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1、第13章 厌氧性细菌（anaerobic bacteira)厌氧性细菌厌氧性细菌是是一大群专性厌氧，必须一大群专性厌氧，必须在无氧环境下才能生长的细菌。在无氧环境下才能生长的细菌。分类：分类：厌氧芽胞梭菌属厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌属无芽胞厌氧菌属 概述概述第一节 厌氧芽胞梭菌属(Clostridium)nG G+杆菌，有芽胞，抵抗力强杆菌，有芽胞，抵抗力强n在自然界（水、土等）、动物及在自然界（水、土等）、动物及人体肠道中广泛存在人体肠道中广泛存在n产生外毒素致病产生外毒素致病n除产气荚膜梭菌外均有周鞭毛，除产气荚膜梭菌外均有周鞭毛，无荚膜无荚膜共同特点共同特点 破破 伤伤 风风 梭梭 菌
2、菌 （C.tetani）n引起破伤风的病原菌引起破伤风的病原菌n大量存在于人和动物肠道中，由粪大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染土壤便污染土壤n创口感染，发病后，死亡率很高创口感染，发病后，死亡率很高一般情况一般情况n革兰染色阳性革兰染色阳性n形体细长，有芽胞，形体细长，有芽胞，芽胞正圆形，比菌体芽胞正圆形，比菌体大，位于菌体一端大，位于菌体一端n菌体菌体“鼓槌状鼓槌状”生物学性状生物学性状 形态与染色形态与染色n专性厌氧，营养要求一般专性厌氧，营养要求一般n血平板：血平板：羽毛状菌落，羽毛状菌落，溶血溶血n庖肉培养基：庖肉培养基：肉汤混浊，肉渣不肉汤混浊，肉渣不消化，微变黑，产生少量气体，
3、消化，微变黑，产生少量气体，有腐败性恶臭有腐败性恶臭生物学性状生物学性状 培养培养BBMCBBMCn繁殖体的抵抗力与其他细菌相似繁殖体的抵抗力与其他细菌相似n芽胞的抵抗力很强：芽胞的抵抗力很强：土壤中可存活数十年土壤中可存活数十年 能耐煮沸能耐煮沸1 1小时小时 生物学性状生物学性状 抵抗力抵抗力n窄而深的伤口，有泥土或异物污染窄而深的伤口，有泥土或异物污染n大面积创伤、烧伤，坏死组织多，大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部缺血局部缺血n同时伴有需氧菌、兼性厌氧菌感染同时伴有需氧菌、兼性厌氧菌感染致病性致病性 致病条件致病条件n破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素n破伤风溶血毒素破伤风溶血毒素致病性致病
4、性 致病物质致病物质n此毒素在功能和抗原性上与链球菌此毒素在功能和抗原性上与链球菌溶血素溶血素O O相似，是对氧敏感的溶血素相似，是对氧敏感的溶血素n可溶解红细胞、白细胞、血小板、可溶解红细胞、白细胞、血小板、巨噬细胞、成纤维细胞等巨噬细胞、成纤维细胞等n对破伤风病的作用尚未完全阐明对破伤风病的作用尚未完全阐明破伤风溶血毒素破伤风溶血毒素n化学本质：蛋白质化学本质：蛋白质n化学结构：化学结构：菌体内：菌体内：一条多肽链一条多肽链 菌体外：菌体外：破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素重链重链轻链轻链SS与易感细胞接合与易感细胞接合毒性部分毒性部分二硫键二硫键易感细胞：易感细胞：脊髓前角细胞及脑干神经细胞
5、脊髓前角细胞及脑干神经细胞对人的致死量是对人的致死量是1 1g g抗原性：抗原性：强，可制成类毒素；强，可制成类毒素；破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素BBMC破伤风痉挛毒素作用机制破伤风痉挛毒素作用机制n与神经细胞受体结合n n重链识别运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入重链识别运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入重链识别运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入重链识别运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入细胞内形成小泡细胞内形成小泡细胞内形成小泡细胞内形成小泡n内在化n n小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经小泡从
6、外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统n膜转位-轻链进入胞质n通过重链通过重链N端的介导产生膜的转位使轻链进入胞质溶胶端的介导产生膜的转位使轻链进入胞质溶胶n毒性作用n轻链发挥毒性作用轻链发挥毒性作用，阻止抑制性神经介质释放（如（如-氨氨基丁酸等），使肌肉活动的兴奋与抑制失调，骨髂肌出基丁酸等），使肌肉活动的兴奋与抑制失调，骨髂肌出现强直痉挛。现强直痉挛。B
7、BMC破伤风破伤风细菌在局部繁细菌在局部繁细菌在局部繁细菌在局部繁殖，释放毒素殖，释放毒素殖，释放毒素殖，释放毒素封闭抑制性突封闭抑制性突封闭抑制性突封闭抑制性突触的介质释放触的介质释放触的介质释放触的介质释放苦笑面容苦笑面容角弓反张角弓反张强直性痉挛强直性痉挛强直性痉挛强直性痉挛伸肌、屈肌同伸肌、屈肌同伸肌、屈肌同伸肌、屈肌同时强烈收缩时强烈收缩时强烈收缩时强烈收缩致病性致病性 所致疾病所致疾病末梢神经末梢神经末梢神经末梢神经淋巴液淋巴液淋巴液淋巴液血液血液血液血液脊髓前角脊髓前角脊髓前角脊髓前角 脑干脑干脑干脑干n主要是主要是抗毒素的中和作用抗毒素的中和作用n抗毒素不能阻断细胞内轻链的毒性
8、作用抗毒素不能阻断细胞内轻链的毒性作用n由于极少量毒素即可致病，但却不足以由于极少量毒素即可致病，但却不足以引起免疫，故得过破伤风后不易获得牢引起免疫，故得过破伤风后不易获得牢固的免疫力固的免疫力免疫性免疫性 体液免疫体液免疫n预防：预防：预防为主预防为主 破坏厌氧环境破坏厌氧环境 清创、扩创清创、扩创 人工主动免疫人工主动免疫 疫苗疫苗 人工被动免疫人工被动免疫 破伤风抗毒素破伤风抗毒素（TATTAT）n治疗：治疗：早期、足量使用早期、足量使用TATTAT防治原则防治原则 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 （C.perfringens）n产气荚膜梭菌是又一种广泛存在于自然产气荚膜梭菌是又一种广泛存在
9、于自然界及人和动物肠道中的厌氧芽胞梭菌界及人和动物肠道中的厌氧芽胞梭菌n与破伤风不同，除产生外毒素外，致病与破伤风不同，除产生外毒素外，致病物质还有荚膜、侵袭性酶等物质还有荚膜、侵袭性酶等n通过伤口感染，引起气性坏疽通过伤口感染，引起气性坏疽一般情况一般情况BBMC5.12汶川汶川川发现气性坏疽川发现气性坏疽58例例有有30名患者须截肢名患者须截肢(图图)2008/5/20/11:20来源：南方报业网南方都市报来源：南方报业网南方都市报作者：钟欣作者：钟欣n革兰染色阳性革兰染色阳性n粗大杆菌粗大杆菌n有芽胞，有荚膜有芽胞，有荚膜生物学性状生物学性状 形态与染色形态与染色n厌氧，但并非十分严格厌
10、氧，但并非十分严格n血平板：多数菌株有双层溶血环血平板：多数菌株有双层溶血环生物学性状生物学性状 培养培养 内层：内层：毒素；外层：毒素；外层：毒素毒素 n蛋黄琼脂平板蛋黄琼脂平板 蛋黄琼脂平板上，菌落周围因细菌蛋黄琼脂平板上，菌落周围因细菌产生产生毒素（卵磷脂酶）分解蛋黄中的毒素（卵磷脂酶）分解蛋黄中的卵磷脂而卵磷脂而出现的乳白色浑浊圈出现的乳白色浑浊圈 NaglerNagler反应：加入抗血清阻止混浊反应：加入抗血清阻止混浊 生物学性状生物学性状 培养培养n牛奶培养基：汹涌发酵牛奶培养基：汹涌发酵 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌分解乳糖产分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生酸，使酪蛋白凝固，同时
11、产生大量气体，将凝固的大量气体，将凝固的酪酪蛋白冲蛋白冲成蜂窝状，并将凡士林层向上成蜂窝状，并将凡士林层向上推挤，气势凶猛，称汹涌发酵推挤，气势凶猛，称汹涌发酵（stormy fermentationstormy fermentation）生物学性状生物学性状 培养培养牛奶培养基葡萄糖高层培养基庖肉培养基n外毒素：种类多，最重要的是外毒素：种类多，最重要的是毒素，为卵磷脂酶毒素，为卵磷脂酶毒素毒素分解细胞膜上的磷脂和蛋白质的复合物分解细胞膜上的磷脂和蛋白质的复合物溶解溶解RBCRBC、WBCWBC、BPCBPC溶血溶血溶解组织细胞溶解组织细胞血管内皮损伤血管内皮损伤组织坏死组织坏死促进血小板凝
12、集促进血小板凝集血管通透性血管通透性血栓形成血栓形成局部水肿局部水肿局部组织缺血缺氧局部组织缺血缺氧作用于心肌作用于心肌血压、心率血压、心率 休克、死亡休克、死亡（气性坏疽主要死亡原因）（气性坏疽主要死亡原因）细胞细胞加剧加剧致病性致病性 致病物质致病物质BBMC 2.2.肠毒素肠毒素 不不耐耐热热的的蛋蛋白白质质，100100瞬瞬时时即即被被破破坏坏；整整段段肽肽链链嵌嵌入入细细胞胞膜膜，破破坏坏膜膜离离子子运运输输功功能能，改改变变膜膜的的通通透透性性，引起腹泻，引起腹泻，即食物中毒即食物中毒。BBMC产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌芽胞侵入伤口，芽胞侵入伤口，局部形成厌氧微局部形成厌氧微环境环境
13、气性坏疽气性坏疽食入大量食入大量被本菌污被本菌污染的食物染的食物食物中毒食物中毒肿、痛、黑、臭肿、痛、黑、臭腹痛腹胀腹泻腹痛腹胀腹泻无恶心呕吐无恶心呕吐C C型产气型产气荚膜梭菌荚膜梭菌坏死性肠炎坏死性肠炎所致疾病所致疾病较轻，较轻，1-21-2天自愈天自愈 致病性致病性 所致疾病所致疾病n气性坏疽气性坏疽局部组织坏死、气肿、水肿局部组织坏死、气肿、水肿肿胀剧痛，触摸有捻发感肿胀剧痛，触摸有捻发感特殊的臭味特殊的臭味全身中毒全身中毒BBMC1.1.直接涂片镜检直接涂片镜检取材：创口深部取材，涂片取材：创口深部取材，涂片镜检：革兰染色，见：镜检：革兰染色，见：G G+大杆菌，有荚膜；大杆菌，有荚
14、膜；白细胞甚少且形态不典型；白细胞甚少且形态不典型；且常伴有其他杂菌污染。且常伴有其他杂菌污染。微生物学检查微生物学检查极有价值的快速诊断法，早期诊断早期诊断能避免病人截肢或死亡n分离培养与鉴定分离培养与鉴定微生物检查微生物检查 n动物实验动物实验坏死组织悬液坏死组织悬液血平板，庖肉培养基血平板，庖肉培养基注入小鼠或家兔静脉注入小鼠或家兔静脉10min10min后处死，置后处死，置37 5-8h37 5-8h动物躯体膨胀动物躯体膨胀解剖，取内脏解剖，取内脏/心血涂片镜检及分离培养心血涂片镜检及分离培养微生物检查微生物检查 n预防：预防：n治疗：治疗：1.1.无类毒素无类毒素2.2.及时扩创，破
15、坏厌氧环境及时扩创，破坏厌氧环境3.3.严密隔离病人，所用器械、敷料彻底灭菌严密隔离病人，所用器械、敷料彻底灭菌1.1.尽早手术，切除感染组织，必要时截肢尽早手术，切除感染组织，必要时截肢2.2.早期用多价抗血清，同时大剂量抗生素治疗早期用多价抗血清，同时大剂量抗生素治疗3.3.高压氧舱治疗，提高血液和组织的氧含量达高压氧舱治疗，提高血液和组织的氧含量达1515倍倍防治原则防治原则 肉肉 毒毒 梭梭 菌菌 （C.botulinum）n肉毒梭菌肉毒梭菌主要存在于土壤及海洋沉主要存在于土壤及海洋沉淀物中，偶尔存在于动物粪便中淀物中，偶尔存在于动物粪便中n通过产生剧毒的通过产生剧毒的肉毒毒素肉毒毒素
16、引起毒素引起毒素性性食物中毒食物中毒一般情况一般情况生物学性状生物学性状 形态与染色形态与染色n革兰阳性革兰阳性n粗大杆菌粗大杆菌n有芽胞，使菌体呈有芽胞，使菌体呈汤匙状或网球拍状汤匙状或网球拍状n严格厌氧，营养要求不高严格厌氧，营养要求不高n灰白色、半透明、不规则菌落，灰白色、半透明、不规则菌落，BAPBAP上上有有溶血溶血n消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭生物学性状生物学性状 培养培养肉毒毒素肉毒毒素对人致死量为对人致死量为0.1g，是目前已知，是目前已知最剧烈的毒素最剧烈的毒素肉毒毒素具有嗜神经性；肉毒毒素具有嗜神经性；主要通过消化道吸收主要通过消化道吸收作用
17、于脑及周围神经末梢的神经肌肉接头作用于脑及周围神经末梢的神经肌肉接头处，阻止处，阻止乙酰胆碱乙酰胆碱的释放，导致的释放，导致肌肉弛缓性肌肉弛缓性麻痹。麻痹。致病性致病性 致病因素致病因素细菌细菌毒素前体毒素前体细菌产生的蛋白酶细菌产生的蛋白酶肠道中的胰蛋白酶肠道中的胰蛋白酶肉毒毒素肉毒毒素重链与受体结合，轻链进入细胞，阻碍乙酰重链与受体结合，轻链进入细胞，阻碍乙酰胆碱释放胆碱释放重链重链 S S S S轻链轻链眼睑下垂眼睑下垂咀嚼困难咀嚼困难呼吸困难与衰竭呼吸困难与衰竭肉毒毒素肉毒毒素弛缓性麻痹弛缓性麻痹致病性致病性 所致疾病所致疾病1）食物中毒）食物中毒原因：n食品制作过程中被肉毒梭菌芽孢污
18、染。n制成后未彻底灭菌，芽孢在厌氧环境下繁殖产毒。n食用前又未经加热烹调。食物种类：n国外：罐头、香肠、腊肉为主。n国内：新疆较多。发酵豆制品（臭豆腐、豆瓣酱、豆鼓等）为主80%。发酵面制品（甜面酱等）占10%。症状：n潜伏期仅数小时n胃肠道症状很少见，以运动神经末梢麻痹为主要表现。n不发热，神志清楚。BBMCn婴儿肉毒病婴儿肉毒病 便闭，吮吸、啼哭无力便闭，吮吸、啼哭无力n创伤感染中毒创伤感染中毒致病性致病性 所致疾病所致疾病BBMCn预防预防 加强食品卫生管理和监督加强食品卫生管理和监督n治疗治疗 抗毒素抗毒素 对症对症防治原则防治原则 BBMC应用应用n除皱：除皱：将收缩造成皱纹的肌肉麻
19、痹掉，使肌将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉，使肌肉不收缩，连带的也去除了皱纹。肉不收缩，连带的也去除了皱纹。n瘦身：瘦身：让肥厚的肌肉不收缩，进而导致萎缩，让肥厚的肌肉不收缩，进而导致萎缩，达到瘦脸及瘦小腿的目的。达到瘦脸及瘦小腿的目的。BBMC第二节 无芽胞厌氧菌 n种类多，主要寄居在人和动物体内，占正常菌种类多，主要寄居在人和动物体内，占正常菌群的绝对优势（群的绝对优势（90%90%）n致病力弱，属条件致病菌，引起的感染无特定致病力弱，属条件致病菌，引起的感染无特定病型，大多为化脓性感染病型，大多为化脓性感染n感染特征：感染特征：1 1、组织深部感染组织深部感染2 2、脓液臭，有气泡、脓液臭，有
20、气泡3 3、分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养无细菌生长、分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养无细菌生长4 4、长期使用氨基甙类抗生素无效、长期使用氨基甙类抗生素无效一般情况一般情况n形态与染色形态与染色n培养培养球菌、杆菌、革兰阳性、阴性球菌、杆菌、革兰阳性、阴性厌氧厌氧 生物学性状生物学性状n表面结构表面结构n侵袭性酶侵袭性酶n内毒素内毒素致病性致病性 致病物质致病物质n寄居部位改变寄居部位改变n正常菌群失调正常菌群失调n机体的免疫力减退机体的免疫力减退n局部厌氧环境局部厌氧环境由于此类细菌为条件致病菌，故构成感染的条件较重要由于此类细菌为条件致病菌，故构成感染的条件较重要致病性致病性 致病
21、条件致病条件n感染无特定病型感染无特定病型n大多是化脓性感染大多是化脓性感染n感染部位可遍及全身感染部位可遍及全身n可造成败血症可造成败血症致病性致病性 所致疾病所致疾病n标本采集：标本采集：注意避开正常菌群注意避开正常菌群n直接涂片镜检：直接涂片镜检：n分离培养与鉴定：分离培养与鉴定：常用培养基：牛心脑浸液血平板常用培养基：牛心脑浸液血平板常用培养基：牛心脑浸液血平板常用培养基：牛心脑浸液血平板巯基乙酸钠培养基巯基乙酸钠培养基巯基乙酸钠培养基巯基乙酸钠培养基微生物学检查微生物学检查 n预预 防防n治治 疗疗1.1.避免正常菌群侵入不应存在的部位避免正常菌群侵入不应存在的部位2.2.避免局部厌
22、氧微环境避免局部厌氧微环境3.3.外科清创引流外科清创引流甲硝唑、氯霉素、头孢菌素敏感甲硝唑、氯霉素、头孢菌素敏感防治原则防治原则 两类厌氧菌的比较两类厌氧菌的比较厌氧芽胞梭菌厌氧芽胞梭菌无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌生生物物学学性性状状G G+，有芽胞，抵抗力强，有芽胞，抵抗力强G G+/G/G-，球菌或杆菌，无芽胞，球菌或杆菌，无芽胞分布分布自然界（水、土等）、自然界（水、土等）、动物及人体肠道中广泛动物及人体肠道中广泛存在存在 人体的正常菌群，可与需氧菌、兼人体的正常菌群，可与需氧菌、兼性厌氧菌共同存在于口腔、肠道、性厌氧菌共同存在于口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等上呼吸道、泌尿生殖道等致病因素致病因素外毒素外毒素机体免疫力低下；寄居部位改变机体免疫力低下；寄居部位改变 诊断诊断临床症状临床症状细菌分离培养细菌分离培养防治原则防治原则类毒素，抗毒素类毒素，抗毒素抗生素，提高免疫力抗生素，提高免疫力思考题思考题n厌氧芽胞梭菌的共同特性厌氧芽胞梭菌的共同特性n破伤风梭菌的形态特征破伤风梭菌的形态特征n破伤风梭菌的致病机理破伤风梭菌的致病机理n无芽胞厌氧菌的致病特点无芽胞厌氧菌的致病特点