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1、遗传学实验遗传学实验果蝇的观察和饲养果蝇的观察和饲养一一 实验目的实验目的1 掌握区分雌雄果蝇的方法。掌握区分雌雄果蝇的方法。2 了解果蝇的几种常见突变体类型。了解果蝇的几种常见突变体类型。3 掌握果蝇的饲养及管理方法，同时掌握果掌握果蝇的饲养及管理方法，同时掌握果蝇的实验处理方法和基本技术（麻醉、接种蝇的实验处理方法和基本技术（麻醉、接种等）。等）。4 掌握果蝇培养基的配制技术。掌握果蝇培养基的配制技术。二二 实验原理实验原理 果蝇，英文俗名果蝇，英文俗名fruit fly或或vinegar fly，广，广泛分布于全球温带及热带气候区。而且由于泛分布于全球温带及热带气候区。而且由于其主要以腐
2、烂的水果为食，因此在人类的栖其主要以腐烂的水果为食，因此在人类的栖息地内如果园、菜市场等地区皆可见其踪迹。息地内如果园、菜市场等地区皆可见其踪迹。目前已发现目前已发现1000个物种的果蝇，大部分的物个物种的果蝇，大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则以种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则以真菌、树叶或花粉为食物。真菌、树叶或花粉为食物。2 果蝇中有许多突变体类型，这些突变体属于形态果蝇中有许多突变体类型，这些突变体属于形态突变，容易观察，是研究遗传学的好材料。突变，容易观察，是研究遗传学的好材料。3 果蝇生活周期的长短和温度关系很密切，一般果蝇生活周期的长短和温度关系很密切，一般在在2
3、025之间生活较好。之间生活较好。三三 实验材料实验材料1 果蝇野生型品系：红眼、灰身、长翅、直刚毛。果蝇野生型品系：红眼、灰身、长翅、直刚毛。2 突变型果蝇：白眼、黑檀体、残翅、卷刚毛、突变型果蝇：白眼、黑檀体、残翅、卷刚毛、黄体等，控制这些突变性状的基因中，黄体等，控制这些突变性状的基因中，w(白眼白眼)、sn(卷刚毛卷刚毛)位于位于1号号(X)染色体上，染色体上，vg(残翅残翅)位于位于2号染色体上，号染色体上，e(黑檀体黑檀体)位于位于3号染色体上。号染色体上。四四 实验药品及器具实验药品及器具1 实验药品实验药品 葡萄糖，蔗糖，琼脂，玉米粉，酵母粉，异丁酸，葡萄糖，蔗糖，琼脂，玉米粉
4、，酵母粉，异丁酸，乙醚。乙醚。2 实验器具实验器具 镊子，白瓷板，麻醉瓶，毛笔，指管，棉塞，高镊子，白瓷板，麻醉瓶，毛笔，指管，棉塞，高压灭菌锅，毛边纸纸插，生化培养箱，显微镜，压灭菌锅，毛边纸纸插，生化培养箱，显微镜，1000ml烧杯，烧杯，1000瓦电炉，石棉网，玻璃棒，移液瓦电炉，石棉网，玻璃棒，移液器器(移液管、吸耳球移液管、吸耳球)，标签纸、硫酸纸。，标签纸、硫酸纸。3 蛹蛹 三龄幼虫从培养基中爬出附在瓶壁上化蛹，蛹呈三龄幼虫从培养基中爬出附在瓶壁上化蛹，蛹呈梭形，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变为深梭形，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变为深褐色，表明将要羽化了。褐色，表明将要羽
5、化了。4 成虫成虫 刚从蛹壳里羽化而出的成虫虫体较长，翅未展刚从蛹壳里羽化而出的成虫虫体较长，翅未展开，体表也未完全几丁质化，呈乳白色半透明状；开，体表也未完全几丁质化，呈乳白色半透明状；虫体体色逐渐加深，变粗短而成椭圆形，双翅伸展。虫体体色逐渐加深，变粗短而成椭圆形，双翅伸展。羽化后的雌蝇一般在羽化后的雌蝇一般在12h以后才有交配能力，以后才有交配能力，2天后开始产卵。天后开始产卵。2 果蝇实验中常用的一些突变品系果蝇实验中常用的一些突变品系 果蝇的麻醉处理果蝇的麻醉处理 在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持
6、安静状态。麻醉方操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：法如下：1 准备一只与培养瓶准备一只与培养瓶(指管指管)口径相同的麻醉瓶，并配以口径相同的麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。脱脂棉塞。2 去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一支手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入一手稳住两瓶，另一支手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。麻醉瓶中。3 滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，约滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，约30s，麻醉瓶内的果蝇，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。即处于麻醉状态。注意不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈注意不能麻醉过度。若蝇翅与
7、蝇体呈45角翘起，表角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。明麻醉过度，不能复苏而死亡。4 将麻醉后的果蝇放在白瓷板上面，用毛笔刷移动检查，将麻醉后的果蝇放在白瓷板上面，用毛笔刷移动检查，根据需要用肉眼或放大镜观察。不再用的果蝇务必倒入根据需要用肉眼或放大镜观察。不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。果蝇的饲养果蝇的饲养1 原种培养应先检查亲本纯度原种培养应先检查亲本纯度 将轻度麻醉的果蝇用毛笔刷刷入倾斜的新培养瓶壁上，将轻度麻醉的果蝇用毛笔刷刷入倾斜的新培养瓶壁上，待其苏醒后再将培养瓶直立，以免果蝇粘附在培养基上不待其苏醒后再将培养瓶直立，以免果蝇粘附在培养基上不能动弹而死亡。能动弹而死亡。2 原种置于原种置于20左右恒温箱中培养左右恒温箱中培养 因培养基中酵母发酵产热，温度稍有上升，温箱温度因培养基中酵母发酵产热，温度稍有上升，温箱温度可稍低于可稍低于18。每。每24周换一次培养基，同时检查原种是周换一次培养基，同时检查原种是否混杂。培养瓶上一定要贴标签。否混杂。培养瓶上一定要贴标签。标明性状、移入日期及操作者姓名。标明性状、移入日期及操作者姓名。