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1、基因基因文库文库基因基因组文组文库库利用利用PCR技术扩增技术扩增目的基因目的基因条件：条件：已知目的基因的已知目的基因的核苷酸序列核苷酸序列先加热至先加热至9095度后度后降温至降温至5556度度结果：指数式增加结果：指数式增加2基因表达载体的构建基因工程的核心基因表达载体的构建基因工程的核心基基因因表表达达载载体体启动子：启动子：终止子：终止子：目的基因目的基因标记基因标记基因目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时能够表达和发挥作用传给下一代，同时能够表达和发挥作用一段特殊结构的一段特殊结构的DNA片断，片断，RNA聚聚合酶识别和结
2、合的合酶识别和结合的位点；位点；使转录开始使转录开始启动子：启动子：终止子：终止子：一段特殊结构的一段特殊结构的DNA片断，片断，使转录停止使转录停止将生物所有将生物所有DNA直接导入受体细胞不是直接导入受体细胞不是更简单吗？如果这么做，结果会怎样？更简单吗？如果这么做，结果会怎样？3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞目的基因进入受体细胞内，并在受体细目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内胞内维持稳定和表达维持稳定和表达的过程，的过程，植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞将目的基因导入植物细胞双子叶植物将目的基因导入植物细胞双子叶植物 农杆菌转化法农杆菌转化法将目
3、的基因导入植物细胞单子叶植物将目的基因导入植物细胞单子叶植物 基因枪法基因枪法将目的基因导入植物细胞花粉管通道法将目的基因导入植物细胞花粉管通道法将目的基因导入动物细胞将目的基因导入动物细胞 显微注射显微注射将目的基因导入将目的基因导入微生物细胞微生物细胞常用的为大肠杆菌，常用的为大肠杆菌，用用CaCl2处理处理 感受态细胞感受态细胞 重组载体与之混合重组载体与之混合 将目的基因导入将目的基因导入微生物细胞微生物细胞常用的为大肠杆菌，常用的为大肠杆菌，用用CaCl2处理处理 感受态细胞感受态细胞 重组载体与之混合重组载体与之混合 4、目的基因的检测和鉴定、目的基因的检测和鉴定检查基因工程是否成
4、功的一步检查基因工程是否成功的一步A、转基因生物染色体的、转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的上是否插入了目的基因基因DNA分子杂交法分子杂交法B、目的基因是否转录出、目的基因是否转录出mRNA分子杂交法分子杂交法C、目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交、目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交个体生物学水平鉴定个体生物学水平鉴定如何从基因文库中找到所需要的基因根据目的基因的有关信息根据目的基因的有关信息基因的核苷酸序列基因的核苷酸序列基因的功能基因的功能基因在染色体上位置基因在染色体上位置基因的转录产物基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质基因翻译产物蛋白质作为基因工程表达载体，只需目的基
5、因就作为基因工程表达载体，只需目的基因就可以完成任务吗？可以完成任务吗？根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出不能导入单子叶植物的机理，你能分析出不能导入单子叶植物的原因吗？的原因吗？大肠杆菌可以生产人的胰岛素，联系以前大肠杆菌可以生产人的胰岛素，联系以前知识，结合基因工程，若要生产人的糖蛋知识，结合基因工程，若要生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌吗？白可以用大肠杆菌吗？珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分，珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分，当它的成分异常时，动物有可能患某种疾当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀型细胞贫血症。假如让你用基病，如镰刀型细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产鼠的因工程的方法，使大肠杆菌生产鼠的珠珠蛋白，想一想，应如何进行？蛋白，想一想，应如何进行？