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1、1965 年，法国科学家 Jacob 和 Mood 提出证实了操纵子作为调节细菌代谢的分子机制 1980 年,Sanger 设计出一种测定 DNA 分子内核苷酸序列的方法 1983 年，美国遗传学家 McClintock 发现可移动的遗传因子 分子生物学主要研究内容:1.重组 DNA 技术 2.基因表达调控研究 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因与生物信息学研究 1.真核细胞染色体的组成，蛋白质和 dna 2.组蛋白有如下特征（1）进化上的极端保守性（2）无组织特异性（3）肽链上氨基酸的不对称性（4）组蛋白的修饰作用 3.碱性氨基酸集中分布在 N 端的链上 4.C 值：一种生物
2、单倍体基因组 dna 的总称为 C 值。5.C 值反常现象：是指 c 值往往与种系进化的复杂程度不一致，某些低等的生物却具有较大的 C 值。6.真核细胞 DNA 序列大致可被分为三类：一 不重复序列（结构基因基本上属于不重复序列），二 中度重复系列，三高度重复系列（卫星 DNA）7.真核生物基因组的结构特点：真核基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组，真核基因组存在大量的重复序列真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要的区别真核基因组的转录产物为单顺反子真核基因是断裂基因，有内含子结构真核基因组存在大量的顺式作用元件，包括启动子，增
3、强子，沉默子真核基因组中存在大量的 DNA 多态性真核基因组具有端粒结构 多态性是指 DNA 序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异，主要包括单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP），和串联重复序列多态性(tandem repeats polymorphiem)9.端粒是真核生物线性基因组 dna 末端的一种特殊结构，它是一段 dna 序列和蛋白质形成的复合体，10.端粒酶：是逆转录酶，该酶由 RNA 及蛋白质组成，可以延长染色体上的端粒，从而增强细胞的增殖能力，端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与肿瘤的恶性
4、转化。11.原核细胞 dna 的特点：结构简练，存在转录单元，有重叠基因，12.环状 dna 双链的复制分为 0 型，滚环型，D 环型 13.单链结合蛋白（single-strand binding protein,SSB 蛋白）：保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构，它以四聚体形式存在于复制叉，待单链复制完成后才离开，重新进入循环。大肠杆菌复制起始点，不常用的称 oriH 损伤修复无差错修复【直接修复（光修复，转甲基修复）切除修复（碱基切除修复，核苷酸切除修复）错配修复】有差错修复 的转座，或称移位（transposition）:是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。17.转座子
5、（transposon,Tn）：是存在于染色体 dna 上可自主复制和位移的基本单位，18.转座子分为两大类：插入序列（insertional sequence,IS）和复合型转座子，19.转座作用的遗传学效应：转座引起插入突变，转座产生新的基因，转座产生的染色体畸变，（singel nucleotide poymorphism）单核苷酸多态性，指基因组 dna 序列中由于单个核苷酸（）的突变而引起的多态性，1.启动子（promoter）：是基因转录起始所必须的一段 DNA 序列，是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。的编辑：是某些 RNA,特别是 mRNA 前体的一种加工方式。如插入，删除。
6、或取代一些核苷酸残基，导致 DNA 所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的 mRNA 序列发生了不同于模版的变化。3.核酶：指一类具有催化功能的 RNA 分子。的再编码包括：+1、-1 移码，核糖体跳跃，终止子通读。5.核仁小 RNA(snoRNA）参与 RNA 化学修饰,snoRNA 上的 D 盒是甲基化酶的识别为点。6.核小 RNA(snRNA)与这些 RNA 相结合的核蛋白参与 RNA 的剪切。法则：多数细胞核 mRNA 前体内含子的 5边界序列为 GU,3边界序列为 AG.8.原核生物：半衰期短，以多顺反子的形式存在。真核生物：5带帽，3加尾，内含子剪切。序列(shine-dalgar
7、no sequence）：原核生物起始密码子上游 712 个核苷酸处有一被称为 SD序列的保守区。10.增强子特点：远距离效应，无方向性，顺式调节，无物种和基因的特异性，具有组织特异性，有相位性，有的增强子可以对外部信号产生反应 区：这个区的中央大约位于起点上游 10bp 处，又称-10 区。Hogness 区：位于转录起点上游-25-30bp 处的共同序列 TATAAA,也称 TATA 区。12.真核细胞 RNA 聚合酶的特性：酶 1：转录产物，45srRNA；对鹅膏蕈碱不敏感 酶 2：hnRNA,敏感 酶 3：tRNA，存在物种特异性 13.大肠杆菌 0 因子的功能：070，广泛；032，
8、热休克；054，氮代谢 RNA 聚合酶受利福平和利福霉素的抑制 14.大肠杆菌中的终止子分为：依赖于 p 因子，不依赖于 p 因子的终止 15.转录延伸过程中，可在电镜下观察到羽毛状。原因：在同一个 dna 模板上有多个转录同时进行；转录尚未完成翻译已经开始；真核生物不存在此现象 1.同工 tRNA(congnate tRNA)由于一种氨基酸可能有多个密码子，因此有多个 tRNA 来识别这些密码子，即多个 tRNA 代表一种氨基酸，我们将几个代表相同氨基酸的 tRNA 称为同工tRNA 2.蛋白质合成的各阶段：1.氨基酸的活化 2.肽链的起始 3.肽链的延伸 4.肽链的终止 5.折叠和加工 3
9、.蛋白质前体的加工：端 fMet 或 Met 的加工 2.二硫键的形成 3.特定氨基酸的修饰 4.切除新生肽链中的非功能片段 4.分子伴侣（molecularchaperone）是一类序列上没有相关性担忧共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解。分子伴侣家族（热休克蛋白.伴侣素）能在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。5.嘌呤霉素是通过提前释放肽链来抑制蛋白质合成的。6.几类主要蛋白运转机制 分泌：蛋白质在结合核糖体上合成，并翻译运转同步机制运输（免疫球蛋白 卵蛋白 激素 水解酶）细胞器发育：蛋白质在游离核糖体上合成，以翻译后运转机制运输（核、叶绿体、
10、线粒体）膜的形成 两种机制兼有（质膜 内质网 类囊体中的蛋白质）7.信号肽（signal peptide）：在起始密码子后，有一段编码疏水性氨基酸序列的 RNA 区域，这个氨基酸的序列就被称为。1.简述代谢物对基因表达调控的两种方式。答：转录水平上的调控 转录后水平上的调控，包括 mRNA 加工成熟水平上的调控)和翻译水平上的调控 2.在原核生物中营养状况和环境因素基因表达起举足轻重的作用。在真核生物中激素水平和发育阶段是基因表达调控的最主要手段。3.阻遏蛋白（repressor）起着阻止结构基因转录的作用 4.细菌应急反应:信号是鸟苷四磷酸（ppGPP）和鸟苷五磷酸（pppGpp),产生这两
11、种诱导物空载 tRNA 5.弱化子（attenuation）位于转录开始区的一种内部终止子。1.根据对刺激的反应模式，可分成组成性表达和选择性表达。2.管家基因具备以下特点 1.是细胞结构和代谢过程中所必须的基因，例如编码 rRNA、肌动蛋白、微管蛋白等的基因。2 通常能够保持较高的表达量 3、真核生物中反式作用因子的 DNA 结合结构域有螺旋转角螺旋(HTH)、碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)、锌指(zincfinger)、碱性亮氨酸拉链(bZIP)。4.根据 DNA 复性动力学，DNA 序列可以分成哪四种类型单一序列、轻度重复序列、中度重复序列、高度重复序列 5.真核生物 DNA 水平上的基因表达调控 1“开放”型活性染色质结构对转录的影响 2.基因扩增 3.基因重排与变换 常染色质基因可以转录 异染色质不可以转录 6.基因沉默(RNA silencing)是指真核生物中由双链 RNA 诱导的识别和清除细胞中非正常 RNA的一种机制，分为转录水平基因沉默（TGS）和转录后水平基因沉默（PtGS）7.真核生物基因转录后加工的多样性 1.简单转录单位 2.复杂转录单位