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1、关于实验探究酵母菌数量变化第1页，讲稿共14张，创作于星期日关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点：酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。优点：直观、快速。优点：直观、快速。优点：直观、快速
2、。优点：直观、快速。适用于稀释的适用于稀释的适用于稀释的适用于稀释的菌悬液（菌悬液（菌悬液（菌悬液（或孢子悬液），即液体培养基或孢子悬液），即液体培养基或孢子悬液），即液体培养基或孢子悬液），即液体培养基中菌体的计数。中菌体的计数。中菌体的计数。中菌体的计数。此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为总菌计数总菌计数总菌计数总菌计数法法法法。第2页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（1 1 1 1）计数工具）计数工具）计数工具）计数工
3、具血球计数板血球计数板血球计数板血球计数板实物图实物图实物图实物图正面图正面图正面图正面图侧面图侧面图侧面图侧面图计数室计数室计数室计数室滴液处滴液处滴液处滴液处血球计数板血球计数板是一种专门是一种专门用于计算较用于计算较大单细胞微大单细胞微生物的一种生物的一种仪器。仪器。计数时，常计数时，常采用采用样方法样方法。第3页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（1 1 1 1）计数工具）计数工具）计数工具）计数工具血球计数板血球计数板血球计数板血球计数板放大后的计数池放大后的计数池放大后的计数池放大后的计数池 每块计数板由每块计数板由每块计数板由每块计数板
4、由H H H H形凹槽分为形凹槽分为形凹槽分为形凹槽分为2 2 2 2个同个同个同个同样的计数池。样的计数池。样的计数池。样的计数池。每个计数池分为每个计数池分为每个计数池分为每个计数池分为9 9 9 9个大方格。个大方格。个大方格。个大方格。第4页，讲稿共14张，创作于星期日25252525个中格个中格个中格个中格16161616个小格个小格个小格个小格16161616个中格个中格个中格个中格25252525个小格个小格个小格个小格25X16=40025X16=40025X16=40025X16=400小格小格小格小格16X25=40016X25=40016X25=40016X25=400小
5、格小格小格小格每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有400400400400小格，总容积为小格，总容积为小格，总容积为小格，总容积为0.1mm0.1mm0.1mm0.1mm3 3 3 3*抽样检测：抽样检测：抽样检测：抽样检测：555516=8016=8016=8016=80个小格个小格个小格个小格抽样检测：抽样检测：抽样检测：抽样检测：444425=10025=10025=10025=100个小格个小格个小格个小格第5页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（2 2 2 2）计算：）计算：）计算
6、：）计算：每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？酵母细胞个数酵母细胞个数酵母细胞个数酵母细胞个数/mL=/mL=/mL=/mL=所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数x400 x10 x400 x10 x400 x10 x400 x104 4 4 4x x x x稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数所数的小方格数所数的小方格数所数的小方格数所数的小方格数第6页，讲稿共14张，创作于星期日例例2:2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个
7、小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。例例1:在用血球计数板（2mm2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1072108稀释稀释第7页，讲稿共14张，创作于星期日例例3 3 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的
8、总体积为01 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL。5n105第8页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（3 3 3 3）计数的操作）计数的操作）计数的操作）计数的操作稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴管将加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴管将加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴
9、管将加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。第9页，讲稿共14张，创作于星期日（3 3 3 3）计数的操作显微计数：静止）计数的操作显微计数：静止）计数的操
10、作显微计数：静止）计数的操作显微计数：静止5 5 5 5分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（1610161016101610）找）找）找）找到计数室所在的位置。然后根据血球到计数室所在的位置。然后根据血球到计数室所在的位置。然后根据血球到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格，每个计数室选取计数板规格，每个计数室选取计数板规格，每个计数室选取计数板规格，每个计数室选取5 5 5 5个个个个（或（或（或（或4 4 4 4个）中方格中的菌体进行计个）中方格中的菌体进行计个）中方格中的菌体进行计个）中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有数。每个小方格内
11、约有数。每个小方格内约有数。每个小方格内约有5-105-105-105-10个菌个菌个菌个菌体为宜。体为宜。体为宜。体为宜。对于压在小方格界线上的对于压在小方格界线上的对于压在小方格界线上的对于压在小方格界线上的酵母菌应取酵母菌应取酵母菌应取酵母菌应取相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角计数。计数。计数。计数。如如如如遇酵母出芽遇酵母出芽遇酵母出芽遇酵母出芽，芽体大小达到母细，芽体大小达到母细，芽体大小达到母细，芽体大小达到母细胞的一半时，即作为胞的一半时，即作为胞的一半时，即作为胞的一半时，即作为两个两个两个两个菌体计数。菌体计数。菌体计数。菌体计数。计数一个样品要从两个
12、计数室中计数一个样品要从两个计数室中计数一个样品要从两个计数室中计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。计得的值来计算样品的含菌量。计得的值来计算样品的含菌量。计得的值来计算样品的含菌量。第10页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（4 4 4 4）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗：使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，洗，洗，洗，切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷切
13、勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹，洗完后自行晾干或用吹，洗完后自行晾干或用吹，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。复洗涤至干净为止。复洗涤至干净为止。复洗涤至干净为止。第11页，讲稿共14张，创作于星期日 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（5 5 5 5）注意事
14、项：）注意事项：）注意事项：）注意事项：进行计数前，应先将试管进行计数前，应先将试管摇匀摇匀摇匀摇匀，目的是使，目的是使，目的是使，目的是使酵酵母菌在培养液中混合均匀母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误，以减少计数误差。差。显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取母菌，应取母菌，应取母菌，应取相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角计数。计数。计数。计数。若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清若一个小方格内酵母菌数量过多
15、，难以数清若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液时，则可将培养液时，则可将培养液时，则可将培养液稀释稀释稀释稀释一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。本实验本实验本实验本实验无无无无对照实验，酵母菌每天的数量变化可对照实验，酵母菌每天的数量变化可对照实验，酵母菌每天的数量变化可对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成形成形成形成前后对照前后对照前后对照前后对照。血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用用用用浸泡和冲洗浸泡和冲洗浸泡和冲洗浸泡和冲洗的方法清洗。的方法清洗。的方法清洗。的方法清洗。第12页，讲稿共14张，创作于星期日第13页，讲稿共14张，创作于星期日感感谢谢大大家家观观看看第14页，讲稿共14张，创作于星期日