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1、【实 验】叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离 大通七中 杨吉祥2019年4月28日色素的提取和分离实验一、实验目的v进行绿叶中色素的提取和分离v探究绿叶中含有色素种类数目和颜色v探究不同绿叶中色素含量v培养合作和严谨的科学精神色素的提取和分离实验二、实验原理v提取提取：叶绿体色素易溶于无水乙醇（酒精、汽油、苯、石油醚等）等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。v分离分离：纸层析法 不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带。（色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散速度快，溶解度低的色素分子随层
2、析液在滤纸条上的扩散速度慢，因而可用层析液将不同的色素分离。）色素的提取和分离实验三、实验材料【实验材料实验材料】：新鲜新鲜菠菜绿叶菠菜绿叶,韭菜叶，小油菜叶，葱叶韭菜叶，小油菜叶，葱叶【实验药品实验药品】：层析液（层析液（9595号汽油），无水乙号汽油），无水乙 醇，石英砂醇，石英砂，碳酸钙碳酸钙【实验用具实验用具】：研钵研钵，药匙，纱布，小烧杯，干燥滤纸，药匙，纱布，小烧杯，干燥滤纸，剪刀，试管，毛细吸管，棉塞剪刀，试管，毛细吸管，棉塞色素的提取和分离实验提取叶绿体色素v取材取材：取新鲜菠菜叶（取新鲜菠菜叶（韭菜叶，小油菜叶，葱叶韭菜叶，小油菜叶，葱叶）5g5g，撕去叶，撕去叶脉，尽量剪碎
3、，放入研钵。脉，尽量剪碎，放入研钵。v研磨研磨：向研钵中放入少量向研钵中放入少量石英砂石英砂和和碳酸钙碳酸钙（量约为药匙的（量约为药匙的1/31/3），），加入加入6ml6ml无水乙醇无水乙醇，充分、迅速地研磨至匀浆状态。，充分、迅速地研磨至匀浆状态。v过滤过滤：在漏斗上放上在漏斗上放上1 1层滤纸，将研磨液倒入漏斗，过层滤纸，将研磨液倒入漏斗，过v滤制备得到滤液。滤制备得到滤液。【注注】p加石英砂是为了使研磨充分加石英砂是为了使研磨充分p加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏p加入加入CaCOCaCO3 3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少和石英砂的量均很
4、少，无水乙醇的量不应太少四、实验步骤色素的提取和分离实验v在滤纸片上点样在滤纸片上点样：在干燥的定性滤纸片圆心处点样在干燥的定性滤纸片圆心处点样 待滤液干后，待滤液干后，重复点样重复点样3-43-4次。次。待滤液干后，在圆心处轻轻挖一个小洞，将棉线待滤液干后，在圆心处轻轻挖一个小洞，将棉线绳轻轻穿过小洞（上面刚穿过滤纸即可）绳轻轻穿过小洞（上面刚穿过滤纸即可）分离叶绿体色素四、实验步骤色素的提取和分离实验v固定装置：固定装置：将将3 3mLmL层析液倒入培养皿中，将做好的滤层析液倒入培养皿中，将做好的滤纸片下面的棉线绳纸片下面的棉线绳放入层析液中放入层析液中，将滤纸片放在培养皿上。，将滤纸片放
5、在培养皿上。v观察现象：观察现象：10min10min后，将滤纸片上的棉线绳取出，风干。后，将滤纸片上的棉线绳取出，风干。观察色素圈及其颜色，作好记录。观察色素圈及其颜色，作好记录。【注注】p这种方法可以避免这种方法可以避免点样点样滤液滤液浸没到浸没到层析液。层析液。p层析液中一些成分易挥发，滤纸片可以充当层析液中一些成分易挥发，滤纸片可以充当皿盖，皿盖，避免层析液挥发。避免层析液挥发。分离叶绿体色素四、实验步骤1 1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的菠菜叶片。、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的菠菜叶片。2 2、研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，、研磨要快，收集的滤液
6、要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易挥发、易燃且有一定毒性）挥发、易燃且有一定毒性）3 3、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀。、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀。4 4、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。5 5、实验时保持通风，安全操作、实验时保持通风，安全操作6 6、实验注重团队合作，组员们共同完成实验。、实验注重团队合作，组员们共同完成实验。五、注意事项色素的提取和分离实验实验结果探究实验结果探究六、实验结果实验结果探究实验结果探究“叶绿素的提取与分离”实验可在哪些方面进行改进？九、课后思考