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1、 人教版新课标2012届高考生物一轮复习 第十章 现代生物科技专题 第 39 课时 基因工程与转基因的安全性和生物武器 1(2010江苏生物，27)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：限制酶 Bam H Hind EcoR Sma 识别序 列及切 割位点 GGATCC CCTAGG AAGCTT TTCGAA GAATTC CTTAAG CCCGGG GGGCCC (1)一个图 1 所示的质粒分子经Sma 切割前后，分别含有_个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造，插入的Sma 酶切位点越多，质粒的热稳定性越_。(3)
2、用图中的质粒和外源 DNA构建重组质粒，不能使用Sma 切割，原因是_ _。(4)与只使用EcoR I 相比较，使用BamH 和Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_ _。(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_。2通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种
3、胚。请回答下列问题：(1)下列所示的黏性末端是由_种限制性核酸内切酶作用产生的。(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第 三步，即_。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过 DNA合成仪用化学方法直接_。(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是_。(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的 DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是_；其次 还 要 检 测 _，方 法 同 样 是 采 用 分 子 杂 交 技 术；最 后 检 测_，方法是_杂交。(5)人
4、们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？_ _。3 2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出绿色荧光，这样借助 GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。已知 GFP基因最初从发光水母中提取出来。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程，请分析回答：(1)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、_和_。图中过程需要的工具酶有_和_；过程常用
5、的方法是_；过程利用的生物技术是_；在进行过程前，利用_技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。(2)水母的 GFP基因之所以能“嫁接”到小鼠染色体的 DNA上，其原因是_。GFP基因进入小鼠受精卵内，且能在其内维持稳定和表达的过程称为_。(3)GFP基因有时还可与其他目的基因一起构建到载体上，不影响目的基因的表达，且对细胞无毒害作用，因此 GFP基因可以作为基因表达载体上的_。(4)目前科学家们通过_工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是直接改造 GFP分子，还是改造 GFP基因？_。4 降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。
6、某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条 72 个碱基的 DNA单链，两条链通过 18 个碱基对形成部分双链 DNA片段，再利用 Klenow酶补平，获得双链 DNA，过程如图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：(1)Klenow酶是一种_酶，合成的双链 DNA有_个碱基对。(2)获得的双链 DNA经EcoR(识别序列和切割位点GAATTC)和Bam H(识别序列和切割位点GGATCC)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA测序验证。大肠杆菌
7、是理想的受体细胞，这是因为它_ _。设计EcoR和BamH双酶切的目的是_ _。要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_。(3)经 DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_。(4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_。5 基因工程又叫基因拼接技术。(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的_为模板，_成互补的单链 DNA，然后在酶的作用下合成_。(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、_。(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基
8、因片段混合，并加入 DNA连接酶。连接产物至少有_种环状 DNA分子，它们分别是_ _。把重组质粒导入细菌细胞时一般用_处理以增加细菌细胞壁的通透性。(4)假如把抗虫基因导入棉花的一个叶肉细胞中，为了避免造成基因污染你认为应该把目的基因连接在_(“核基因”或“质基因”)中。6 应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。请据图回答下列问题：(1)在培育转基因牛的过程中，过程需要的工具酶是_，过程常用的方法是_。(2)转基因牛可通过分泌乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_，它是_识别和结合点部位。过程培养到桑椹胚或囊胚
9、阶段，可以采用_技术，培育出多头相同的转基因牛犊。(3)PrG基因的产物能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，最可能是_细胞，代表的细胞具有_的特点。(4)在抗虫棉培育过程中，将目的基因导入棉花受体细胞采用最多的方法是_法。过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是_，过程采用的技术是_。7 据报道，美国佛罗里达大学的亨利丹尼尔教授利用基因工程，研制出转基因莴苣，可用其中的有效药物成分制造胰岛素胶囊来治疗糖尿病。如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：(1)过程需要的酶有_。(2)为了便于筛选，质粒 A 上应具有_。(3)接受
10、重组质粒的受体细胞 C1可能有三种情况：如果受体细胞是土壤农杆菌，则导入它的目的是为了_，以便于得到大量的含目的基因的土壤农杆菌，然后用土壤农杆菌侵染受体细胞 C2，受体细胞 C2可以是_或其他细胞，然后应用组织培养技术，经_和_过程，形成转基因莴苣。(4)这种药物是从转基因莴苣中提取制得的，也必须制成粉末状，装入胶囊后才能使用，因为服用剂量必须仔细加以控制。如果服用的量太大，可能导致患者出现_症状。8 如图是某种动物蛋白质工程的示意图，请分析回答：(1)目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号_所示的过程，实现过程的依据 有_ _。(2)若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质获取的，则过程包括_、_。
11、(3)过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是_，进行过程的目的是_。(4)为获得较多的受精卵用于研究，过程的处理方案是_。若过程所 得 的 卵 母 细 胞 是 从 卵 巢 中 获 得 的，则 体 外 受 精 前 的 过 程 表 示_。答案 1.(1)0、2(2)高(3)Sma会破坏质粒的抗性基因、外源 DNA中的目的基因(4)质粒和含目的基因的外源 DNA片段自身环化(5)DNA连接(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 2.(1)4(2)将目的基因导入受体细胞 人工合成(3)质粒(其他合理答案也可)(4)DNA分子杂交技术 目的基因是否转录出了 mRNA 目的基因是否翻译成蛋白质 抗原抗体(5)
12、会影响食物安全。理由是：担心出现滞后效应；担心出现新的过敏原；担心营养成分改变等。不会影响食物安全。理由是：多环节、严谨的安全性评价；科学家的负责态度可防止过敏源出现；至今未发现转基因食物影响健康的实例等 3.(1)GFP基因 终止子(两空顺序可以颠倒)限制性核酸内切酶 DNA连接酶(两空顺序可以颠倒)显微注射法 早期胚胎培养技术(或：细胞培养技术)胚胎分割(2)GFP基因和小鼠 DNA分子的空间结构、化学组成相同 转化(3)标记基因(4)蛋白质 改造 GFP基因 4.(1)DNA聚合 126(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 保证目的基因和载体的定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生
13、的末端发生任意连接)标记基因(3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象(4)蛋白质工程 5.(1)信使 RNA(mRNA)逆转录(反转录)双链 DNA(目的基因)(2)动、植物细胞(3)3 运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状 DNA分子 氯化钙(4)质基因 6.(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 显微注射法(2)启动子 RNA聚合酶 胚胎分割移植(3)浆 既能无限增殖又能产生特定抗体(4)农杆菌转化 全能性高 植物组织培养 7.(1)同一种限制酶和 DNA连接酶(2)标记基因 (3)重组质粒的筛选与扩增 植物细胞(答成体细胞或具体的植物细胞或受精卵都可以)脱分化 再分化(4)低血糖 8.(1)氨基酸对应的密码子、mRNA与 DNA的模板链间的碱基互补配对原则(2)逆转录 诱导突变(3)限制酶 使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用(4)用促性腺激素进行超数排卵 在体外人工培养至减数第二次分裂中期