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1、菌落总数检验原始记录（平板计数法）检验单位检验员检验日期至环境条件温度 ，相对湿度 %检验依据GB4789.2-2022 食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定样品名称产品批号仪器设备及耗材：电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、移液器培养基及试剂：平板计数琼脂培养基（PCA）： ml 配制日期： 生理盐水： ml 配制日期： 实验过程：1.样品稀释：1.2 制备样品稀释液根据样品状态，无菌操作，称取25g/吸取25mL样品，加入到 225mL 无菌生理盐水中均质（或混匀），制成 1:10 样品匀液。用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿
2、管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1：100的样品匀液。按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1ml无菌吸管或吸头。2.接种PCA选择适宜13稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液），吸取1mL于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1 mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时用15mL20mL冷却至46-50的平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。同时再以只加平板计数琼脂培养基的平皿同步培养，作为 PCA 的空白对照。待琼脂凝固。3.培养将以上 PCA 平板倒置
3、于36.01，培养 482h（ / / 时 / / 时） 并计数。4.菌落计数4.1可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony forming unit,CFU)表示。4.2选取菌落数在 30 CFU300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于 30 CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。4.3其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数
4、。4.4当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。结果报告样品序号各稀释度平板上的菌落数结果CFU/mL CFU/g第一稀释度：第二稀释度：第三稀释度：样品1样品2样品3样品4样品5空白稀释液+PCAPCA空白（仅PCA）计算方法1. 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g(mL)样品中菌落总数结果。2.若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按式(1)计算。式中:N样品中菌落数；C平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2第二稀释度（高稀
5、释倍数）平板个数;d稀释因子（第一稀释度）。3.若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。4.若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。5.若所有稀释度(包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。6.若所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU300CFU之间，其中一部分小于30CFU或大于300 CFU时，则以最接近30 CFU或300 CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。计算过程：方法 报告1.菌落总数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。2.菌落总数大于或等于100CFU时，第三位数字采用“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五人”原则修约后，采用两位有效数字。3.若空白对照上有菌落生长，则此次检验结果无效。4.称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。报告人报告日期复核人复核日期