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1、目目 录录血常规检查血常规检查目目 录录目目 录录指对外周血中红细胞和白细胞及血小板数量和指对外周血中红细胞和白细胞及血小板数量和质量的化验检查,包括质量的化验检查,包括RBC计数及其平均值计数及其平均值测定、测定、Hb测定、测定、WBC计数及其分类计数计数及其分类计数(DC)、血小板计数及其均值测定,同时)、血小板计数及其均值测定,同时注意观察血涂片中红细胞及白细胞、血小板注意观察血涂片中红细胞及白细胞、血小板形态有无异常,某些情况下应注意观察有无形态有无异常,某些情况下应注意观察有无异常细胞或寄生虫等。异常细胞或寄生虫等。血常规检查血常规检查(bloodroutineexamination
2、)目目 录录人体血液的组成目目 录录一、红细胞一、红细胞目目 录录二、白细胞二、白细胞目目 录录粒细胞(75%)核细胞(5%)淋巴细胞(25%)嗜中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 经过瑞氏染色后的各种白细胞 白细胞的组成白细胞的组成目目 录录三、血小板目目 录录血小板的作用血小板的作用血小板的作用是参与止血和凝血。血小板的作用是参与止血和凝血。在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其完整性;完整性;当血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械
3、性的堵塞当血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用。伤口和生物化学性粘附聚集作用。目目 录录血小板的参考范围正常参考值范围正常参考值范围:100300109个/L血小板的功能血小板的功能参与止血目目 录录手工法检验的过程1、细胞计数(红细胞、白细胞、血小板等血细胞的镜下计数)2 2、定量血红蛋白3 3、白细胞分类(瑞氏染色)4、其它:血细胞比积、红细胞形态、嗜酸球计数等目目 录录实验目的实验目的l掌握红细胞计数的临床意义;掌握红细胞计数的临床意义;l掌握白细胞计数的临床意义;掌握白细胞计数的临床意义;l掌握血小板计数的临床意义;掌握血小板计数的临床意义;l掌握
4、白细胞分类计数的临床意义。掌握白细胞分类计数的临床意义。目目 录录本分析仪采用本分析仪采用库尔特原理(阻抗法)库尔特原理(阻抗法)检测检测白细胞白细胞/嗜碱性粒细胞、红细胞和血小板的嗜碱性粒细胞、红细胞和血小板的数目以及体积分布;数目以及体积分布;采用采用比色法比色法测量血红蛋白浓度;测量血红蛋白浓度;采用采用半导体激光流式细胞技术半导体激光流式细胞技术获得白细胞获得白细胞的四分类统计计数。在此基础之上,分析的四分类统计计数。在此基础之上,分析仪计算出其余参数的结果。仪计算出其余参数的结果。实验原理实验原理目目 录录红细胞红细胞/血小板测量血小板测量库尔特原理(库尔特原理(阻抗法阻抗法):):
5、根据血细胞是电的不良导体的性质,当它通根据血细胞是电的不良导体的性质,当它通过微孔时就引起电阻的变化,将电信号的过微孔时就引起电阻的变化,将电信号的变化检测出来,即可检测到通过微孔的细变化检测出来,即可检测到通过微孔的细胞。胞。目目 录录比色法比色法在比色池中,被稀释的样本加入溶血剂后,在比色池中,被稀释的样本加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,后者与溶红细胞溶解,释放出血红蛋白,后者与溶血剂结合后形成血红蛋白复合物,在比色血剂结合后形成血红蛋白复合物,在比色池的一端让池的一端让LED光管发出中心波长为光管发出中心波长为525nm的单色光照射血红蛋白复合物溶液,的单色光照射血红蛋白复合物
6、溶液,在另一端通过光电管接收透射光在另一端通过光电管接收透射光,并将光强并将光强信号放大后转换为电压信号信号放大后转换为电压信号,通过与比色池通过与比色池中加入样本之前(比色池中只有稀释液)中加入样本之前(比色池中只有稀释液)测得的本底透射光强产生的电压比较,得测得的本底透射光强产生的电压比较,得到样本的血红蛋白浓度。到样本的血红蛋白浓度。目目 录录白细胞测量白细胞测量激光流式细胞技术激光流式细胞技术当一定量的血细胞被吸入并经过特定量的试剂作用后,血当一定量的血细胞被吸入并经过特定量的试剂作用后,血样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中。在稀释液形样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中。在稀释
7、液形成的鞘液包裹下,细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。成的鞘液包裹下,细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区时,血细胞受到激光束的照射,产生的散射光性质与细胞时,血细胞受到激光束的照射,产生的散射光性质与细胞大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散射光反映了细胞的大小,高角前向散射光则反映细胞的内射光反映了细胞的大小,高角前向散射光则反映细胞的内部精细结构和颗粒物质。光电二极管接收这些散射光信号部精细结构和颗粒物质。光电二极管接收这些散
8、射光信号并将其转化为电脉冲,根据采集到的这些电脉冲数据,可并将其转化为电脉冲,根据采集到的这些电脉冲数据,可以得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图,称为散以得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图,称为散点图,横坐标反映细胞的内部复杂度信息,纵坐标反映细点图,横坐标反映细胞的内部复杂度信息,纵坐标反映细胞的体积。胞的体积。从从DIFF通道散点图可得到淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性通道散点图可得到淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞各自占白细胞总数的百分比。粒细胞、中性粒细胞各自占白细胞总数的百分比。目目 录录有关参数有关参数目目 录录指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量指每个红细胞内所含
9、血红蛋白的平均量.MCH=每升血液中血红蛋白量每升血液中血红蛋白量/每升血液中红每升血液中红细胞数细胞数正常值正常值:27-34pg平均红细胞血红蛋白量平均红细胞血红蛋白量(MCH)目目 录录五分类血细胞分析仪;五分类血细胞分析仪;5ml真真 空空 采采 血血 管管(含含 有有K2EDTA抗凝剂抗凝剂);止血带(压脉带);止血带(压脉带);一次性注射器;一次性注射器;医用络合碘;医用络合碘;棉签。棉签。实验用品实验用品目目 录录实验过程实验过程静脉采血静脉采血2ml;目目 录录静脉采血过程静脉采血过程采血部位:采血部位:通常采用肘静脉,当肘静脉不明显时,可采用手背部、手腕、通常采用肘静脉,当肘
10、静脉不明显时,可采用手背部、手腕、腘窝部和外踝部静脉。腘窝部和外踝部静脉。采血步骤:采血步骤:采血者取卧位或坐位,手臂伸直平放在台面枕垫上,暴露穿采血者取卧位或坐位,手臂伸直平放在台面枕垫上,暴露穿刺部位,找好采血静脉后,先用碘酊棉签从内向外顺时针方刺部位,找好采血静脉后,先用碘酊棉签从内向外顺时针方向消毒刺穿皮肤,稍等片刻再用向消毒刺穿皮肤,稍等片刻再用75%的乙醇棉签以同样方式的乙醇棉签以同样方式消毒并擦去碘迹。有采血部位的上方扎上压脉带,紧握拳头,消毒并擦去碘迹。有采血部位的上方扎上压脉带,紧握拳头,使静脉显露。如静脉仍不太明显时,可嘱患者反复伸握拳数使静脉显露。如静脉仍不太明显时,可嘱
11、患者反复伸握拳数次,促使静脉怒张。操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的次,促使静脉怒张。操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端,右手持注射器,使针头斜面和针筒刻度向上,先以皮下端,右手持注射器,使针头斜面和针筒刻度向上,先以皮肤成肤成30的位置迅速刺破皮肤,然后适当降低角度穿破静脉的位置迅速刺破皮肤,然后适当降低角度穿破静脉壁进入静脉腔中,见回血后,将针头顺势深入少许,以免采壁进入静脉腔中,见回血后,将针头顺势深入少许,以免采血时针头滑出,但不可用力深刺,以免穿破静脉造成血肿;血时针头滑出,但不可用力深刺,以免穿破静脉造成血肿;用右手示指将针头固定,左手缓缓抽动注射器内芯,至所需用右手示指将针头
12、固定,左手缓缓抽动注射器内芯,至所需血量后,解开压脉带,嘱患者松拳,用无菌干棉签压住伤口,血量后,解开压脉带,嘱患者松拳,用无菌干棉签压住伤口,拔出针头,取下针头,将血液沿瓶壁缓缓注入事先准备好的拔出针头,取下针头,将血液沿瓶壁缓缓注入事先准备好的抗凝瓶中,轻轻混匀,防止凝固,即为抗凝全血;抗凝瓶中,轻轻混匀,防止凝固,即为抗凝全血;目目 录录吸取样本吸取样本本分析仪支持全血和预稀释模式。本分析仪支持全血和预稀释模式。在全血工作模式下,分析仪将吸取在全血工作模式下,分析仪将吸取20L(CBC+DIFF模式)或模式)或15L(CBC模式)的全血样本。模式)的全血样本。目目 录录全血的操作全血的操
13、作确定操作模式为确定操作模式为“全血全血”模式模式将将K K2 2EDTAEDTA抗凝的静脉血混匀后去抗凝的静脉血混匀后去掉密封上盖掉密封上盖本操作以BC-3000Plus为例,适用于BC-3000、BC-1800系列目目 录录稀释样本稀释样本将样本放到将样本放到采样针采样针下方,下方,按动按动“吸样键吸样键”,待测样本吸,待测样本吸取到主机后被分为两份,在并行的稀释流程中经过不同取到主机后被分为两份,在并行的稀释流程中经过不同的试剂作用,分别形成用于红细胞的试剂作用,分别形成用于红细胞/血小板测量、白细胞血小板测量、白细胞计数计数/血红蛋白测量以及白细胞分类测量的检测样本。血红蛋白测量以及白
14、细胞分类测量的检测样本。目目 录录全血的操作全血的操作仪器开始计数;当仪器做完样本计数后,将结果显示在屏幕上,仪器开始计数;当仪器做完样本计数后,将结果显示在屏幕上,按按“打印打印”键即可打印结果;若结果有异常,需要复核结果。键即可打印结果;若结果有异常,需要复核结果。目目 录录全血的操作全血的操作将样本放到采样针下方,将样本放到采样针下方,按动按动“开始键,开始计数开始键,开始计数当仪器做完样本计数后,当仪器做完样本计数后,将结果显示在屏幕上,将结果显示在屏幕上,按按“打印打印”键即可打印键即可打印结果。结果。若结果有异常,需要复若结果有异常,需要复核结果。核结果。目目 录录计数界面计数界面
15、目目 录录l实验结果与分析实验结果与分析1、实验结果、实验结果2、实验分析、实验分析3、临床意义、临床意义目目 录录红细胞数红细胞数血红蛋白血红蛋白成年男性(成年男性(4.05.5)1012/L120160g/L成年女性(成年女性(3.55.0)1012/L110150g/L新生儿新生儿(6.07.0)1012/L170200g/L正常参考值正常参考值目目 录录RBC及及Hb增多增多一般多次检测成年男性红细胞一般多次检测成年男性红细胞6.01012/L,血红蛋白血红蛋白170g/L成年女性红细胞成年女性红细胞5.51012/L,血红蛋白血红蛋白160g/L单位容积血液中单位容积血液中RBC数及
16、数及Hb量高于参考值高限量高于参考值高限临床意义临床意义目目 录录相对性增多相对性增多因因血血浆浆容容量量使使RBCRBC容容量量,见见于于严严重重呕呕吐吐、腹腹泻泻、出出汗汗、烧烧伤伤、慢慢性性肾肾上上腺腺皮皮质质功功能能减减退退、尿尿崩症、甲亢危象、糖尿病酮症酸中毒等。崩症、甲亢危象、糖尿病酮症酸中毒等。目目 录录1、继发性、继发性RBC增多增多促红素代偿性增加,见于胎儿、新生儿、高原、严重的心促红素代偿性增加,见于胎儿、新生儿、高原、严重的心肺疾患肺疾患 促红素非代偿性增加,促红素非代偿性增加,Epo与某些肿瘤或肾病有关如肾与某些肿瘤或肾病有关如肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、肾上腺皮质腺癌、子
17、宫肌瘤、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、肾上腺皮质腺癌、子宫肌瘤、肾盂积水、多囊肾等。盂积水、多囊肾等。2、真性红细胞增多症,原因未明,真性红细胞增多症,原因未明,RBC持续增多,可达持续增多,可达7-1010 12/L,HB可达可达180-240g/L,血容量、血容量、WBC、血小血小板亦增加。板亦增加。绝对性增多绝对性增多(红细胞增多症红细胞增多症)目目 录录RBC及Hb减少单单位位容容积积循循环环血血液液中中RBC数数、Hb量量及及红红细细胞胞比比积低于参考值低限称为贫血。积低于参考值低限称为贫血。成成年年男男性性血血红红蛋蛋白白 120g/L,成成年年女女性性 110g/L,即可认为有贫血即可
18、认为有贫血.目目 录录临床上根据临床上根据Hb程度将贫血分为程度将贫血分为轻度轻度 HbHb低限低限90g/L 90g/L 中度中度 90-60g/L 90-60g/L 重度重度 60-30g/L60-30g/L极重度极重度 30g/L30g/L目目 录录白细胞的参考范围正常参考值范围正常参考值范围:4.010109个/L白细胞功能白细胞功能保护肌体免受外来侵略(感染)目目 录录临床意义临床意义WBC10109/L称WBC增多;低于4109/L称WBC减少;WBCor,主要受N的影响,WBC在生理或病理情况下均可有变异。目目 录录1.1、中性粒细胞增多、中性粒细胞增多1)生理性N增多:饱餐、激
19、动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高,生理性增多都是过性的,不伴有白细胞质量变化2)病理性N:原因很多,大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类:反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应,动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。因此,增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C,而异常增生性增多为造血组织中原始或幼稚粒C大量增生,释放至外周血中的主要是病理性粒C。1、中性粒细胞(、中性粒细胞(Neutrophil)N是从骨髓中造血干细胞增殖分化而产生的,是从骨髓中造血干细胞增殖分化而产生的,它的生成受多种因素调控它的生成受多种因素调控目目
20、录录反应性增多反应性增多:急性感染或炎症:N最多见原因,尤其化脓性球菌引起的局部炎症或全身性感染,此外,大肠杆菌绿脓杆菌、真菌等,病毒如流行性出血热,乙脑、狂犬病,立克次体如斑诊伤寒,螺旋体如钩体病,梅毒、寄生虫如肺吸虫。增高程度与病原体种类,感染部位和程度以及机体的反应性有关。广泛的组织损伤或坏死,严重外伤、手术、大面积烧伤、心梗、肺梗急性溶血RBC大量破坏导致相对缺氧,以及RBC破坏后的分解产物刺激骨髓贮存池中的粒C释放目目 录录急性失血,可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应,动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。急性中毒恶性肿瘤非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高,以N为主,可能的
21、机制为:a.肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放b.某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子c.恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。异常增生性增多:异常增生性增多:见于粒C白血病如AML、CML,骨髓增殖性疾病。目目 录录1.2、中性粒细胞减少、中性粒细胞减少N1.5109/L称粒C;N0.5109/L称粒缺感染性疾病病毒感染:流感、麻诊、风诊、肝炎细菌:伤寒,严重的细菌感染年老:慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染预后差血液系统疾病非白血性白血病恶性贫血物理化学因素、放射线、核素、毒物、药物单核-巨噬C系统功能亢进,脾亢其它过敏性休克目目 录录2、嗜酸性粒细胞
22、(、嗜酸性粒细胞(Eosinophil)CFU-SCFUEoEosinophilE增殖和成熟程序与N相似,成熟的E在外周血中很少,占全身E总数1%左右,大部在于BM和组织中生理功能主要为吞噬作用,趋化作用目目 录录2.1、嗜酸性粒细胞增多、嗜酸性粒细胞增多变态反应性疾病哮喘荨麻诊药物过敏寄生虫病血吸虫、丝虫、囊虫皮肤病:湿诊剥脱性皮、银屑病血液病:CML、LyphomaE白血病某些急性肿瘤:肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤某些传染病,传染病感染期,E常唯有猩红热急性期E其它,风湿性疾病,垂体前叶功能减退,肾上腺皮质功能减退高E综合征,少见,这组疾病包括肺浸润和E,过敏性肉芽肿,E心内膜炎目目 录录
23、2.2、嗜酸性粒细胞减少、嗜酸性粒细胞减少临床意义较小,长期应用皮质激素后临床意义较小,长期应用皮质激素后目目 录录3、嗜碱性粒细胞、嗜碱性粒细胞-Basophil也是由骨髓干细胞产生,突出的生理功能为参与超敏反应B表面有IgE的Fc受体,与IgE结合即被致敏,再受相应抗原攻击引起颗粒释放反应,颗粒中多种活性物质组胺、肝素、慢反应物质、E趋化因子,pt活化因子等BCML、骨纤、慢性溶血、切脾、B白血病、过敏性疾病、转移癌、糖尿病、某些传染病。B无临床意义目目 录录4、淋巴细胞、淋巴细胞-LymphocyteL来源于骨髓造血干来源于骨髓造血干C,是人体重要的免疫活是人体重要的免疫活性性C,它具有
24、与抗原起特异性反应能力。,它具有与抗原起特异性反应能力。T胸腺依赖淋巴胸腺依赖淋巴C,前体,前体C依赖胸腺发育成熟依赖胸腺发育成熟为有功能活性的为有功能活性的T细胞,参与细胞免疫功能,细胞,参与细胞免疫功能,占血液中占血液中LC50-70%,寿命长,数月至数年。寿命长,数月至数年。B骨髓依赖淋巴骨髓依赖淋巴C,前体前体C通过通过BM发育成熟,发育成熟,参与体液免疫功能,占参与体液免疫功能,占15-30%,寿命短,寿命短4-5天,抗原激活后转化为浆天,抗原激活后转化为浆C。目目 录录4.1、淋巴细胞增多、淋巴细胞增多生理性生理性:儿童,出生:儿童,出生4-6天的可达天的可达50%,4-6岁后逐渐
25、岁后逐渐病理性病理性:感染性疾病,病毒、麻诊、风诊、肝炎、传单感染性疾病,病毒、麻诊、风诊、肝炎、传单淋巴细胞白血病、淋巴瘤淋巴细胞白血病、淋巴瘤急性传染病恢复期急性传染病恢复期组织移植的排斥反应组织移植的排斥反应GVHD:移植物抗宿主反应移植物抗宿主反应目目 录录4.2、淋巴细胞减少、淋巴细胞减少应用肾上腺皮质激素、烷化剂、ATG、放射线、免疫缺陷病等4.3、异型淋巴细胞、异型淋巴细胞外周血有时可见到一种形态变异的不典型淋巴C,正常偶见,2%,可能由T受抗原刺激转化而来增高:病毒感染,如传单药物过敏输血、血透后其它免疫性疾病,放疗后目目 录录成熟的单核C在血液中仅逗留1-3天即逸出血管进入组
26、织或体腔内,转变为巨噬C,形成单核巨噬细胞系统,血液中的单核C在功能上还不成熟,进入组织转变为巨噬细胞,在功能上才趋于成熟,单核巨噬C系统在功能上主要有以下几个方面:诱导免疫反应:吞饮或吞噬可溶性和颗粒性抗原,抗原递呈吞噬和杀灭某些病原体,如病毒、结核菌、病原虫吞噬红细胞和清除损伤组织及死亡细胞:处理衰老及异常RBC、清理炎症反应抗肿瘤活性:激活的巨噬细胞在体外对肿瘤细胞生长有抑制作用对白细胞生成的调节:单核细胞和巨噬细胞可产生集落刺激因子(CSF)5、单核细胞、单核细胞Monocyte目目 录录1、单核细胞增多生理性增多:儿童、新生儿可,达0.09-0.15或更多病理增多(1)某些感染,如疟
27、疾、黑热病、结核病、亚细(2)血液病:单核细胞白血病、粒缺恢复期,恶组,淋巴瘤,MDS等(3)急性传染病或急性感染的恢复期2、单核细胞减少:一般无重要临床意义单核细胞增多与减少的临床意义如下:单核细胞增多与减少的临床意义如下:目目 录录血小板计数血小板计数血小板计数血小板计数(platelet count,PC)是计数单位容积(是计数单位容积(L)周围血液中血小板的数量,可以采用镜下目视法,目周围血液中血小板的数量,可以采用镜下目视法,目前多用自动化血细胞分析仪检测。前多用自动化血细胞分析仪检测。参考值:参考值:(100-300)X 109/L目目 录录临床意义临床意义(一)(一)血小板减少血
28、小板减少PC 100 x109/L 称为血小板减少。1.血小板生成减少或障碍:见于再障、巨幼贫、急性白 血病、放射性损伤、骨髓纤维化晚期等2.血小板破坏或消耗增多:见于ITP、SLE、恶性淋巴瘤、上呼吸道感染、风疹、新生儿血小板减少症、输血后血小 板减少症、DIC、TTP、先天性血小板减少症 3.血小板分布异常:见于脾肿大、血液被稀释(输入大量库 存血或大量血浆)等目目 录录(二)血小板增多(二)血小板增多血小板计数400 x109/L 为血小板增多1.原发性增多:见于骨髓增殖性疾病,如真性红细胞增多症和原发性血小板增多症、骨髓纤维化早期及慢性粒细胞白血病等2.反应性增多:见于急性感染、急性溶血、某些癌症患者,这种增多是轻度的,常500 x109/L.目目 录录按照老师要求正确进行静脉采血;按照老师要求正确进行静脉采血;注意安全:注意安全:试剂有毒!试剂有毒!严格按照规定正确操作、小心使用血细严格按照规定正确操作、小心使用血细胞分析仪。胞分析仪。实验注意事项实验注意事项