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1、乙型肝炎病毒标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测概述概述乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒,属于包膜病毒。在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%HBVHBV形态与基因结构形态与基因结构嗜肝嗜肝DNA病毒科病毒科(Hepadnaviridae)电镜：电镜：3 3种形态种形态乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒小球形颗粒 空心包膜，不含核酸管形颗粒 两者均为过剩的病毒外壳，仅含HBsAg，无感染性“空心汤团空心汤团”形态与基因结构形态与基因结构DaneDane颗粒（完整的病毒）形态颗粒（完整的病毒）形态HB
2、sAgHBcAgHBV DNADNAP（外膜蛋白）（外膜蛋白）（核衣壳蛋白）（核衣壳蛋白）HBeAgHBV Viral Genome OrganizationHBsAgHBcAgHBeAg3200 Base Pair GenomeHepatocyte receptor bindng siteHBV DNA PolymeraseProtein that transactivates transcriptional promotors 图图图图4-2 4-2 4-2 4-2 血清中的血清中的血清中的血清中的DaneDaneDaneDane颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外颗粒和外
3、膜颗粒毒粒有双层外颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外 膜膜膜膜(),(),(),(),含核心含核心含核心含核心 （）乙型肝炎病毒（电镜）乙型肝炎病毒（电镜）DANE氏颗粒直径氏颗粒直径42NM 核心直径核心直径27NM 乙肝六项检测乙肝六项检测参考值：ELISA法为阴性 放射免疫分析（RIA）法为阴性HBV抗原抗体系统抗原抗体系统 HBsAg：表面抗原，是HBV的外壳，不含DNA,其本身不具有传染性，但常与HBV同时存在，常被 作为传染性标志之一。是HBV感染的基本标志，也是最早出现的血清学标志之一。HBsAg阳性见于：乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌
4、 注意 HBsAg阴性并不能完全排除HBV感染HBV抗原抗体系统抗原抗体系统抗-HBs：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止 HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。抗-HBs阳性：可提示对乙肝病毒有一定程度的免疫力见于：注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)后，产生的主动或被动免疫。乙型肝炎恢复期，隐性感染的健康人，自身产生了免疫力HBV抗原抗体系统抗原抗体系统HBcAg（核心抗原）：一般情况不易从血清中检测到 游离的HBcAg。HBcAg阳性提示患者血清中有感 染的HBV存在，其含量较多表示复制活跃，传染 性强，预后较差。抗-HBc：非中和抗体，分IgM、IgG和IgA三型抗-HBc IgM
5、：通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提示HBV 复制，是急性感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重要标志 抗-HBc IgG：在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生存在，是既往感染过HBV的指标。HBV抗原抗体系统抗原抗体系统HBeAg阳性：与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早 意义：表示乙肝处于活动期，并有较强的传染性。HBsAg持续阳性可转为慢性或肝硬化。孕妇阳 性可垂直传播。抗-HBe阳性率：慢性乙肝为48%，肝硬化为68.3%，肝 癌为80%在HBeAg消失后出现 表示HBV在体内复制减少或传染 性减弱或消失。乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。血清
6、学检测的临床意义血清学检测的临床意义 HBsAg 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义急性或慢性感染急性或慢性感染(大三阳大三阳)+-+-+乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有有免疫力免疫力乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1 抗体测定概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S1位于HBV病毒颗粒的表面，是乙肝病毒识别肝细胞表面特异性受体的主要成分，是乙肝病毒复制和活动的标志物。参考值：E
7、LISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S1为阴性 抗Pre S1为阴性临床意义：1、非常重要的传染性指标，作为病毒复制的标志较 HBeAg敏感。2、前S1抗原阴转越早、抗Pre S1阳转越早，患者病程 越短、预后越好。乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2 抗体测定概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S2（Pre S2）位于 HBV病毒颗粒的表面蛋白成分，是乙肝病毒侵入肝细 胞的主要结构成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2 抗体是乙肝病毒HBV的中和抗体。参考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S2为阴性 抗Pre S2为阴性临床意义：1、Pre S2为阳性提示HBV复制异常活
8、跃，有传染性。2、抗Pre S2为阳性，见于乙肝急性期及恢复早期，提示HBV已被清除，预后较好。乙型肝炎病毒DNA测定概念：乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈双股环形，是HBV的基因物质，也是乙型肝炎的直接诊断证据。参考值：实时荧光定量PCR法:阴性临床意义：1、HBV-DNA 阳性：是诊断乙肝的佐证，提示HBV复 制及有传染性。2、也用于监测应用HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效 果，若HBV-DNA阳性，表明疫苗阻断效果不佳。乙型肝炎病毒YMDD变异测定概念：YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸）位点是HBV反转录酶的活性部分，属高度保守序列。在HBV的反转录过程中，YMDD位点中的YM能与模板核苷末端糖基相作用，影响寡核苷酸与模板链的结合。参考值：实时荧光定量PCR法、基因芯片分析、焦磷酸测序法和基因克隆与测序法：该位点序列为酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸临床意义：临床意义：YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗病毒药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或缬氨酸（V），就可能引起抗HBV类药物的药效丧失，从而产生耐药性。YMDD测定结果为临床抗HBV类治疗用药提供了实验室诊断依据。结束