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1、选修1+3填空教师版2二、大肠杆菌的培养和分离1 .大肠杆菌(1)性质：大肠杆菌是革兰氏 性、的肠道杆菌。(2)用途：大肠杆菌是 技术中被广泛采用的工具。2 .实验原理(1)扩大培养原理：将大肠杆菌接种在 培养基中，使其快速分裂繁殖。(2)分离纯化原理：将待检测微生物样品通过 或 接种在培养基上，样品中的每一个细胞或胞子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个菌 落接种到 培养基上，经培养后，即可得到一个微生物的纯种。阴性、兼性厌氧划线或涂布LB体斜面培养基 灭菌3 .实验步骤 50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌倒壬板将培养基分别倒入4个灭菌后的培养皿中，水平
2、放置，使之形成平面 I接种在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h 划线!用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次, 分离在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿 培养培养皿倒置(盖在下面)，放在37c恒温培养箱中培养1224 h后, 观察可看到划线的末端出现不连续的单个菌落 保存!用接种环取出单个菌落,用划线法接种在斜面培养基上, 菌种37 培养24 h后，置于4 c冰箱中保存稀释用1 mL无菌吸管吸取1 mL大肠杆菌培养液，加入到盛有9 mL 的大试管中，充分混匀，稀释 倍；按照同样的方法依次进行稀释制成10,、10一2、103、10-5、I。-6系列稀释度的大肠杆菌稀释液。(2)划线或涂布 划线分离法a.操作：在旁,左手拿皿底，右手拿接种环，挑取大肠杆菌培养液在平板上划线。b.划线方法：划线和 划线。c.平行划线时，第一次划线及每次划线之间都要 接种环，划线结束后也要灼烧接种环涂布分离法a.将 浸在盛有酒精的烧杯中。b.取不超过0.1mL的,滴加到培养基表面。c.将蘸有少量酒精的玻璃刮刀在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。d.用玻璃刮刀将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。(3)培养：将接种的平板 于培养箱或温室中37 C培养12-24 ho无菌水10 (2)a.酒精灯火焰b.平行连续灼烧a.涂布器b.菌液(3)倒置