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1、第十二章第十二章心脏心脏(xnzng)生化标志物生化标志物检验检验第一页，共五十四页。第一节第一节 概述概述(i sh)第二页，共五十四页。第三页，共五十四页。心脏的传导系统主要由特殊分化的心肌细胞组成，心脏的传导系统主要由特殊分化的心肌细胞组成，位于心壁内，具有位于心壁内，具有产生兴奋、传导冲动和维持产生兴奋、传导冲动和维持(wich)心心脏正常节律性搏动的功能。脏正常节律性搏动的功能。心肌细胞富含多种酶类和蛋白质，有些酶在心肌心肌细胞富含多种酶类和蛋白质，有些酶在心肌的含量较高，有些蛋白质是心肌细胞特异的。的含量较高，有些蛋白质是心肌细胞特异的。第四页，共五十四页。第五页，共五十四页。心脏
2、的功能心脏的功能 心脏的功能为泵血。心脏实际上是个血液泵，心脏的功能为泵血。心脏实际上是个血液泵，由起搏传导细胞和收缩细胞所组成，不停地进行由起搏传导细胞和收缩细胞所组成，不停地进行收缩和舒张收缩和舒张(shzhng)，舒张，舒张(shzhng)时接纳来自静脉的时接纳来自静脉的回流血，收缩时将接纳的血液等量地排入动脉，回流血，收缩时将接纳的血液等量地排入动脉，保证血液周而复始，循环不断。保证血液周而复始，循环不断。第六页，共五十四页。心脏的生化标志物心脏的生化标志物1.心脏的酶类标志物心脏的酶类标志物 血清中有多种酶，但各种酶的来源或组织、器官特异性血清中有多种酶，但各种酶的来源或组织、器官特
3、异性不一。不一。其中血清其中血清CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD等主要等主要来自于心肌来自于心肌(xnj)，一起组成心肌，一起组成心肌(xnj)酶谱，对诊断心脏酶谱，对诊断心脏疾病有重要意义。疾病有重要意义。但但作为心脏的酶类标志物主要有：作为心脏的酶类标志物主要有：LDH、CK、AST及其同工酶等及其同工酶等，这些酶在血清中的活性变化可，这些酶在血清中的活性变化可反映心脏反映心脏功能的好坏和心肌细胞结构的完好程度。功能的好坏和心肌细胞结构的完好程度。第七页，共五十四页。2.蛋白类标志物蛋白类标志物 心肌中含有诸多蛋白质，这些蛋白质在体内心肌中含有诸多蛋白质，这些蛋白质在体内发挥着重
4、要功能发挥着重要功能(gngnng)。但。但作为反映心脏结构和心肌作为反映心脏结构和心肌损伤的蛋白类标志物主要有：肌红蛋白（损伤的蛋白类标志物主要有：肌红蛋白（Mb）和肌钙）和肌钙蛋白（蛋白（cTn）。）。正常人血中正常人血中Mb含量很低，当心肌损伤时，血中含量很低，当心肌损伤时，血中Mb明显增高；肌钙蛋白是心肌的结构蛋白，由三明显增高；肌钙蛋白是心肌的结构蛋白，由三个亚单位组成，即肌钙蛋白个亚单位组成，即肌钙蛋白C(cTnC)、肌钙蛋白、肌钙蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白、肌钙蛋白T(cTnT)，其中，其中cTnI是心肌损伤是心肌损伤的特异指标。的特异指标。第八页，共五十四页。二、心脏疾病的实
5、验诊断二、心脏疾病的实验诊断（一）急性心肌梗死（一）急性心肌梗死 基于基于AMI后梗死后梗死(n s)部位心肌细胞内的化学部位心肌细胞内的化学物质将释放到外周血中的病理生理改变，通过对物质将释放到外周血中的病理生理改变，通过对这些化学的测定可诊断这些化学的测定可诊断AMI。决定一种标志物血浓度变化的因素有该物质的决定一种标志物血浓度变化的因素有该物质的分子大小、在细胞内的分布（胞浆中的小分子蛋白分子大小、在细胞内的分布（胞浆中的小分子蛋白较结构蛋白更易进入血液循环）、释放率、清除率较结构蛋白更易进入血液循环）、释放率、清除率和心肌特异性等。和心肌特异性等。第九页，共五十四页。1.经典经典(jn
6、gdin)酶组酶组特性特性CKCK-MBASTLDH-HBD开始升高时间（开始升高时间（h）3-62-46-128-1212-24达峰值时间（达峰值时间（h）20-3012-244824-4848-72升高幅度（对照值倍数）升高幅度（对照值倍数）2-204-202-102-65-7.5阳性率（阳性率（%）95100938998回复正常时间（回复正常时间（d）2-433-57-1411-16诊断价值诊断价值早期诊早期诊断及预断及预后后早期诊早期诊断及预断及预后后后期诊后期诊断（特断（特异性差）异性差）后期诊后期诊断（特断（特异性差）异性差）后期诊后期诊断（特断（特异性高）异性高）第十页，共五十四
7、页。2.LDH同工酶组同工酶组同工酶比例应为：同工酶比例应为：LDH2LDH1 LDH3 LDH4 LDH5（小（小儿有时也出现儿有时也出现LDH1 LDH2），其中，其中(qzhng)LDH1/LDH2 0.7。AMI 发病后血清发病后血清LDH1和和LDH2显著升高，显著升高，约约95%的病例的病例LDH1/LDH2 1，且比值升高早于，且比值升高早于LDH总酶活性总酶活性，多在，多在3-5d达达峰值，持续时间越峰值，持续时间越3周，可弥补周，可弥补CK（4d内）和内）和AST（1周内）周内）活性升高时间短暂的不足；如活性升高时间短暂的不足；如LDH1/LDH2 1，且出现，且出现LDH5
8、增高时，提示并发肝脏淤血或肝功能衰竭，预后不良。增高时，提示并发肝脏淤血或肝功能衰竭，预后不良。第十一页，共五十四页。3.CK/LDH比值比值 测定测定AMI病人病人CK/LDH比值发现，其峰值在发病比值发现，其峰值在发病后后12-16h，明显早于，明显早于CK和和CK-MB，其诊断阳性率在，其诊断阳性率在9-24h内为内为100%，且有很高的特异性，是，且有很高的特异性，是对对AMI最有实用最有实用的酶学指标的酶学指标，而且，而且(r qi)测定方法简单易行。测定方法简单易行。除此，糖原磷酸化酶同工酶组、肌酸激酶同工酶亚型除此，糖原磷酸化酶同工酶组、肌酸激酶同工酶亚型的检测与分析对的检测与分
9、析对AMI的诊断液非常有价值。的诊断液非常有价值。第十二页，共五十四页。（二）心肌炎（二）心肌炎 通过测定和分析病毒心肌炎病人血清酶组证实：通过测定和分析病毒心肌炎病人血清酶组证实：血清血清LDH、AST、-HBD、CK、CK-MB，等，等各种各种酶活性升高的幅度均远不如酶活性升高的幅度均远不如AMI患者患者，血清，血清CK和和CK-MB活性恢复较早活性恢复较早，而血清，而血清AST和和LDH恢复较慢恢复较慢，患者患者心电图改变几乎与心肌酶活性高低无关心电图改变几乎与心肌酶活性高低无关。随。随病情好转上述病情好转上述(shngsh)酶活性逐渐恢复正常。酶活性逐渐恢复正常。第十三页，共五十四页。
10、（三）其他疾病（三）其他疾病 充血性心力衰竭但无心肌梗死病人充血性心力衰竭但无心肌梗死病人，其血清，其血清AST及及LDH活性常升高活性常升高，LDH活性升高主要是由活性升高主要是由LDH5升高升高所致所致(su zh)；但；但血清血清CK活性正常活性正常，主要由于心力衰竭，主要由于心力衰竭引起肝淤血、缺氧、肝细胞受损害所致。这些病人引起肝淤血、缺氧、肝细胞受损害所致。这些病人还可有血清还可有血清ALT升高。升高。慢性肺心病患者慢性肺心病患者血清超氧化物歧化酶（血清超氧化物歧化酶（SOD）明显升高，急性加重期患者又明显高于缓解期的病人。明显升高，急性加重期患者又明显高于缓解期的病人。第十四页，
11、共五十四页。（四）心脏手术（四）心脏手术 心脏手术包括心脏瓣膜置换术、二尖瓣成形术、房间隔心脏手术包括心脏瓣膜置换术、二尖瓣成形术、房间隔缺损修补术、室间隔缺损修补术、肺动脉狭窄切开术、冠状缺损修补术、室间隔缺损修补术、肺动脉狭窄切开术、冠状动脉搭桥术等。动脉搭桥术等。体外循环心脏手术需暂时阻断升主动脉和冠状动脉，造体外循环心脏手术需暂时阻断升主动脉和冠状动脉，造成心肌缺血、缺氧、心肌细胞无法进行糖的有氧分解。成心肌缺血、缺氧、心肌细胞无法进行糖的有氧分解。ATP显显著减少，故著减少，故CK活性代偿性增强活性代偿性增强，保证能量，保证能量(nngling)来自磷酸肌来自磷酸肌酸的分解；酸的分解
12、；心肌细胞缺氧时，心肌细胞缺氧时，细胞膜通透性增加细胞膜通透性增加，使，使CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD漏至细胞外，导致血清中酶漏至细胞外，导致血清中酶活性升高。活性升高。第十五页，共五十四页。第二节第二节心脏心脏(xnzng)酶类标志酶类标志物检验物检验第十六页，共五十四页。一、乳酸脱氢酶及其同工酶一、乳酸脱氢酶及其同工酶1.乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 LDH属糖酵解酶，广泛存在于各种组织属糖酵解酶，广泛存在于各种组织(zzh)中，中，以心肌、骨骼肌、肾脏、肝脏中含量最丰富，以心肌、骨骼肌、肾脏、肝脏中含量最丰富，LDH测测定常用于诊断心肌梗死，肝病和某些恶性肿瘤。定常用于诊断心肌梗死
13、，肝病和某些恶性肿瘤。第十七页，共五十四页。【参考范围参考范围】速率法速率法 109-145U/L109-145U/L（3737）比色法比色法 190-437190-437金氏单位金氏单位【临床意义临床意义】心肌梗死患者在发生胸痛后心肌梗死患者在发生胸痛后8-12h LDH开始升高，开始升高，24-48h达高峰，酶活性升高可维持达高峰，酶活性升高可维持7d左右或更长，可作为左右或更长，可作为急性心肌梗死后期的辅助诊断指标。升高水平通常急性心肌梗死后期的辅助诊断指标。升高水平通常(tngchng)为为正常的正常的3-4倍，最高可达倍，最高可达10倍。倍。LDH中度升高见于心肌炎。中度升高见于心肌
14、炎。第十八页，共五十四页。同工酶及其亚基同工酶及其亚基组成组成心肌心肌肝肝骨骼肌骨骼肌红细胞红细胞LDH1(H4)602442LDH2(H3M)336744LDH3(H2M2)7151710LDH(HM3)113164LDH4(M4)16456 LDH1 LDH3 LDH4LDH5。LDH1 （28.4 5.3）%LDH2 （41.0 5.0）%LDH3 （19.0 4.0）%LDH4 （6.6 3.5）%LDH5 （4.6 3.0）%第二十页，共五十四页。【临床意义临床意义】通常在通常在AMI后后6h，LDH1开始出现升高，总开始出现升高，总LDH升升高略为高略为(l wi)滞后。由于滞后。
15、由于AMI时时LDH1较较LDH2释放多，释放多，因此因此LDH1/LDH2 1.0，LDH1/LDH2比值的峰时约在发比值的峰时约在发病后病后24-36h，然后开始下降，发病后，然后开始下降，发病后4-7d恢复正常。恢复正常。LDH1 LDH2也可出现在心肌炎、肺栓塞、巨细也可出现在心肌炎、肺栓塞、巨细胞性贫血和溶血性贫血，但体外溶血通常不会导致胞性贫血和溶血性贫血，但体外溶血通常不会导致LDH1 LDH2。第二十一页，共五十四页。二、肌酸激酶及其同工酶二、肌酸激酶及其同工酶1.血清肌酸激酶血清肌酸激酶肌酸激酶主要存在肌酸激酶主要存在(cnzi)于骨骼肌、心肌、脑组织中。于骨骼肌、心肌、脑组
16、织中。【参考范围参考范围】男性（男性（U/L）女性（女性（U/L）25 10-65 7-55 30 15-105 10-80 37 38-174 26-140第二十二页，共五十四页。【临床意义临床意义】1.CK测定临床上主要用于诊断心肌梗死。测定临床上主要用于诊断心肌梗死。急性急性心肌梗死后心肌梗死后3-6h就开始急剧升高，可高达正常就开始急剧升高，可高达正常(zhngchng)上限的上限的10-12倍，倍，20-30h达高峰。达高峰。CK对诊断对诊断心肌梗死较心肌梗死较AST、LDH的的特异性高，但此酶增高持特异性高，但此酶增高持续时间较短，续时间较短，在在2-4d后就恢复正常。后就恢复正常
17、。2.病毒性心肌炎时，病毒性心肌炎时，CK活性也可明显升高。活性也可明显升高。第二十三页，共五十四页。3.心脏手术和非心脏手术后都将导致心脏手术和非心脏手术后都将导致CK活性的增高，且增高的幅度与肌肉的损伤范围活性的增高，且增高的幅度与肌肉的损伤范围(fnwi)的大小以及手术时间的长短密切相关。的大小以及手术时间的长短密切相关。4.在急性脑外伤、脑膜炎、恶性肿瘤、肺梗在急性脑外伤、脑膜炎、恶性肿瘤、肺梗死、甲状腺功能低下时，死、甲状腺功能低下时，CK可可增高。可可增高。第二十四页，共五十四页。2.肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶 肌酸激酶（肌酸激酶（CK）分子是由）分子是由M亚基和亚基和B亚基组成
18、亚基组成的二聚体。在细胞质内共有的二聚体。在细胞质内共有(n yu)三种同工酶：三种同工酶：即即CK-BB（CK-1）、）、CK-MB（CK-2）、）、CK-MM（CK-3）。）。【参考范围参考范围】CK-MB CK-MB 小于小于10U/L10U/L（3737）CK-MB/CKCK-MB/CK总活性总活性 小于小于5%5%第二十五页，共五十四页。【临床意义临床意义】血浆中血浆中CK-MB主要来自心肌，升高常被认为主要来自心肌，升高常被认为心肌损害特异性指标，对心肌损害特异性指标，对心肌梗死早期诊断很有价心肌梗死早期诊断很有价值。值。在急性心肌梗死发病在急性心肌梗死发病2-4h血清血清CK-M
19、B即开始升高即开始升高（大于（大于15u/L），），12-24h达到达到(d do)峰值，如无并发症峰值，如无并发症3d后恢复正常水平。后恢复正常水平。第二十六页，共五十四页。胸痛发作胸痛发作3小时后用小时后用CK-MB诊断诊断AMI阳性率可达阳性率可达50%，6小时的诊断阳性率可达小时的诊断阳性率可达80%。一般认为一般认为(rnwi)CK-MB CK6%时为阳性。时为阳性。CK-MB对心肌并不完全特异，急性骨骼肌损伤对心肌并不完全特异，急性骨骼肌损伤时时CK-MB可一过性增高，但可一过性增高，但CK-MB/CK常常6%，可与，可与心肌损伤鉴别。心肌损伤鉴别。第二十七页，共五十四页。三、天门
20、冬氨酸氨基转移酶及其同工酶三、天门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶1.1.天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶 AST AST广泛分布于全身各组织广泛分布于全身各组织(zzh)(zzh)器官，在心器官，在心肌细胞内含量最多。肌细胞内含量最多。【参考范围参考范围】速率法速率法 8-40U/L8-40U/L（反应温度为（反应温度为3737）比色法比色法 8-288-28卡门单位（反应温度为卡门单位（反应温度为3737）第二十八页，共五十四页。【临床意义临床意义】当心肌梗死时，血清当心肌梗死时，血清(xuqng)(xuqng)中中ASTAST活性增高，在活性增高，在发病后发病后6-12h6-12h之内
21、显著增高，增高的程度可反映损害之内显著增高，增高的程度可反映损害的程度，在的程度，在48h48h达到高峰，约在达到高峰，约在3-5d3-5d恢复正常。恢复正常。心肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血清心肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血清ASTAST的轻度增高。的轻度增高。AST AST与与CK-MBCK-MB、LDHLDH等联合测定有助于对急性心肌等联合测定有助于对急性心肌梗死的病程判断。梗死的病程判断。第二十九页，共五十四页。2.2.天门冬氨酸氨基转移酶同工酶天门冬氨酸氨基转移酶同工酶 AST AST有两种受不同基因控制的同工酶，分别存在有两种受不同基因控制的同工酶，分别存在于细胞质（于
22、细胞质（c-ASTc-AST）和线粒体（）和线粒体（m-ASTm-AST）中。）中。【参考参考(cnko)范围范围】m-AST 15U/L m-AST 15U/L（3737）第三十页，共五十四页。【临床意义临床意义】m-AST m-AST一般要在细胞一般要在细胞(xbo)(xbo)坏死、线粒体破坏后坏死、线粒体破坏后才释放入血，当细胞才释放入血，当细胞(xbo)(xbo)不再破坏和修复时血清中不再破坏和修复时血清中m-m-ASTAST值很快降至正常水平。因此，值很快降至正常水平。因此，测定测定m-ASTm-AST有利有利于判定细胞坏死严重程度，也有利于推测患者预后。于判定细胞坏死严重程度，也有
23、利于推测患者预后。m-AST m-AST的动态活性与病程密切相关，一般在的动态活性与病程密切相关，一般在心肌梗死发生后心肌梗死发生后12h12h明显升高（较明显升高（较CKCK晚），晚），24h24h达峰达峰值并持续至值并持续至48h48h。第三十一页，共五十四页。m-AST m-AST诊断心肌梗死的敏感性（为诊断心肌梗死的敏感性（为100%100%）和特）和特异性（为异性（为93.5%93.5%）均不低于）均不低于CK-MBCK-MB（分别为（分别为92.8%92.8%和和93.5%93.5%），且峰值时间较长，可作为诊断心肌梗），且峰值时间较长，可作为诊断心肌梗死的新酶学指标。死的新酶学指
24、标。心脏手术前的预后判断：心脏手术前的预后判断：术前术前m-ASTm-AST值在值在20U/L20U/L以上时，术后死亡率升高以上时，术后死亡率升高(shn o)(shn o)；而术前；而术前m-m-ASTAST值在值在20U/L20U/L以下时，术后预后良好。以下时，术后预后良好。第三十二页，共五十四页。第三节第三节心脏蛋白心脏蛋白(dnbi)类标志类标志物检验物检验第三十三页，共五十四页。一、血清肌红蛋白一、血清肌红蛋白 肌红蛋白，是由一条肽链和一个血红素辅基组肌红蛋白，是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质肌肉内储存氧的蛋白质，与氧的亲，与氧的
25、亲和力比和力比Hb强，在极低的氧张力情况下，肌肉缺氧时，强，在极低的氧张力情况下，肌肉缺氧时，可释放氧供肌肉收缩的急需。可释放氧供肌肉收缩的急需。肌红蛋白是肌红蛋白是组成骨骼肌和心肌的主要蛋白质组成骨骼肌和心肌的主要蛋白质，当肌，当肌肉损伤时，可以从肌肉组织中漏到循环肉损伤时，可以从肌肉组织中漏到循环(xnhun)血液中，血液中，使血清肌红蛋白浓度增加，该指标用于判断是否发生使血清肌红蛋白浓度增加，该指标用于判断是否发生肌肉损伤。肌肉损伤。第三十四页，共五十四页。第三十五页，共五十四页。测定方法测定方法：分光光度法、电泳法、层析法、免：分光光度法、电泳法、层析法、免疫化学法。疫化学法。现在普遍
26、采用现在普遍采用乳胶增强透射比浊法乳胶增强透射比浊法 特点特点(tdin)：灵敏度高、特异性好、测定速度：灵敏度高、特异性好、测定速度快，适用于各类型生化自动分析仪。快，适用于各类型生化自动分析仪。第三十六页，共五十四页。【原理原理】Mb致敏乳胶颗粒是大小均一的聚苯丙烯乳胶致敏乳胶颗粒是大小均一的聚苯丙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被颗粒悬液，颗粒表面包被(bo bi)有兔抗人有兔抗人Mb抗体。抗体。血清样本中的血清样本中的Mb与乳胶颗粒表面的抗体结合后，与乳胶颗粒表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生浊度浊度。该浊度与样本中的。该浊
27、度与样本中的Mb浓度成正比，在浓度成正比，在570nm处测定吸光度，可计算样本中处测定吸光度，可计算样本中Mb的浓度。的浓度。第三十七页，共五十四页。【试剂与器材试剂与器材】1.试剂试剂：甘氨酸缓冲液（甘氨酸缓冲液（pH9.0），），NaN31.0g/L2.试剂试剂：致敏乳胶悬液，兔抗人肌红蛋白致敏乳胶悬液，兔抗人肌红蛋白IgG 致敏乳胶颗粒致敏乳胶颗粒(kl)，NaN31.0g/L3.校准品：校准品：Mb校准品校准品4.器材器材第三十八页，共五十四页。【实践实践(shjin)步骤步骤】1.测定条件：温度、波长、光径、时间测定条件：温度、波长、光径、时间2.操作操作加入物（加入物（ml）测定管
28、测定管标准管标准管空白管空白管试剂试剂0.20.20.2待检血清待检血清0.02-Mb校准品校准品-0.02-蒸馏水蒸馏水-0.02 混匀，混匀，37保温保温5min，空白管调零，读取各管吸光度，空白管调零，读取各管吸光度A1试剂试剂0.150.150.15 混匀，混匀，37保温保温5min，空白管调零，读取各管吸光度，空白管调零，读取各管吸光度A2第三十九页，共五十四页。【计算计算】A=A2 A1 采用非线性多点定标模式，以不同浓度标准品的采用非线性多点定标模式，以不同浓度标准品的A，绘制，绘制(huzh)标准曲线，用测定管标准曲线，用测定管A从标准曲线上从标准曲线上查出测定结果。查出测定结
29、果。【参考范围参考范围】健康成人健康成人Mb 70ug/L 建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常参考范围参考范围。第四十页，共五十四页。【注意事项注意事项】1.本试剂应避光本试剂应避光(b un)，于，于2-8可保持可保持1年，年，-20可保持更长时间，但不宜反复冻融。可保持更长时间，但不宜反复冻融。2.若用半自动、全自动生化分析仪测定应严格按照若用半自动、全自动生化分析仪测定应严格按照仪器说明书设定参数进行操作。仪器说明书设定参数进行操作。第四十一页，共五十四页。3.由于由于Mb也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏清除，
30、所以急性肌肉损伤、急性或慢性肾衰竭、严清除，所以急性肌肉损伤、急性或慢性肾衰竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起的肌病患者、肌肉注射、剧烈的锻炼、某种毒素和的肌病患者、肌肉注射、剧烈的锻炼、某种毒素和药物摄入后，药物摄入后，Mb都会升高。都会升高。因此，采用血清因此，采用血清Mb水平作为诊断水平作为诊断AMI的早期的早期指标，仅限于那些没有上述疾病的患者。要指标，仅限于那些没有上述疾病的患者。要注意注意鉴别鉴别(jinbi)Mb升高的真正原因升高的真正原因。第四十二页，共五十四页。【临床意义临床意义】血清血清Mb增高增高：见于：见于(j
31、iny)急性心肌梗死早期、急急性心肌梗死早期、急性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克等。等。血、尿中肌红蛋白均升高血、尿中肌红蛋白均升高：见于急性心肌梗死、：见于急性心肌梗死、心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病(进行性肌营养进行性肌营养不良、多发性肌炎、重症肌无力不良、多发性肌炎、重症肌无力)等。等。第四十三页，共五十四页。Mb在在AMI中的判断中的判断应应用用 (1)由于由于Mb的分子量小，可以很快从破的分子量小
32、，可以很快从破损损的的细细胞胞中中释释放出来，在放出来，在AMI发发病后病后12小小时时血中血中浓浓度迅速上度迅速上升，升，69小小时时达峰达峰值值，12小小时时内几乎所有内几乎所有AMI患者患者Mb都有升高，升高幅度都有升高，升高幅度(fd)大于各心大于各心肌肌酶酶，因此可以，因此可以作作为为AMI的早期的早期诊诊断断标标志物志物。在在AMI发发作后一天内即返回基作后一天内即返回基础浓础浓度，当有再梗死度，当有再梗死时则时则又迅速上升，形成又迅速上升，形成“多峰多峰现现象象”。第四十四页，共五十四页。(2)由于由于Mb半寿期短半寿期短(15min)，胸痛发作后，胸痛发作后612小小时不升高，
33、有助于排除时不升高，有助于排除AMI的诊断，是筛查的诊断，是筛查AMI很好的指很好的指标。标。(3)由于在由于在AMI后血中后血中Mb很快从肾脏清除，发病很快从肾脏清除，发病1830小时内可完全恢复到正常水平。故小时内可完全恢复到正常水平。故Mb测定有测定有助于在助于在AMI病程中病程中观察有无再梗塞观察有无再梗塞(gngs)或者梗塞或者梗塞(gngs)再再扩展扩展。Mb频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在。频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在。(4)Mb是溶栓治疗中是溶栓治疗中判断有无再灌判断有无再灌的较敏感而准确的较敏感而准确的指标。的指标。第四十五页，共五十四页。二、肌钙蛋白二、肌钙蛋白I测
34、定测定 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个结构不肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白）和肌钙蛋白C（cTnC）.心肌钙蛋白心肌钙蛋白T、I（CTnT、CTnI）由于分子量小，）由于分子量小，分别为分别为37000D和和24000D，所以发病，所以发病(f bng)后血中浓后血中浓度迅速升高。度迅速升高。第四十六页，共五十四页。胶乳增强透射比浊法胶乳增强透射比浊法【原理原理】应用特异的抗肌钙蛋白应用特异的抗肌钙蛋白I（抗（抗-cTnI）抗体使之与）抗体使之与胶乳颗粒表面结合，血清标
35、本与胶乳试剂胶乳颗粒表面结合，血清标本与胶乳试剂(shj)在缓冲在缓冲液中混合后，液中混合后，血清样本中的血清样本中的cTnI与乳胶颗粒表面的抗与乳胶颗粒表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生浊度应产生浊度。该浊度与样本中的。该浊度与样本中的cTnI浓度成正比，在浓度成正比，在600nm处测定吸光度，可计算样本中处测定吸光度，可计算样本中cTnI的浓度。的浓度。第四十七页，共五十四页。【试剂与器材试剂与器材】1.缓冲液：缓冲液：含增敏剂和表面活性剂，贮存于含增敏剂和表面活性剂，贮存于2-8，久置后可有部分沉淀，摇匀使用。久置后
36、可有部分沉淀，摇匀使用。2.胶乳试剂：胶乳试剂：含结合有特异抗含结合有特异抗-cTnI抗体的乳胶颗粒抗体的乳胶颗粒及叠氮钠，贮存于及叠氮钠，贮存于2-8，不可冷冻，不可冷冻(lngdng)。3.校准品：校准品：cTnI校准品校准品4.器材器材第四十八页，共五十四页。【实践步骤实践步骤(bzhu)】【计算计算】【参考范围参考范围】cTnI 0.8ug/L 建议各实验室根据自己的条件，建立本地的建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常参考范围及诊断标准。正常参考范围及诊断标准。第四十九页，共五十四页。【注意事项注意事项】1.样本可用血清或血浆（肝素抗凝），病人标本采样本可用血清或血浆（肝素抗凝）
37、，病人标本采集后需在集后需在4h内检测。标本贮存于内检测。标本贮存于2-8，可稳定，可稳定24h;-20以下冰冻可保持更长时间，但融化后必须离心，避免反以下冰冻可保持更长时间，但融化后必须离心，避免反复冻融。复冻融。2.本法本法敏感性为敏感性为0.3ug/L，线性范围可达线性范围可达25ug/L，标，标准曲线至少稳定准曲线至少稳定30d，如测定条件改变，应重新制备校准，如测定条件改变，应重新制备校准曲线。曲线。3.严重溶血或黄疸严重溶血或黄疸(hungdn)可造成负干扰可造成负干扰，血液应充，血液应充分凝固及时分离血清，以确保除去纤维蛋白和其他颗分凝固及时分离血清，以确保除去纤维蛋白和其他颗粒
38、物质。粒物质。第五十页，共五十四页。【临床意义临床意义】cTnI是心肌损伤的特异是心肌损伤的特异(ty)指标。指标。AMI发生后发生后4-8h血清中的血清中的cTnI水平即可升高，水平即可升高，12-14h达到峰值，达到峰值，6-10d恢复正常。恢复正常。即出现早，和即出现早，和CK-MB相当或稍早；消失慢，持续时间超过相当或稍早；消失慢，持续时间超过LD1，诊断的窗口期特别长，兼有诊断的窗口期特别长，兼有CK-MB和和LD1的优点。的优点。第五十一页，共五十四页。cTnI的诊断特异性优于的诊断特异性优于CK-MB和和Mb，可用评价不稳定心绞痛，可用评价不稳定心绞痛，cTnI水平水平(shup
39、ng)升高预示有较高的短期死亡危险性，升高预示有较高的短期死亡危险性，连续连续监测监测cTnI有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。第五十二页，共五十四页。在在AMI时，所有生化标志物的敏感度时，所有生化标志物的敏感度都与时间有关。都与时间有关。对于对于(duy)胸痛发作胸痛发作4h以内的患者，首以内的患者，首先应测定先应测定Mb水平；水平；3h后得到的血液标本，后得到的血液标本，应同时评价应同时评价Mb和和cTnI。所有阳性结果都可确所有阳性结果都可确认为认为AMI，所用阴性结果都可排除心肌损伤。所用阴性结果都可排除心肌损伤。第五十三页，共五十四页。内容(nirng)总结第十二章。心肌中含有诸多蛋白质，这些蛋白质在体内发挥着重要功能。慢性肺心病患者血清超氧化物歧化酶（SOD）明显升高，急性加重期患者又明显高于缓解期的病人。升高水平通常为正常的3-4倍，最高可达10倍。肌酸激酶（CK）分子是由M亚基和B亚基组成的二聚体。3.校准品：Mb校准品。故Mb测定(cdng)有助于在AMI病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。3h后得到的血液标本，应同时评价Mb和cTnI第五十四页，共五十四页。