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1、保健食品毒理学安全性评价北京大学医学部北京大学医学部周宗灿周宗灿反应停thalidomide安全性安全性是首先关注的问题（审批制）保健食品（审批制）：非自愿风险药品：自愿风险有效性一。毒理学基础毒理学（toxicology）从生物医学角度研究化学物质对生物机体的损害作用及其机制的科学。任何一种化学物在一定条件下都可能是对机体产生任有害作用。毒理学描述毒理学、机制毒理学、管理毒理学（法规毒理学）毒作用谱：系统毒性；致突变；致畸；致癌剂量轴低30100高 人NOEL阈LOELNOAEL阈LOAELMTDLD50功能长期毒性急期毒性100%*50*153060NOAELLOAELmg/kg阈毒作用剂
2、量反应关系描述毒理学试验的基本原则化学物在实验动物产生的作用，可以外推于人。实验动物必须暴露于高剂量，这是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物和人可能的暴露途径是基本的选择。检测和评价人拟用剂量100倍药物A30倍毒性作用药物B毒性BA无毒性毒性作用安全性AB作用毒性评价试验的基本目的 受试物毒作用的表现和性质 剂量-反应(效应)研究 确定毒作用的靶器官 确定损害的可逆性 实验动物物种选择对受试物在代谢、生化和毒理学特征与人最接近的物种；选择自然寿命不太长的物种；易于饲养和实验操作的物种；经济并易于获得的物种。常规选择物种的方式是利用两个物种，一种是啮齿类
3、，另一种是非啮齿类。系统毒性研究最常用的啮齿类是大鼠和小鼠，非啮齿类是狗。物种选择急性毒性试验常用 大鼠、小鼠、狗亚慢性、慢性毒性试验常用 大鼠、狗皮肤刺激试验和致敏试验常用 豚鼠皮肤刺激试验和眼刺激试验常用 兔遗传毒理学试验多用 小鼠致畸试验常用 大鼠、小鼠和兔致癌试验常用 大鼠和小鼠迟发性神经毒性试验常用 母鸡染毒途径 毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮途径。溶剂和赋型剂染毒前根据染毒途径的不同，应将受试物制备成一定的剂型。常用的是制备成水溶液、油溶液或混悬液。对溶剂和助溶剂的要求是：所用的溶剂或助溶剂应该是无毒或实际无毒
4、与受试物不起反应，受试物在溶液中应稳定；与受试物的毒动学和毒效学无显著影响；无特殊刺激性或气味。溶剂和赋型剂对水溶性受试物，体内试验首选的溶剂为水（经口染毒）和等渗盐水（胃肠道外染毒）。水不溶性受试物应溶于或悬浮于适当的有机溶剂中。混悬液最常用的赋形剂为0.5%羧甲基纤维素钠或10%阿拉伯树胶。受试物溶液应新鲜配制，除非已证明贮存稳定。美国药剂协会（1986）推荐的常用溶剂和赋型剂1。丙酮（Acetone）；2羧甲基纤维素（Carboxylmethylcellulose，CMC）；3玉米油（Cornoil）；4 二 甲 基 甲 酰 胺（N,N-dimethylformamide,DMFO）；5
5、二甲基亚砜（Dimethylsulfoxide,DMSO）；6乙醇（Ethanol）7（Glycerol）甘油；8阿拉伯胶（GumArabic）；9乳糖（Lactose）；10甲基纤维素（Methylcellulose）11甲基乙基酮，丁酮（Methylethylketone，MEK）；12凡士林油（Mineraloil；liquidpetrolatum）；13橄榄油（Oliveoil）；14花生油（peanutoil/Arachisoil）15 凡 士 林（Petrolatum/Vaseline/petroleumJelly）；16 聚 乙 二 醇-400（PolyethyleneGlyco
6、l-400，PEG400）；17生理盐水（Saline）；18吐温80（Tween80）；19水（Water）（黄色示可用于经口）一般推荐的染毒最大容积（1）经口20ml/kg（对空腹动物）；（2）经皮2ml/kg（根据体表面积计算，限于染毒的准确性）；（3）静脉1ml/kg（5分钟以上）；（4）肌肉注射0.5ml/kg（一个部位）；（5）每眼0.01ml；（6）直肠0.5ml/kg；（7）阴道：大鼠0.2ml,兔1ml；（8）吸入2mg/L；（9）鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。安全系数不确定系数不确定系数100倍物种间差异10倍个体间差异10倍毒效学毒动学毒效学毒动学100.4100.6100
7、.5100.5(2.5)(4.0)(3.2)(3.2)二。保健食品安全性毒理学评价规范（2003）保健食品安全性毒理学评价规范保健食品安全性毒理学评价规范（2003）食品卫生法、保健食品管理办法的要求保健食品卫生法、保健食品管理办法的要求保健食品必须符合食品卫生要求，对人体不产生食品必须符合食品卫生要求，对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害。任何急性、亚急性或慢性危害。第一部分：毒理学评价程序第一部分：毒理学评价程序第二部分：毒理学检验方法第二部分：毒理学检验方法 主题内容与适用范围主题内容与适用范围对受试物的要求对受试物的要求 对受试物处理的要求对受试物处理的要求保健食品安全性毒理学评价试
8、验的四个阶段和内容保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容不同保健食品选择毒性试验的原则要求不同保健食品选择毒性试验的原则要求 保健食品安全性毒理学评价试验的目的和结果判定保健食品安全性毒理学评价试验的目的和结果判定保健食品毒理学安全性评价时应考虑的问题保健食品毒理学安全性评价时应考虑的问题第一部分：毒理学评价程序第一部分：毒理学评价程序 一、主题内容与适用范围一、主题内容与适用范围本本程程序序规规定定了了保保健健食食品品安安全全性性毒毒理理学评价的统一规程。学评价的统一规程。本本程程序序适适用用于于保保健健食食品品的的安安全全性性评评价。价。二、对受试物的要求二、对受试物的要求以以单单一
9、一已已知知化化学学成成分分为为原原料料的的受受试试物物；含含有有多多种原料的配方产品。种原料的配方产品。提提供供原原料料来来源源、生生产产工工艺艺、推推荐荐人人体体摄摄入入量量、使用说明书等有关资料。使用说明书等有关资料。受受试试物物应应是是符符合合既既定定配配方方和和生生产产工工艺艺的的规规格格化化产产品品，其其组组成成成成分分、比比例例及及纯纯度度应应与与实实际际产产品品相同。相同。三、对受试物处理的要求三、对受试物处理的要求介质的选择介质的选择人的可能摄入量较大的受试物处理人的可能摄入量较大的受试物处理袋泡茶类受试物的处理袋泡茶类受试物的处理膨胀系数较高的受试物处理膨胀系数较高的受试物处
10、理液体保健食品浓缩液体保健食品浓缩含乙醇的保健食品含乙醇的保健食品含有人体必需营养素等物质的保健食品含有人体必需营养素等物质的保健食品益生菌等微生物类保健食品益生菌等微生物类保健食品以鸡蛋等食品为载体的特殊保健食品以鸡蛋等食品为载体的特殊保健食品卫法监发卫法监发200251号文件号文件1.关于进一步规范保健食品原料管理的通关于进一步规范保健食品原料管理的通知（卫法监发知（卫法监发200251号）号）对保健食品涉及的各种原料物质的管对保健食品涉及的各种原料物质的管理与安全性评价作了详细规定，将原料分理与安全性评价作了详细规定，将原料分为三类：为三类：药食同源（附件药食同源（附件1）、）、可用于保
11、健食品（附件可用于保健食品（附件2）、）、禁用于保健食品（附件禁用于保健食品（附件3）。）。通知的主要内容通知的主要内容申报保健食品中涉及的物品（或原料）是我国新申报保健食品中涉及的物品（或原料）是我国新研制、新发现、新引进的无食用习惯或仅在个别研制、新发现、新引进的无食用习惯或仅在个别地区有食用习惯的，按照新资源食品卫生管理地区有食用习惯的，按照新资源食品卫生管理办法的有关规定执行。办法的有关规定执行。申报保健食品中涉及食品添加剂的，按照食品申报保健食品中涉及食品添加剂的，按照食品添加剂卫生管理办法的有关规定执行。添加剂卫生管理办法的有关规定执行。申报保健食品中涉及真菌、益生菌等物品（或原申
12、报保健食品中涉及真菌、益生菌等物品（或原料）的，按照我部印发的卫生部关于印发真菌料）的，按照我部印发的卫生部关于印发真菌类和益生菌类保健食品评审规定的通知（卫法类和益生菌类保健食品评审规定的通知（卫法监发监发200184号）执行。号）执行。丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小蓟、山药、山楂、丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小蓟、山药、山楂、马齿苋、乌梢蛇、乌梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉马齿苋、乌梢蛇、乌梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龙眼肉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龙眼肉（桂圆）、决明子、百合、肉豆蔻、肉桂、余甘子、（桂圆）、决明子、百合、肉豆蔻、肉
13、桂、余甘子、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蛎、芡实、花椒、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蛎、芡实、花椒、赤小豆、阿胶、鸡内金、麦芽、昆布、枣（大枣、酸赤小豆、阿胶、鸡内金、麦芽、昆布、枣（大枣、酸枣、黑枣）、罗汉果、郁李仁、金银花、青果、鱼腥枣、黑枣）、罗汉果、郁李仁、金银花、青果、鱼腥草、姜（生姜、干姜）、枳子、枸杞子、栀子、砂仁、草、姜（生姜、干姜）、枳子、枸杞子、栀子、砂仁、胖大海、茯苓、香橼、香薷、桃仁、桑叶、桑椹、桔胖大海、茯苓、香橼、香薷、桃仁、桑叶、桑椹、桔红、桔梗、益智仁、荷叶、莱菔子、莲子、高良姜、红、桔梗、益智仁、荷叶、莱菔子、莲子、高良姜、淡竹叶、淡豆豉、菊花、菊苣、黄芥
14、子、黄精、紫苏、淡竹叶、淡豆豉、菊花、菊苣、黄芥子、黄精、紫苏、紫苏籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公紫苏籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公英、蜂蜜、榧子、酸枣仁、鲜白茅根、鲜芦根、蝮蛇、英、蜂蜜、榧子、酸枣仁、鲜白茅根、鲜芦根、蝮蛇、橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香。橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香。87附件附件1 既是食品又是药品的物品名单既是食品又是药品的物品名单人参、人参叶、人参果、三七、土茯苓、大蓟、女贞子、山人参、人参叶、人参果、三七、土茯苓、大蓟、女贞子、山茱萸、川牛膝、川贝母、川芎、马鹿胎、马鹿茸、马鹿骨、茱萸、川牛膝、川贝母、川芎、马鹿胎、马鹿茸、
15、马鹿骨、丹参、五加皮、五味子、升麻、天门冬、天麻、太子参、巴丹参、五加皮、五味子、升麻、天门冬、天麻、太子参、巴戟天、木香、木贼、牛蒡子、牛蒡根、车前子、车前草、北戟天、木香、木贼、牛蒡子、牛蒡根、车前子、车前草、北沙参、平贝母、玄参、生地黄、生何首乌、白及、白术、白沙参、平贝母、玄参、生地黄、生何首乌、白及、白术、白芍、白豆蔻、石决明、石斛（需提供可使用证明）、地骨皮、芍、白豆蔻、石决明、石斛（需提供可使用证明）、地骨皮、当归、竹茹、红花、红景天、西洋参、吴茱萸、怀牛膝、杜当归、竹茹、红花、红景天、西洋参、吴茱萸、怀牛膝、杜仲、杜仲叶、沙苑子、牡丹皮、芦荟、苍术、补骨脂、诃子、仲、杜仲叶、沙
16、苑子、牡丹皮、芦荟、苍术、补骨脂、诃子、赤芍、远志、麦门冬、龟甲、佩兰、侧柏叶、制大黄、制何赤芍、远志、麦门冬、龟甲、佩兰、侧柏叶、制大黄、制何首乌、刺五加、刺玫果、泽兰、泽泻、玫瑰花、玫瑰茄、知首乌、刺五加、刺玫果、泽兰、泽泻、玫瑰花、玫瑰茄、知母、罗布麻、苦丁茶、金荞麦、金樱子、青皮、厚朴、厚朴母、罗布麻、苦丁茶、金荞麦、金樱子、青皮、厚朴、厚朴花、姜黄、枳壳、枳实、柏子仁、珍珠、绞股蓝、胡芦巴、花、姜黄、枳壳、枳实、柏子仁、珍珠、绞股蓝、胡芦巴、茜草、荜茇、韭菜子、首乌藤、香附、骨碎补、党参、桑白茜草、荜茇、韭菜子、首乌藤、香附、骨碎补、党参、桑白皮、桑枝、浙贝母、益母草、积雪草、淫羊藿
17、、菟丝子、野皮、桑枝、浙贝母、益母草、积雪草、淫羊藿、菟丝子、野菊花、银杏叶、黄芪、湖北贝母、番泻叶、蛤蚧、越橘、槐菊花、银杏叶、黄芪、湖北贝母、番泻叶、蛤蚧、越橘、槐实、蒲黄、蒺藜、蜂胶、酸角、墨旱莲、熟大黄、熟地黄、实、蒲黄、蒺藜、蜂胶、酸角、墨旱莲、熟大黄、熟地黄、鳖甲。鳖甲。114 附件附件2 可用于保健食品的物品名单可用于保健食品的物品名单 八角莲、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、八角莲、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、川乌、广防己、马桑叶、马钱子、六角莲、天仙川乌、广防己、马桑叶、马钱子、六角莲、天仙子、巴豆、水银、长春花、甘遂、生天南星、生子、巴豆、水银、长春花、甘遂、生天南
18、星、生半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、关木半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、关木通、农吉痢、夹竹桃、朱砂、米壳（罂粟壳）、通、农吉痢、夹竹桃、朱砂、米壳（罂粟壳）、红升丹、红豆杉、红茴香、红粉、羊角拗、羊踯红升丹、红豆杉、红茴香、红粉、羊角拗、羊踯躅、丽江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、躅、丽江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、闹羊花、青娘虫、鱼藤、洋地黄、洋金花、牵牛闹羊花、青娘虫、鱼藤、洋地黄、洋金花、牵牛子、砒石（白砒、红砒、砒霜）、草乌、香加皮子、砒石（白砒、红砒、砒霜）、草乌、香加皮（杠柳皮）、骆驼蓬、鬼臼、莽草、铁棒槌、铃（杠柳皮）、骆驼蓬、鬼臼、莽草、铁棒槌、铃兰、雪
19、上一枝蒿、黄花夹竹桃、斑蝥、硫磺、雄兰、雪上一枝蒿、黄花夹竹桃、斑蝥、硫磺、雄黄、雷公藤、颠茄、藜芦、蟾酥。黄、雷公藤、颠茄、藜芦、蟾酥。59附件附件3 保健食品禁用物品名单保健食品禁用物品名单保健食品原料保健食品原料药食同源（附件药食同源（附件1）可用于保健食品（附件可用于保健食品（附件2）？禁用于保健食品（附件禁用于保健食品（附件3）。）。以以普普通通食食品品、卫卫生生部部规规定定的的药药食食同同源源物物质质和和允允许许用用作作保保健健食食品品的的物物质质以以外外的的动动植植物物或或动动植植物物提提取取物物、微微生生物物、化化学学合合成成物物为为原原料料生生产产的的保保健健食食品品，应应对
20、对该该原原料料和和用用该该原原料料生生产产的的保保健健食食品品分分别别进进行行安安全全性性评价。评价。该原料原则上按以下四种情况确定试验内容。该原料原则上按以下四种情况确定试验内容。用用该该原原料料生生产产的的保保健健食食品品原原则则上上须须进进行行第第一一、二二阶阶段的毒性试验，必要时进行下一阶段的毒性试验。段的毒性试验，必要时进行下一阶段的毒性试验。？国国内内外外均均无无食食用用历历史史的的原原料料或或成成分分:四四个个阶阶段段的的毒毒性性试验。试验。仅仅在在国国外外少少数数国国家家或或国国内内局局部部地地区区有有食食用用历历史史的的原原料料或或成成分分，第第一一、二二、三三阶阶段段的的毒
21、毒性性试试验验，必必要要时时进行第四阶段毒性试验。进行第四阶段毒性试验。未未发发现现有有毒毒或或毒毒性性甚甚微微以以及及较较大大数数量量人人群群有有长长期期食食用用历历史史，第第一一、二二阶阶段段的的毒毒性性试试验验，必必要要时时第第三三阶阶段毒性试验。段毒性试验。国国际际组组织织已已对对其其进进行行过过系系统统的的毒毒理理学学安安全全性性评评价价，先先进进行行第第一一、二二阶阶段段毒毒性性试试验验。必必要要时时第第三三阶阶段段毒毒性试验。性试验。在在国国外外多多个个国国家家广广泛泛食食用用的的原原料料，进进行行第第一一、二二阶阶段段毒毒性性试试验验，根根据据试试验验结结果果决决定定是是否否进
22、进行行下下一一阶阶段段毒性试验。毒性试验。不同保健食品选择毒性试验原则不同保健食品选择毒性试验原则2.益生菌类及真菌类保健食品评审规定益生菌类及真菌类保健食品评审规定 益生菌类及真菌类保健食品必须安全可益生菌类及真菌类保健食品必须安全可靠，即食用安全，无不良反应；生产用菌种靠，即食用安全，无不良反应；生产用菌种的生物学、遗传学、功效学特性明确和稳定；的生物学、遗传学、功效学特性明确和稳定；可用于保健食品的益生菌及真菌类菌种名单可用于保健食品的益生菌及真菌类菌种名单由卫生部公布。由卫生部公布。菌种来源及国内外安全食用资料，菌种的安全性评价菌种来源及国内外安全食用资料，菌种的安全性评价资料资料(包
23、括毒力试验包括毒力试验)，对经过驯化、诱变的菌种，应，对经过驯化、诱变的菌种，应提供驯化、诱变的方法及驯化剂、诱变剂等资料。提供驯化、诱变的方法及驯化剂、诱变剂等资料。菌种及其代谢产物必须无毒无害，不得在生产用培养菌种及其代谢产物必须无毒无害，不得在生产用培养基内加入有毒有害物质和致敏性物质。基内加入有毒有害物质和致敏性物质。抗生素和真菌的检测。抗生素和真菌的检测。在发酵过程中不得加入具有功效成分的动植物及其它在发酵过程中不得加入具有功效成分的动植物及其它物质。物质。益生菌的主种子传代不超过益生菌的主种子传代不超过10代，工作种子传代不得代，工作种子传代不得超过超过5代。代。经过基因修饰的菌种
24、不得用于保健食品。经过基因修饰的菌种不得用于保健食品。益生菌类及真菌类益生菌类及真菌类可用于保健食品的可用于保健食品的真菌菌种名单真菌菌种名单可用于保健食品的可用于保健食品的益生菌菌种名单益生菌菌种名单酿酒酵母酿酒酵母两岐双岐杆菌两岐双岐杆菌 产朊假丝酵母产朊假丝酵母婴儿双岐杆菌婴儿双岐杆菌乳酸克鲁维酵母乳酸克鲁维酵母长双岐杆菌长双岐杆菌 卡氏酵母卡氏酵母 短双岐杆菌短双岐杆菌 蝙蝠蛾拟青霉蝙蝠蛾拟青霉青春双岐杆菌青春双岐杆菌 蝙蝠蛾被毛孢蝙蝠蛾被毛孢保加利亚乳杆菌保加利亚乳杆菌 灵芝灵芝嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌紫芝紫芝 干酪乳杆菌干酪亚种干酪乳杆菌干酪亚种松杉灵芝松杉灵芝嗜热链球菌嗜热链球菌 红
25、曲霉红曲霉 紫红曲霉紫红曲霉 益生菌、真菌菌种名单益生菌、真菌菌种名单以酶制剂等为原料的保健食品评审规定以酶制剂等为原料的保健食品评审规定卫法监发卫法监发2002100号号可用于保健食品的可用于保健食品的真菌菌种名单真菌菌种名单可用于保健食品的可用于保健食品的益生菌菌种名单益生菌菌种名单酿酒酵母酿酒酵母两岐双岐杆菌两岐双岐杆菌 产朊假丝酵母产朊假丝酵母婴儿双岐杆菌婴儿双岐杆菌乳酸克鲁维酵母乳酸克鲁维酵母长双岐杆菌长双岐杆菌 卡氏酵母卡氏酵母 短双岐杆菌短双岐杆菌 蝙蝠蛾拟青霉蝙蝠蛾拟青霉青春双岐杆菌青春双岐杆菌 蝙蝠蛾被毛孢蝙蝠蛾被毛孢保加利亚乳杆菌保加利亚乳杆菌 灵芝灵芝嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌
26、紫芝紫芝 干酪乳杆菌干酪亚种干酪乳杆菌干酪亚种松杉灵芝松杉灵芝嗜热链球菌嗜热链球菌 红曲霉红曲霉 紫红曲霉紫红曲霉 酶制剂酶制剂.菌种来源及卫生部认定的检定单位出具的菌种检定报告；菌种来源及卫生部认定的检定单位出具的菌种检定报告；.菌种的毒力试验报告；菌种的毒力试验报告；.菌种的安全性评价报告；菌种的安全性评价报告；.国内外该菌种使用于食品生产的文献资料；国内外该菌种使用于食品生产的文献资料；.发酵终产物的质量标准（包括纯度、杂质成分及含量）。发酵终产物的质量标准（包括纯度、杂质成分及含量）。以酶制剂等为原料的保健食品评审规定以酶制剂等为原料的保健食品评审规定卫法监发卫法监发2002100号号
27、 .提供明确的产品化学结构式、物理化学性提供明确的产品化学结构式、物理化学性质，配质，配体与金属离子之比、游离元素和总体与金属离子之比、游离元素和总元素之比；元素之比；.提供氨基酸螯合物定性、定量的检测方法提供氨基酸螯合物定性、定量的检测方法（包括（包括原料和产品）以及卫生部认定的检原料和产品）以及卫生部认定的检验机构出具的验机构出具的验证报告；验证报告；.毒理学安全评价资料毒理学安全评价资料.国内外该氨基酸螯合物用于食品生产的文国内外该氨基酸螯合物用于食品生产的文献资料。献资料。氨基酸螯合物氨基酸螯合物4.对申报某些保健功能的食品进行检测的兴奋剂对申报某些保健功能的食品进行检测的兴奋剂主要有
28、七大类：主要有七大类：雄性激素雄性激素(类固醇类固醇)、麻醉剂麻醉剂(可待因、杜冷丁等可待因、杜冷丁等)、-2受体阻断剂受体阻断剂(心得安、心得舒等心得安、心得舒等)、中枢神经系统兴奋剂中枢神经系统兴奋剂(士的宁、芬氟拉明、麻黄素、咖啡士的宁、芬氟拉明、麻黄素、咖啡因等因等)、利尿剂利尿剂(速尿、利尿酸、安体舒通等速尿、利尿酸、安体舒通等)、-激动剂激动剂(瘦肉精等瘦肉精等)、肽类激素肽类激素(生长激素、红细胞生成素等生长激素、红细胞生成素等)。兴奋剂检测兴奋剂检测第二部分：毒理学评价方法第二部分：毒理学评价方法四、试验的四个阶段和内容四、试验的四个阶段和内容第一阶段：急性毒性试验第一阶段：急
29、性毒性试验第第二二阶阶段段：遗遗传传毒毒性性试试验验，30天天喂喂养养试试验验，传统致畸试验传统致畸试验 第第三三阶阶段段：亚亚慢慢性性毒毒性性试试验验：90天天喂喂养养试试验、繁殖试验、代谢试验验、繁殖试验、代谢试验第四阶段：慢性毒性试验（包括致癌试验）第四阶段：慢性毒性试验（包括致癌试验）遗传毒性试验：遗传毒性试验：Ames试验试验或或V79/HGPRT基因突变试验基因突变试验TK基因突变试验基因突变试验骨骨髓髓细细胞胞微微核核试试验验或或哺哺乳乳动动物物骨骨髓髓细细胞胞染染色色体体畸变试验畸变试验小鼠精子畸形分析小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析或睾丸染色体畸变分析其其它它备备选选遗遗
30、传传毒毒性性试试验验：显显性性致致死死试试验验、果果蝇蝇伴性隐性致死试验、非程序性伴性隐性致死试验、非程序性DNA合成实验合成实验选择毒理学试验的原则要求以以卫卫生生部部规规定定允允许许用用于于保保健健食食品品的的动动植植物物 或或 动动 植植 物物 提提 取取 物物（卫卫 法法 监监 发发200251号号附附件件2）或或微微生生物物（卫卫法法监监发发200184号号附附件件2和和5）为为原原料料生生产产的的保保健健食食品品，应应进进行行急急性性毒毒性性试试验验、三三项项致致突突变变试试验验和和30天天喂喂养养试试验验，必必要要时时进行传统致畸试验和第三阶段毒性试验。进行传统致畸试验和第三阶段
31、毒性试验。选择毒理学试验的原则要求普普普普通通通通食食食食品品品品和和和和卫卫生生部部规规定定的的药药食食同同源源物物质质（卫卫法法监监发发200251号附件号附件1）以以传传统统工工艺艺生生产产且且食食用用方方式式与与传传统统食食用用方方式式相相同同的的保保健食品，一般不要求进行毒性实验。健食品，一般不要求进行毒性实验。用用水水提提物物配配制制生生产产的的保保健健食食品品，如如服服用用量量为为常常规规用用量量，一一般般不不要要求求进进行行毒毒性性试试验验。如如服服用用量量大大于于常常规规用用量量时时，需需进进行行急急性性毒毒性性试试验验、三三项项致致突突变变试试验验和和30天天喂喂养养试试验
32、，必要时进行传统致畸试验。验，必要时进行传统致畸试验。用用水水提提以以外外的的工工艺艺生生产产的的保保健健食食品品，服服用用量量为为常常规规用用量量时时，应应进进行行急急性性毒毒性性试试验验、三三项项致致突突变变试试验验。如如服服用用量量大大于于常常规规用用量量时时，需需增增加加30天天喂喂养养试试验验，必必要要时时进行传统致畸试验和第三阶段毒性试验。进行传统致畸试验和第三阶段毒性试验。选择毒理学试验的原则要求营养补充剂营养补充剂用用已已列列入入营营养养强强化化剂剂名名单单的的营营养养素素的的化化合合物物为为原原料料生生产产的的保保健健食食品品，如如其其原原料料来来源源、生生产产工工艺艺和和产
33、产品品质质量量均均符符合合国国家家有关要求，一般不要求进行毒性试验。有关要求，一般不要求进行毒性试验。三。毒理学试验 各项毒理学试验结果的判定各项毒理学试验结果的判定急性毒性试验急性毒性试验如如LDLD5050小小于于人人的的可可能能摄摄入入量量的的100100倍倍，则则放放弃弃该该受受试试物物用用于于保保健健食食品品。如如LDLD5050大大于于或或等等于于100100倍倍者者，则则可考虑进入下一阶段毒理学试验。可考虑进入下一阶段毒理学试验。如如动动物物未未出出现现死死亡亡的的剂剂量量大大于于或或等等于于10g/kgBW10g/kgBW（涵涵盖盖人人体体推推荐荐量量的的100100倍倍），则
34、则可可进进入入下下一一阶阶段毒理学试验。段毒理学试验。对对人人的的可可能能摄摄入入量量较较大大和和其其它它一一些些特特殊殊原原料料的的保保健健食食品品，按按最最大大耐耐受受量量法法给给予予最最大大剂剂量量动动物物未未出出现死亡，也可进入下一阶段毒理学试验。现死亡，也可进入下一阶段毒理学试验。遗传毒性试验结果的判定遗传毒性试验结果的判定三三项项试试验验,体体外外或或体体内内有有一一项项或或以以上上试试验验阳性，放弃该受试物用于保健食品。阳性，放弃该受试物用于保健食品。如如三三项项试试验验均均为为阴阴性性，则则进进入入下下一一步步的的毒性试验。毒性试验。3.303.30天喂养试验天喂养试验最最大大
35、未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量大大于于或或等等于于人人的的可可能能摄摄入入量量的的100100倍倍，可可进进行行安安全全性性评评价。价。特特殊殊原原料料：在在最最大大灌灌胃胃剂剂量量组组或或在在饲饲料料中中的的最最大大掺掺入入量量剂剂量量组组未未发发现现有有毒毒性性作作用用，可可进进行行安安全全性性评评价价 至至少少大大于于或或等等于于人人的的可能摄入量的可能摄入量的7070倍倍。特殊功能的保健食品应进行具体分析。特殊功能的保健食品应进行具体分析。长期毒性试验外观亚慢性、慢性生长发育(体重)毒性试验体液行为过程中血液学毒性体征血清生化学活杀解剖尿分析最终体重脏器湿重器官/组织生物学标
36、志脏/体比酶固定/染色内源性成分组织病理学胆汁、尿大鼠致畸试验雄鼠雌鼠阴栓（天）孕07染毒 1620处死检查活胎、吸收胎、早死胎、晚死胎大鼠外观畸形骨骼畸形内脏畸形 4.致畸试验结果的判定致畸试验结果的判定 以以LDLD5050或或3030天天喂喂养养实实验验的的最最大大未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量设设计计的的受受试试物物各各剂剂量量组组，如如果果在在任任何何一一个个剂剂量量组组观观察察到到受受试试物物的的致致畸畸作作用用，则则应应放放弃弃该该受受试试物物用用于于保保健健食食品品，如如果果观观察察到到有有胚胚胎胎毒毒性性作作用用，则应进行进一步的繁殖试验。则应进行进一步的繁殖试验。
37、其它毒理学试验其它毒理学试验 5.905.90天喂养实验天喂养实验 最最大大未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量大大于于人人的的可可能能摄摄入入量量的的100100倍倍进进行安全性评价。行安全性评价。国内外均无食用历史的原料或成分：国内外均无食用历史的原料或成分：最最大大未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量小小于于或或等等于于人人的的可可能能摄摄入入量量的的100100倍者表示毒性较强，应放弃该受试物用于保健食品。倍者表示毒性较强，应放弃该受试物用于保健食品。国外少数国家或国内局部地区有食用历史的原料或成分：国外少数国家或国内局部地区有食用历史的原料或成分：最最大大未未观观察察到到有有
38、害害作作用用剂剂量量大大于于100100倍倍而而小小于于300300倍倍者者，应应进行慢性毒性试验。进行慢性毒性试验。大大于于或或等等于于300300倍倍者者则则不不必必进进行行慢慢性性毒毒性性试试验验，可可进进行行安安全性评价。全性评价。其它毒理学试验其它毒理学试验 6.6.慢性毒性：慢性毒性：最最大大未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量小小于于或或等等于于人人的的可可能能摄摄入入量量的的5050倍倍者者，表表示示毒毒性性较较强强，应应放放弃弃该该受受试试物用于保健食品。物用于保健食品。未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量大大于于5050倍倍而而小小于于100100倍倍者者，经经安安
39、全全性性评评价价后后，决决定定该该受受试试物物是是否否可可用用于于保保健健食品。食品。最最大大未未观观察察到到有有害害作作用用剂剂量量大大于于或或等等于于100100倍倍者者，则可考虑允许用于保健食品。则可考虑允许用于保健食品。其它毒理学试验其它毒理学试验 7.7.致癌试验致癌试验根根据据致致癌癌试试验验所所得得的的肿肿瘤瘤发发生生率率、潜潜伏伏期期和和多多发发性性等进行致癌试验判定的原则是：等进行致癌试验判定的原则是：肿瘤只发生在试验组动物，对照组中无肿瘤发生。肿瘤只发生在试验组动物，对照组中无肿瘤发生。试试验验组组与与对对照照组组动动物物均均发发生生肿肿瘤瘤，但但试试验验组组发发生生率率高
40、。高。试试验验组组动动物物中中多多发发性性肿肿瘤瘤明明显显，对对照照组组中中无无多多发发性性肿瘤，或只是少数动物有多发性肿瘤。肿瘤，或只是少数动物有多发性肿瘤。试试验验组组与与对对照照组组动动物物肿肿瘤瘤发发生生率率虽虽无无明明显显差差异异，但但试验组中发生时间较早。试验组中发生时间较早。安全性评价考虑的因素安全性评价考虑的因素试验指标的统计学意义和生物学意义：试验指标的统计学意义和生物学意义：生理作用与毒性作用：生理作用与毒性作用：时间时间-毒性效应关系：毒性效应关系：特殊人群和敏感人群：特殊人群和敏感人群：人的可能摄入量较大的保健食品：人的可能摄入量较大的保健食品：含乙醇的保健食品：含乙醇
41、的保健食品：动物年龄对试验结果的影响动物年龄对试验结果的影响安全系数安全系数 人体资料人体资料 综合评价综合评价 保健食品安全性的重新评价：必要时保健食品安全性的重新评价：必要时四、安全评价工作中的有关问题四、安全评价工作中的有关问题1.原料的安全性是建立在长期食用、药用的经验的原料的安全性是建立在长期食用、药用的经验的基础上，系统的全面的毒理学研究资料尚不完整，基础上，系统的全面的毒理学研究资料尚不完整，尤其是改变了传统的食用方式时。其安全性应高尤其是改变了传统的食用方式时。其安全性应高度关注。应度关注。应注重原料的安全评估注重原料的安全评估，特别是三致和，特别是三致和慢性毒性。慢性毒性。2
42、.加强原料中有害成分的鉴定与毒性研究。加强原料中有害成分的鉴定与毒性研究。3.对配伍模式进行毒性研究。对配伍模式进行毒性研究。4.有益作用与有害作用的权衡与判定。有益作用与有害作用的权衡与判定。5.方法学问题方法学问题保健食品含有功效成分，采用一套方法难保健食品含有功效成分，采用一套方法难以评价结构和功能不同的物质，传统的毒以评价结构和功能不同的物质，传统的毒理学安全评价指标有一定局限性，保健食理学安全评价指标有一定局限性，保健食品的安全评价应引入个案评估的原则，了品的安全评价应引入个案评估的原则，了解其作用的机制将有助于安全评价。解其作用的机制将有助于安全评价。安全系数安全系数化学物：化学物
43、：纯度清楚，没有特别的营养价纯度清楚，没有特别的营养价值，人群暴露量较低，确定对健康不良值，人群暴露量较低，确定对健康不良影响采用给予动物不同剂量水平来估计影响采用给予动物不同剂量水平来估计最大未观察有害作用剂量，从而应用适最大未观察有害作用剂量，从而应用适当的安全系数确定安全摄入量。当的安全系数确定安全摄入量。方法学问题方法学问题整体食物：整体食物：各种化合物的复杂的混合体，各种化合物的复杂的混合体，成份和营养价值变化大，体积大易产生饱成份和营养价值变化大，体积大易产生饱腹，给与动物的量通常只是人体膳食含量腹，给与动物的量通常只是人体膳食含量的几倍，采用的膳食模式是否营养均衡，的几倍，采用的
44、膳食模式是否营养均衡，是否引起营养问题。因为非受试物本身直是否引起营养问题。因为非受试物本身直接引起的不良反应需要避免，因此，采用接引起的不良反应需要避免，因此，采用动物实验来测试整体食物的潜在不良作用动物实验来测试整体食物的潜在不良作用是很困难的。实质等同原则可用于对其进是很困难的。实质等同原则可用于对其进行安全评价。行安全评价。方法学问题方法学问题统计学意义生物学意义无有无有毒理学试验结果的统计学意义和生物学意义 第和第种情况最为常见。统计学意义生物学意义损害效应/非损害效应统计学意义和生物学意义 第种情况是有统计学意义但无生物学意义，此种情况相当见。在判断实验结果的生物学意义时，有无剂量
45、-反应关系是关键。有统计学意义但无生物学意义的情况，更常见的原因是因为实验设计不良所致。第种情况是具有生物学意义但无统计学意义，这可能是因为该事件的发生是极端罕见的。统计学意义和生物学意义在评价毒理学试验结果时，要综合评价实验结果的统计学意义和生物学意义一般来说，具有统计学意义是具有生物学意义的必要条件之一。正确地利用统计学假设检验的结果有助于确定实验结果的生物学关联。判断生物学意义的步骤（1）纵向比较，此参数的改变有无剂量-反应关系。（2）横向比较，此参数的改变是否伴有其它相关参数的改变。（3）与历史性对照比较，同时进行的阴性对照应在历史性对照的均数3SD 范围之内，否则应重新试验。观察值与
46、对照组比较，差别具有统计学显著性（P 0.05；+，P0.05；+，P0.01 剂量组实验1实验2实验3高剂量+LOAEL？中剂量+LOAEL+NOAEL？低剂量NOAEL四。注意点立题主管单位咨询与检验单位协商：原料配方，受试样品（质量、溶解性、样品前处理），申报功能，人拟用量。申报前专家咨询对中药安全性的关注点中药大多为植物，毒性一般低于化学药品。有长期传统药用的经验。人体（人群）使用的经验与动物毒理学安全性评价是互为补充，不能替代。个人经验和个案报告作为因果关系的证据不充分，应发展循证医学。应发展中药药材复方的毒理学研究及安全性数据库。特别是体外毒性筛选和靶器官预测，ADMETox。美国
47、NTP（2000）美国国家毒理学计划（NTP）1500多种在美国上市的草本植物中，其有益作用或有害作用大部分没有经过科学证实。膳食补充剂健康教育法未要求对1994年前上市的草本植物进行安全性评价。FDA负责举证，安全性评价的责任在政府。美国NTP（2000）10种白毛茛：进行生殖毒性发育毒性慢性毒性致癌性研究紫草：具有肝毒性并可致大鼠肝癌和肺癌，进行生殖毒性研究蒲勒酮/胡薄荷酮（欧亚薄荷紫穗薄荷等）：可能具有胚胎毒性，进行生殖毒性慢性毒性致癌性研究银杏：进行神经毒性慢性毒性致癌性研究松果菊：进行免疫毒性亚慢性毒性慢性毒性致癌性研究美国NTP（2000）芦荟：用Tg.AC转基因小鼠进行致癌性研究
48、人参：进行生殖毒性神经毒性慢性毒性致癌性研究卡瓦：进行遗传毒性生殖毒性慢性毒性致癌性研究水飞蓟：进行遗传毒性代谢生殖毒性慢性毒性致癌性研究崖柏酮（洋苏草雪松苦艾）：进行遗传毒性神经毒性生殖毒性慢性毒性致癌性研究TheEnd100083北京学院路38号北京大学医学部公卫学院毒理学系周宗灿电话：（010）82801531办公室13501340721谢谢观看/欢迎下载BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH