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1、实验四实验四果蝇的性状观察果蝇的性状观察 与饲养管理与饲养管理 生命科学学院生命科学学院 了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。一、实验目的一、实验目的二、实验原理二、实验原理普通果蝇（普通果蝇（Drosophila Drosophila melanogastermelanogaster）为双翅目昆）为双翅目昆虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点：虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点：1.1.生长迅速，生长迅速，每每1212天左右即可完成一个世代；天左右即可完成一个世代；2
2、.2.繁殖能力强，繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵每只受精的雌蝇可以产卵500500个左右，个左右，因此在短时间内即可获得大量的子代因此在短时间内即可获得大量的子代,便于遗传分析；便于遗传分析；3.3.饲养容易，饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；4.4.突变性状多突变性状多达达400400以上以上,且多数是形态变异且多数是形态变异,容易观察。容易观察。三、实验材料三、实验材料野生型果蝇野生型果蝇(灰身、红眼、长翅、直刚毛灰身、红眼、长翅、直刚毛)及几种及几种常见的突变型：如白眼、小翅、卷刚毛、黑檀体常见的突变型：如白眼、小翅、卷刚毛、黑檀体等。等。四、
3、实验器具和药品试剂四、实验器具和药品试剂生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。白糖。五、实验内容和步骤五、实验内容和步骤（一）生活史的观察（一）生活史的观察果蝇的生活史包括卵、果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段。连续的发育阶段。图图1 1 果蝇生活史果蝇生活史F卵：卵：卵
4、白色，长椭圆卵白色，长椭圆形，长约形，长约0.5mm0.5mm，在背，在背面的前端伸出一对触面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。于深陷到食物中去。F幼虫：幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期蜕皮到第三龄期,体长可达体长可达4-5mm4-5mm。在解剖镜下观察可见一端稍尖为头在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导
5、管通向消化道。神经会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。节位于消化道前端的上方。F蛹：蛹：幼虫生活七天左右即化蛹幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色后逐渐硬化，变为深褐色,这就显示即将羽化了。这就显示即将羽化了。F成虫：成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。没
6、有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。蝇的体色成为乌黑色。图图1 1 果蝇生活史果蝇生活史1.1.卵卵 2.2.一龄幼虫一龄幼虫 3.3.二龄幼虫二龄幼虫 4.4.三龄幼虫三龄幼虫 5.5.蛹蛹6.6.成虫成虫(雄雄)7.7.成虫成虫(雌雌)F果蝇生活周期的长短与温度关系密切，果蝇生活周期的长短与温度关系密切，3030以以上时果蝇则将不育并可导致死亡，低温则使它上时果蝇则将不育并可导致死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活
7、力也降低。培养果的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是蝇的最适温度是20-2520-25。10 1510 1520 20 2525 卵卵幼虫幼虫蛹蛹成虫成虫 5757天天 1818天天 1515天天 1212天天用手轻拍果蝇的培养瓶，使果蝇震落瓶底，迅速用手轻拍果蝇的培养瓶，使果蝇震落瓶底，迅速拔去棉塞，并将麻醉瓶与培养瓶的两口相对，培拔去棉塞，并将麻醉瓶与培养瓶的两口相对，培养瓶在下、麻醉瓶在上，并朝向灯光处，双手遮养瓶在下、麻醉瓶在上，并朝向灯光处，双手遮住培养瓶，利用果蝇的趋光性和向上性，将果蝇住培养瓶，利用果蝇的趋光性和向上性，将果蝇引入麻醉瓶；引入麻醉瓶；先在棉签上滴
8、上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果先在棉签上滴上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，将棉塞蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，将棉塞塞住，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉。塞住，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉。（二）果蝇麻醉（二）果蝇麻醉注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈4545度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡；度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡；摇动麻醉瓶，使果蝇震落瓶底，之后立即将果蝇摇动麻醉瓶，使果蝇震落瓶底，之后立即将果蝇倒白瓷板或滤纸上，用毛笔小心拨动观察；倒白瓷板或滤纸上，用毛笔小心拨动观察；检查
9、后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行检查后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行处死。处死。（三）果蝇雌雄性别的鉴别（三）果蝇雌雄性别的鉴别 果蝇有雌雄之分，幼虫期果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易较难区别，成虫期则较易区别：区别：1.1.体型：体型：雌果蝇雌果蝇体型较大，雄果蝇较小；体型较大，雄果蝇较小；2.2.腹部末端：雄性腹部腹部末端：雄性腹部钝圆钝圆，雌性末端末端，雌性末端末端稍尖稍尖；3.3.腹部背面：雌性有明显腹部背面：雌性有明显5 5条黑色条纹，雄性有条黑色条纹，雄性有7 7条，条，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点明显黑点。4.4
10、.腹部腹面：雌性有较明显的腹部腹面：雌性有较明显的7 7个腹片，雄性有个腹片，雄性有5 5个个腹片。腹片。5.5.性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。雄性果蝇的明显标志之一。图图3左：雄性果蝇的左前足左：雄性果蝇的左前足中：跗节基部的性梳中：跗节基部的性梳右：雌果蝇无性梳右：雌果蝇无性梳C、基节、基节TR、转节、转节F、腿节、腿节TI、胫节、胫节TA、跗节、跗节（四）果蝇培养基（四）果蝇培养基果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以果蝇在水果摊或
11、果园里常可见到，但它并不是以水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。料。配方水/ml琼脂/g蔗糖/g玉米粉/g丙酸/ml酵母粉/g1801.513100.50.52100110100.50.5F按配方称量各成分；按配方称量各成分；F用用2/32/3的水将琼脂调匀，加热熔化；的水将琼脂调匀，加热熔化；F加入蔗糖使溶解；加入蔗糖使溶解；F用用1/31/3的水将玉米粉调成糊状，倒入上液中，不断搅的水将玉米粉调成糊状，倒入上液中，不断搅拌，煮沸至粘稠为止；拌，煮沸至粘稠为
12、止；F为防止培养基长霉，可加为防止培养基长霉，可加2ml2ml丙酸或苯甲酸搅拌均匀丙酸或苯甲酸搅拌均匀F将培养基倒入灭菌的培养瓶中；将培养基倒入灭菌的培养瓶中；F用棉塞封口，使冷却凝固；用棉塞封口，使冷却凝固；F用前用前1-21-2天，在培养基表面撒少量干酵母粉，使培养天，在培养基表面撒少量干酵母粉，使培养基发酵后即可使用。基发酵后即可使用。v实验室常用的培养基配制方法是：实验室常用的培养基配制方法是：（五）几种常见的突变性状（五）几种常见的突变性状实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。而稳定的。作作业：业：1.1.如何区分果蝇的雌雄如何区分果蝇的雌雄个体？个体？2.2.果蝇麻醉是的注意事果蝇麻醉是的注意事项有哪些？项有哪些？