，培培养养的的阶段段不不同同。如如：生生产细胞胞代代谢产物物，只只需需培培养养至至愈愈伤组织时期期；生生产人人工工种种子子，则需需要要培培养养至
34、至胚胚状状体体时期期；获得得植植株株就就需需培培养养至至幼幼苗苗时期期。(2)人人工工种种子子是是通通过无无性性生生殖殖(植植物物体体细胞胞的的组织培培养养技技术)形形成成的的，只只有一个有一个亲本的性状；自然种子是有性生殖的本的性状；自然种子是有性生殖的产物，具有两个物，具有两个亲本的性状。本的性状。易错点易错点3不清楚动物细胞培养时，为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶不清楚动物细胞培养时，为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶点点拨拨进行行动物物细胞胞传代代培培养养时用用胰胰蛋蛋白白酶分分散散细胞胞，说明明细胞胞间的的物物质主主要要是是蛋蛋白白质。分分散散细胞胞时不不能能用用胃胃蛋蛋白白酶，因因为
35、胃胃蛋蛋白白酶作作用用的的适适宜宜pH约为1.8。胰胰蛋蛋白白酶作作用的适宜用的适宜pH为7.27.8，而多数，而多数动物物细胞培养的适宜胞培养的适宜pH为7.27.4。易错点易错点4混淆原代培养与传代培养混淆原代培养与传代培养点拨点拨(1)原代培养：原代培养：细胞胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养。胞培养。(2)传代代培培养养：原原代代培培养养的的细胞胞生生长、繁繁殖殖一一定定时间后后，由由于于空空间不不足足或或细胞胞密密度度过大大导致致接接触触抑抑制制影影响响细胞胞的的生生长，因因此此需需要要重重新新用用胰胰蛋蛋白白酶等等处理理，进行行
36、分分瓶瓶扩大大培养，即培养，即传代培养。代培养。易易错错点点5不不清清楚楚动动物物细细胞胞克克隆隆化化培培养养时时为为何何常常选选10代代以以内内的的细细胞胞，而而“瘤瘤细细胞胞”却却为为“50代以后代以后”点拨点拨取供体取供体动物的体物的体细胞培养，一般胞培养，一般选用用传至至10代以内的代以内的细胞，因胞，因为10代以内的代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体了供体细胞正常的胞正常的遗传基基础。然而欲。然而欲获得得“无限增殖无限增殖”的的“瘤瘤细胞胞”则往往在往往在“50代以后代以后”，其，其遗传物物质已已发生生变化，具化，具“癌癌变”特性。特性
37、。如如图图1是是利利用用植植物物组组织织培培养养技技术术培培育育脱脱毒毒草草莓莓苗苗的的过过程程，如如图图2是是动动物物细细胞胞培培养养的的基基本本过程示意图。请据图回答：过程示意图。请据图回答：规范答题规范答题图1图2(1)外植体能够形成幼苗所依据的原理是外植体能够形成幼苗所依据的原理是_。培育脱毒苗时，一般选取培育脱毒苗时，一般选取作为外植体，其依据是作为外植体，其依据是_。(2)是脱分化过程，细胞脱分化是指已经分化的细胞，经过诱导后，失去其是脱分化过程，细胞脱分化是指已经分化的细胞，经过诱导后，失去其_而转变为未分化细胞的过程。而转变为未分化细胞的过程。是是过程。过程。(3)容容器器A中
38、中的的动动物物器器官官或或组组织织首首先先要要进进行行的的处处理理是是剪剪碎碎，然然后后用用酶酶处处理理，这这是是为为了了使使细细胞胞分分散散开开来来，这这样样做做的的目目的的是是_。(4)培培养养首首先先在在B瓶瓶中中进进行行，瓶瓶中中的的培培养养液液成成分分有有等等。在在此此瓶瓶中中培培养养一一段段时时间间后后，有有许许多多细细胞胞衰衰老老死死亡亡，这这是是培培养养到到第第代代了了，到到这这时时的的培养称为培养称为。(5)在在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是_。答卷采样答卷采样错因分析错因分析对脱毒菌的原理不清楚对脱毒菌的原理不清楚正确答案：正确答案：_对胃蛋白酶和胰蛋白酶的适宜对胃蛋白酶和胰蛋白酶的适宜pH不清楚不清楚正确答案：正确答案：_对传代培养与原代培养分辨不清对传代培养与原代培养分辨不清正确答案：正确答案：_该部位病毒极少，甚至无病毒该部位病毒极少，甚至无病毒胰蛋白胰蛋白原代培养原代培养