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1、乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(bngd)标志物检测标志物检测第一页，共二十一页。概述概述(i sh)乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒,属于(shy)包膜病毒。在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%第二页，共二十一页。HBVHBV形态与基因形态与基因(jyn)(jyn)结构结构嗜肝嗜肝DNA病毒科病毒科(Hepadnaviridae)电镜：电镜：3 3种形态种形态(xngti)(xngti)乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(bngd)(bngd)第三页，共二十一页。小球形颗粒 空心包膜，不含核酸管形
2、颗粒 两者均为过剩的病毒(bngd)外壳，仅含HBsAg，无感染性“空心空心(kng xn)汤汤团团”形态形态(xngti)与基因结构与基因结构第四页，共二十一页。DaneDane颗粒（完整颗粒（完整(wnzhng)(wnzhng)的病毒）形态的病毒）形态HBsAgHBcAgHBV DNADNAP（外膜蛋白）（外膜蛋白）（核衣壳蛋白（核衣壳蛋白(dnbi)）HBeAg第五页，共二十一页。HBV Viral Genome OrganizationHBsAgHBcAgHBeAg3200 Base Pair GenomeHepatocyte receptor bindng siteHBV DNA P
3、olymeraseProtein that transactivates transcriptional promotors第六页，共二十一页。图图图图4-2 4-2 4-2 4-2 血清中的血清中的血清中的血清中的DaneDaneDaneDane颗粒颗粒颗粒颗粒(kl)(kl)(kl)(kl)和外膜颗粒和外膜颗粒和外膜颗粒和外膜颗粒(kl)(kl)(kl)(kl)毒粒有双层毒粒有双层毒粒有双层毒粒有双层外外外外 膜膜膜膜(),(),(),(),含核心含核心含核心含核心 （）第七页，共二十一页。乙型肝炎病毒（电镜）乙型肝炎病毒（电镜）DANE氏颗粒直径氏颗粒直径(zhjng)42NM 核心直径
4、核心直径27NM 第八页，共二十一页。乙肝六项检测乙肝六项检测(jin c)参考值：ELISA法为阴性(ynxng)放射免疫分析（RIA）法为阴性第九页，共二十一页。HBV抗原抗体抗原抗体(kngt)(kngt)系统系统 HBsAg：表面抗原，是HBV的外壳，不含DNA,其本身不具有传染性，但常与HBV同时存在(cnzi)，常被 作为传染性标志之一。是HBV感染的基本标志，也是最早出现的血清学标志之一。HBsAg阳性见于：乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌 注意 HBsAg阴性并不能完全排除HBV感染第十页，共二十一页。HBV抗原抗原(kngyu
5、n)(kngyun)抗体抗体系统系统抗-HBs：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止 HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。抗-HBs阳性：可提示对乙肝病毒有一定(ydng)程度的免疫力见于：注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)后，产生的主动或被动免疫。乙型肝炎恢复期，隐性感染的健康人，自身产生了免疫力第十一页，共二十一页。HBV抗原抗原(kngyun)(kngyun)抗体系抗体系统统HBcAg（核心抗原）：一般情况不易从血清中检测到 游离的HBcAg。HBcAg阳性提示患者血清中有感 染的HBV存在，其含量较多表示复制活跃，传染 性强，预后较差。抗-HBc：非中和抗体，分IgM、IgG和I
6、gA三型抗-HBc IgM：通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提示HBV 复制，是急性(jxng)感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重要标志 抗-HBc IgG：在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生存在，是既往感染过HBV的指标。第十二页，共二十一页。HBV抗原抗体抗原抗体(kngt)(kngt)系系统统HBeAg阳性(yngxng)：与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早 意义：表示乙肝处于活动期，并有较强的传染性。HBsAg持续阳性可转为慢性或肝硬化。孕妇阳 性可垂直传播。抗-HBe阳性率：慢性乙肝为48%，肝硬化为68.3%，肝 癌为80%在HBeAg消失
7、后出现 表示HBV在体内复制减少或传染 性减弱或消失。乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。第十三页，共二十一页。血清学检测血清学检测(jin c)的临床意义的临床意义 HBsAg 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义急性急性(jxng)(jxng)或慢性感染或慢性感染(大三阳大三阳)+-+-+乙肝后期乙肝后期(huq)(huq)或慢性感染或慢性感染(小三小三阳阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免有免疫力疫力第十四页，共
8、二十一页。乙型肝炎病毒表面抗原蛋白(dnbi)前S1和前S1 抗体测定概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S1位于HBV病毒颗粒的表面，是乙肝病毒识别肝细胞表面特异性受体的主要成分，是乙肝病毒复制和活动的标志物。参考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S1为阴性 抗Pre S1为阴性临床意义：1、非常重要的传染性指标，作为(zuwi)病毒复制的标志较 HBeAg敏感。2、前S1抗原阴转越早、抗Pre S1阳转越早，患者病程 越短、预后越好。第十五页，共二十一页。乙型肝炎病毒表面抗原蛋白(dnbi)前S2和前S2 抗体测定概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S2（Pre S2）位于 HBV病毒颗
9、粒的表面蛋白成分，是乙肝病毒侵入肝细 胞的主要结构成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2 抗体是乙肝病毒HBV的中和抗体。参考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S2为阴性 抗Pre S2为阴性临床意义：1、Pre S2为阳性提示(tsh)HBV复制异常活跃，有传染性。2、抗Pre S2为阳性，见于乙肝急性期及恢复早期，提示HBV已被清除，预后较好。第十六页，共二十一页。乙型肝炎病毒(bngd)DNA测定概念：乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈双股环形，是HBV的基因物质，也是乙型肝炎的直接诊断证据(zhngj)。参考值：实时荧光定量PCR法:阴性临床意义：1、HBV-DNA
10、 阳性：是诊断乙肝的佐证，提示HBV复 制及有传染性。2、也用于监测应用HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效 果，若HBV-DNA阳性，表明疫苗阻断效果不佳。第十七页，共二十一页。乙型肝炎病毒(bngd)YMDD变异测定概念：YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸）位点是HBV反转录酶的活性部分，属高度保守序列。在HBV的反转录过程中，YMDD位点中的YM能与模板核苷末端糖基相作用，影响寡核苷酸与模板链的结合。参考值：实时荧光定量PCR法、基因芯片分析(fnx)、焦磷酸测序法和基因克隆与测序法：该位点序列为酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸临床意义：第十八页，共二十一页。临床意义：Y
11、MDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗病毒药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或缬氨酸（V），就可能引起抗HBV类药物的药效丧失，从而产生(chnshng)耐药性。YMDD测定结果为临床抗HBV类治疗用药提供了实验室诊断依据。第十九页，共二十一页。结束(jish)第二十页，共二十一页。内容(nirng)总结乙型肝炎病毒标志物检测。抗-HBs：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止。抗-HBc：非中和抗体，分IgM、IgG和IgA三型。HBeAg阳性：与HBsAg平行出现，较HBsAg消失(xiosh)早。在HBeAg消失(xiosh)后出现 表示HBV在体内复制减少或传染。乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1 抗体测定。2、前S1抗原阴转越早、抗Pre S1阳转越早，患者病程。结束第二十一页，共二十一页。