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1、1 .基因工程是狭义的,其核心是构建,其理论基础包括DNA是生物 的发现、DNA 结构的确立以及传递方式(即 法则)的认定,其技术保障是 酶、酶和 载体的发现与应用。2 .限制性核酸内切酶是能够 DNA分子内一小段 的酶,它的发现和应用,使 成为可能。DNA连接酶的作用是将具有 末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起,形成 分子。质粒是能的双链状DNA分子,于拟核之外,一般含 基因和控制质粒DNA 的基因。除质粒外,基因工程的载体还有、和 o.基因工程的基本原理是让 基因在宿主细胞中稳定和高效地,其操作过程涉及生物可遗传变异中的,其基本流程包括 的获得、的形成、导入受体细胞(细胞)、筛选含有
2、的受体细胞和 表达等几个方面。3 .获得目的基因通常有2种办法:若目的基因的序列是已知的,可以用 合成目的基因,或者用 反应(简称)扩增目的基因;若目的基因的核甘酸序列是未知的,可以建立一个包括目的基因在内的,把DNA分子 的 包括在内,从中找到想要研究的基因。4 .目的基因与载体DNA通常是用 的限制性核酸内切酶分别切割,从而形成相同的,再用DNA连接酶连接, (能/不能)用不同的酶切。5 .重组DNA分子导入受体细胞的方法:大肠杆菌常用 处理,增加 的通透性;植物细胞常用 法;动物细胞常用 法。6 .转入了人胰岛素原基因的大肠杆菌可以合成,经过加工前 (具有/ 不具有)生物活性。7 .植物
3、基因工程的应用解决了传统育种培育新品种所需时间较,而且 难以杂交的缺陷。基因工程在医药工业和医学领域的应用主要包括 和。8 .基因治疗是向 (目标/全部)细胞中引入 的基因,以基因的缺陷,达到治疗的目的,目前该技术还不。9 .植物克隆的技术基础是,其原理是植物细胞的,即植 物体的每个 细胞都具有发育成 的潜能。10 .植物组织培养的一般程序是:配制含有适当 和 的含0.7%1%的培养基,倒在 试管中凝固成半固体;从 的根、茎或叶上切取一些小组织块;将组织块放在半固体培养基上进行培养,获得 组织;以适当配比的营养物质和生长调节剂诱导,直到再生出新植株。11 .跟生活的植株相似,植物组织块切口处的
4、细胞在 的刺激下发生 成为愈伤组织,通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比,可以诱导出芽和根,并可由此再 生出新的植株(即)0.将含有愈伤组织培养物的试管放在 上,通过 培养可以分散成单细胞。这种单细胞细胞质丰富、液泡 而细胞核,这是 细胞的特征。在适宜的培养基中,这种单细胞可发育成,继续发育,可以形成植株。12 .用 酶和 酶水解细胞壁,可以获得分离的植物细胞,用适当方法进行培养,也可以获得新植株。13 .不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异,细胞全能性的表达程 度 (基本/大不)相同。14 .在长期培养中,培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因有 畸变、细胞核变异或
5、 产生等,而且其结果是(可逆/不可逆)的;细胞或组织中 平衡被打破,或细胞对外源生长物质的 性发生改变。15 .处于适当的 培养条件的单个植物细胞,经过培养基中成分的诱导,可发生类似受精卵经过、分化、器官发生和形态建成而发育成胚的过程,即从单细胞依次 到细胞团、胚、胚和,最后再生出完整的植株。有的植物可以在 愈伤组织的基础上直接发育出 器官。16 .器官发生和形态建成主要是通过平衡的 配比进行调控。适量的生长素和配比可以诱导芽的分化;适量的吗I跺乙酸(IAA)及适当减除其他某些 激素,则可以诱导生。在植物器官培养方面,性花器官的培养成果显著, 例如子房的培养、胚囊的培养均已取得进展。17 .植
6、物原生质体的获得方法是:在 mol/L的 溶液环境(较渗透压)下用 混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,将细胞壁消化除去,获得 形的原生质体。18 .植物细胞工程的概念和操作过程是:培养植物细胞(包括原生质体),借助 方法,将外源遗传物质导入受体细胞(包括 受体)中,或通过 融合、等将不同来源的遗传物质重新组合,再通过对这些转基因细胞或重组细 胞进行培养,获得具有特定性状的新植株。19 .通过大量培养特定细胞系,实现了能产生重要 代谢产物的细胞的大量克隆和产物的工业化生产;通过花药(花粉)培养,进行 克隆;在培养基中加入不同浓度的NaCl或病原体的毒蛋白,诱发和筛选了抗或抗突变体;在
7、培养基中加 入不同浓度的赖氨酸类似物,能够筛选出抗赖氨酸类似物突变体,其中赖氨酸、蛋氨 酸、亮氨酸和异亮氨酸的水平会 o.动物克隆的技术基础是 o首先,将动物体内的一部分组织取出,经过 消化或 消化,使其分散成单个的细胞;然后,在人工控制的培养条件下,使这些细胞得以生存,并保持生长、分裂(繁殖)乃至 和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。由于细胞培养中,细胞之间并非彼此独立而是在生命 活动中相互依存,所以在某种程度上也像体内一样呈现一定的 特性。动物组织培养过程中可以伴随,长期的培养经常只能使 类型的细胞保存下来,最终成了简单的细胞培养。20 . 培养,即从机体取出后立即进行的细胞、组织培养;当
8、细胞从移植物中生长迁 移出来,形成 并增大以后,接着进行了 培养,使其继续生长、增殖。鸡胚细胞的培养曾在没有外加 的条件下连续维持了 34年之久!细胞培养瓶(即)就是这时发明的。21 .细胞系指可 的细胞。如果不进行分离培养,到一定时期培养的细胞就会因过大和 引起营养枯竭,不能正常生长,这就是必须传代的原因。培养物在首次传代时就成为细胞系,能连续培养下去的细胞系称为 细胞系,不能连续培养下去的细胞系称为 细胞系。二倍体细胞通常为 细胞系。连续细胞系被认为是发生 了的细胞系,大多数具有 核型。有的连续细胞系是 细胞系,具有 性;有的连续细胞系获得了 性,但保留现象,不致癌。22 .通过一定的选择
9、或 方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有 的细胞称为细胞株,一般具有恒定的、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性 等。可以连续多次传代的细胞株称为 细胞株,可传代次数有限的细胞株称为细胞株。23 .把一个细胞从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的技术, 叫做 培养法或 o未经克隆化的细胞系具有 性,经过克隆以后的细胞的后裔细胞群,由于来源于一个共同的祖细胞,所以称为 系。细胞克隆的最基本要求是:必须保证分离出来的细胞是 而不是,即必须肯定所建成的克隆来源于。24 .理论上各种培养细胞都可被克隆,但 培养细胞和 细胞系克隆起来有实际困难;细胞系、细胞系和 细胞系等比较容易克隆;单细
10、胞通常比群体细胞 (容易/不容易)克隆。25 .提高细胞克隆形成率的措施有:选择适宜的培养基、添加(最好)、 以 细胞(如经射线照射本身失去增殖力的小鼠 细胞)支持生长、激素(等)刺激、使用 培养箱、调节 等。细胞克隆的最主要用途之一,就是从普通细胞系中分离出缺乏 的突变细胞系。26 . 技术被誉为细胞免疫学中的一次革命,这是指一个或一个细胞融合成 一个细胞的现象。植物细胞的 可以相互融合,动物细胞在一定的物质(如灭活的、等)介导下可以相互融合,此外也可以用 技术。27 .细胞融合可以在基因型 或 的细胞间进行,其中后者细胞间的融合就是细胞,该过程中 容易丢失,利用杂交细胞检测特定 丢失与特定
11、减少的对应关系可以进行 定位。28 .动物体通过 系统抵抗外来致病原的侵袭,清除内部 细胞,监控 的细胞。29 . 技术制备单抗的基本方法是:用外界 刺激动物,使其发生免疫反应,使 细胞产生抗体;利用 病毒或 等作介导,使经免疫的动物的B细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合;经过、培养,获得来自单 一细胞的既能产生、又能的杂交瘤细胞克隆。单抗比一般抗血清优越得多,一般抗血清中的抗体是一群识别 抗原部位的抗体混合物。30 .杂交瘤技术制备单抗的最大优点是:可以从 成分比例极少的抗原混合物中获得单抗。这是因为,经过 筛选,可以从产生各种不同抗体的杂交瘤混合群体中得到产生 抗体的杂交瘤。31 .受精卵
12、具有全能性,即具有使后代细胞形成 的潜能。高等动物的受精卵的第一次卵裂后全能性(已经/没有)丧失。随着胚胎发育的继续,有的细胞不再 具有发育成为完整个体的能力,只具有分化出多种组织细胞的潜能,叫做 细胞。32 .低等动物细胞的全能性一般比较容易体现。如水蛆的消化细胞,不经过 就可以转变为上皮细胞、肌肉细胞。癌细胞 (不能/仍能)逆转为正常细胞,如小鼠畸胎癌能够分化为各种 体细胞。无论是分化还是癌化,变化的都是表现型,的完整性可以保留。33 .动物难以克隆的根本原因在个体发育过程中,分化的结果使得细胞在 上高度特化。各种特化细胞的细胞核中物种的 完整,但是其中的基因并不同时进行活动,有的基因甚至
13、不表达任何基因产物。在动物的基因组中,一类基因是维持 的,在各种细胞中都处于活动状态;另一类基因随着组织器官和发育阶段不同 而 表达。细胞分化使得细胞发生了基因的差异表达,有的基因开放,有的基因关闭。如哺乳动物的红细胞中缺乏,只有 线粒体,甚至 也被排出。34 .核移植就是利用一个细胞的细胞核(核)来取代另一细胞中的细胞核,形成一 个重建的“合子”。实验证明,胚胎细胞核的移植成功率远 于成体细胞。哺乳动物的卵细胞体积,核移植需要借助精密的显微操作仪和高效率的细胞融合法。35 .哺乳动物 的克隆直到克隆羊“多莉”的问世才算成功。体细胞羊的克隆成功证明了:高度分化细胞经过一定技术处理,也可回复到类
14、似 时期的功能;在胚胎和个体发育中,具有调控细胞核(包括异源的细胞核)发育的作用。36 .重组卵细胞最初分裂时虽然复制了,但基因的 并未开始;同时,供体核DNA开始丢失来源于乳腺细胞的 蛋白,正是这些蛋白最初阻止了核基因的表达;在重组卵细胞开始第一次分裂时,原乳腺细胞的这些蛋白便全部被卵细胞质中 的蛋白因子替换了,因此 被重新编排,胚细胞开始表达自己的基因,进而调控胚在代孕母亲子宫中的进一步发育。37 .动物的胚胎发育是指受精卵发育成 的过程,受精卵是下一代新生命的开始。成熟的精卵 成为受精卵的过程称为受精。受精大体包括、等几个过程。同种动物精子、卵细胞表面有特异性相互 的蛋白,这是同种动物精
15、卵才能结合的原因之一。38 .受精卵卵裂产生的细胞团称,随着其细胞数目的增加,细胞逐渐变 o当其含 个细胞时,其中的每一个细胞都具有全能性。细胞继续分裂,成为中空的细胞团,称 或 O外表为一层扁平细胞,称,胚胎的附属结构或胚外结构如 就由其发育形成。囊胚内部的内细胞团的细胞为 细胞,是一种的细胞,具有 全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官。39 .囊胚进一步发育,其内的细胞不断增殖分化,逐渐形成一个圆盘状结分为内外两层即 和 o后者细胞在 正中线处形成一条增殖区,该区的细胞增殖分裂,进入内、外胚层之间形成。这时的胚胎称为 胚,它的内、中、外三个胚层逐渐分化形成各种 o.胚胎工程通常指各种
16、操作技术,其研究对象主要限定于高等脊椎动物,特别是动物。研究的重点内容有、等。40 .体外受精就是采集雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子,使其在 中受精。其过程是:将 的精子放入培养液中培养,使精子达到 状态;从卵巢中获得的卵母细胞,进行人工培养促进其成熟;获能的精子和成熟后的卵细胞在体外 合适的环境下 培养一段时间,便可受精;受精后形成的受精卵需经早期发育培养,才能完成植入或着床,通常移植的最适宜时期是发育到细胞以上的胚胎,如 早期;经分娩产仔就得到“试管动物二.进行 培养时,必须配制一系列含有 (相同/不同)成分的培养液,用以培养不同发育时期的胚胎。目前,只能对少数物种不同阶段的胚胎进行培养
17、,尚 无从受精卵到新生儿的 胚胎培养技术。41 . 是目前胚胎工程中获得后代的唯一方法,该技术是指将经济价值较高、 遗传性状优良的母畜,经过激素处理,使其 后受精,然后将发育的早期胚胎分别移植到 的代孕母的子宫内,通过代孕母妊娠产仔的技术。其基本过程是:一头母畜(供体)发情排卵并经配种后,在一定时间内从其生殖器官中(和)取出早期胚胎,然后把它们分别移植到另外一头与供体 排卵、但未经 的母畜(受体)的相应部位。42 .胚胎分割是指借助显微操作技术将 切割成几等份,再移植到代孕母子宫中发育,产生 后代的技术。其基本过程是:将发育良好的胚胎移入含有培养液的培养皿中在显微镜下用切割针或切割刀把胚胎分割
18、开,或者采用 处理等方式将 中的细胞分散开;分割的胚胎或细胞(能/不能)直接移植给受体,或在体外培养到 阶段,再移植到受体内。43 .当受精卵分裂发育成囊胚,内细胞团的细胞为 细胞(细胞),这是一种未分化细胞,具有 全能性和_核型。44 .培养胚胎干细胞的关键是需要一种培养体系,能促进胚胎干细胞的生长,同时还要抑 制胚胎干细胞的,称为 O.胚胎干细胞核移植是指把胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中,经过胚、胚胎 培养、胚胎 后直接由受体完成克隆动物的技术。45 .胚胎干细胞可以进行 敲除,从而获得适合人体移植的器官,减弱或消除排斥反应;人体的胚胎干细胞可以转变为人体的任何一种细胞和组织,可以培育用
19、于移 植的细胞、组织或器官;通过胚胎干细胞,还可以在 中改良并创造动物新品种。46 .生态工程的原理是、,生态工程学的研究对象是 一 一 复合生态系统。47 .物质循环利用的生态工程主要有:城市生活垃圾进行 化、化、化处理,将生活垃圾中有机部分、人畜的粪便等转化为优质生态:农村地区发展 养殖业,将农作物秸秆“干旱和半干旱地区开展水和 水的收集,在广大农业区域实施 灌溉技术,以及城市、工业节水系统的开发等。对工业、生活 等实施减量、回收、再生、再循环的措施,这些均属于废水处理与利用的生态工程。此外还有山区 综合治理与开发的生态工程和清洁及可再生 系统组合利用的生态工程等。48 .一种、种、一种等农业措施都是广大农民在农业实践中产生的科学方法。生 态农业有效地促进了、的畅通,人与环境和谐相处,经济、生态环境和社会效益的同步发展。49 .我国农业生态工程的主要技术:物质的 技术、洁净可再生的开发技术、和 合理优化技术,此外,针对耕作方式与种植制度,设计高效可行的 种、种和 种制度;利用动物的不同习性,设计多种 养殖技术;利用生物种间关系,发展 防治技术等。