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1、专题课题菊花的组织培养ppt第1页，本讲稿共34页课题1 菊花的组织培养第2页，本讲稿共34页 在无菌和人工控制条件下，在无菌和人工控制条件下，将将离体离体的植物器官、组织、细胞，的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，培养在人工配制的培养基上，给予给予适宜适宜的培养条件，的培养条件，诱导其产生诱导其产生愈伤组织、丛芽愈伤组织、丛芽，最终形成最终形成完整的植株完整的植株。植物组织培养的概念是什么？植物组织培养的概念是什么？第3页，本讲稿共34页1.脱分化：脱分化：由由 的植物组织或细胞的植物组织或细胞 产生产生 的过程。的过程。2.愈伤组织：愈伤组织：细胞排列细胞排列 而无规则，是一
2、种而无规则，是一种 的呈的呈 的的 。3.再分化：再分化：脱分化产生的脱分化产生的 继续培养，继续培养，重新分化出重新分化出 或或 等器官的过程。等器官的过程。4.植物组织培养的理论基础：植物组织培养的理论基础：植物细胞的植物细胞的 。高度分化高度分化 愈伤组织愈伤组织 疏松疏松高度液泡化高度液泡化无定形状态无定形状态 薄壁细胞薄壁细胞愈伤组织愈伤组织 根根 芽芽 全能性全能性自学活动（阅读教材自学活动（阅读教材32页）页）第4页，本讲稿共34页一、基础知识一、基础知识（一）植物组织培养的基本过程一）植物组织培养的基本过程第5页，本讲稿共34页由高度分化的植物组织或由高度分化的植物组织或细胞产
3、生愈伤组织的过程细胞产生愈伤组织的过程第6页，本讲稿共34页细胞排列细胞排列疏松疏松而而无规则无规则，是一种是一种高度液泡化高度液泡化的呈的呈无定形状态的无定形状态的薄壁细胞薄壁细胞。第7页，本讲稿共34页我就是我就是愈伤组织哦！愈伤组织哦！第8页，本讲稿共34页 愈伤组织愈伤组织（脱分化）（脱分化）根或芽等器官根或芽等器官第9页，本讲稿共34页（1）不同的植物组织）不同的植物组织（二）影响植物组织培养的因素（二）影响植物组织培养的因素（2）同一植物的不同材料）同一植物的不同材料 菊花的组织培养，菊花的组织培养，一般选择未开花植株一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧的茎上部新萌生的侧枝。枝。1
4、、植物材料的选择、植物材料的选择第10页，本讲稿共34页2、相对特殊的营养、环境等条件，适宜的培、相对特殊的营养、环境等条件，适宜的培养基养基MS培养基主要成分包括：培养基主要成分包括：大量元素大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S等等微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等等有机物有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素植物激素第11页，本讲稿共34页 你能说出各种营养物质的作用吗？同专题你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方培养基的配方有哪些明显的不同？有哪
5、些明显的不同？讨论讨论第12页，本讲稿共34页 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。营养需求。微生物培养基以有机营养为主，微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和量无机营养，无机盐混合物包括
6、植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。微量元素两大类。第13页，本讲稿共34页3、植物激素、植物激素常用的植物激素：常用的植物激素：常用的植物激素：常用的植物激素：生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素和赤霉素等。和赤霉素等。和赤霉素等。和赤霉素等。生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素作用：作用：启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在在生长素生长素存在的情况下，存在的情况下，细胞分裂素细胞分裂素的作用呈现的作用呈现加强加强的趋势。的趋势。第14页，本讲稿共34页（1）不同植物
7、激素使用顺序）不同植物激素使用顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素，先生长素，后细胞分裂素后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素，先细胞分裂素，后生长素后生长素 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用 分化频率提高分化频率提高 第15页，本讲稿共34页（2）不同植物激素使用量）不同植物激素使用量生长素生长素/细胞分裂素比值细胞分裂素比值结果结果 比值高时比值高时 促根分化，促根分化，抑芽形成抑芽形成 比值低时比值低时 促芽分化，促芽分化，抑根形成抑根形成 比值适中比值适中 促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长 第16页，本讲稿共34页4、其
8、他因素、其他因素菊花组织培养：菊花组织培养：pH控制在控制在5.8左右，温度控制在左右，温度控制在1822每日用日光灯照射每日用日光灯照射12h pHpH、温度、光照等、温度、光照等、温度、光照等、温度、光照等第17页，本讲稿共34页练一练：练一练：A.A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞胞B.B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C.C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程产生愈伤组织的过程D.D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程取植物的枝芽培育成一株新植物
9、的过程1.1.植物组织培养过程中的脱分化是指植物组织培养过程中的脱分化是指第18页，本讲稿共34页2 2、愈伤组织最突出的特点是、愈伤组织最突出的特点是A.A.细胞大，排列整齐，分裂能力强细胞大，排列整齐，分裂能力强B.B.细胞高度液泡化，处于无定形状态细胞高度液泡化，处于无定形状态C.C.代谢活跃，形态呈正方形代谢活跃，形态呈正方形D.D.分裂能力强，易形成根和芽分裂能力强，易形成根和芽第19页，本讲稿共34页A A离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B B愈伤组织培育成植株愈伤组织培育成植株C C离体的植物器官、组织或细胞培养成完整离体的植物器官、组织或细胞
10、培养成完整植物体植物体D D愈伤组织形成高度液泡化组织愈伤组织形成高度液泡化组织3 3、植物组织培养是指、植物组织培养是指第20页，本讲稿共34页一、制备一、制备MS固体培养基固体培养基 1、配制母液、配制母液 2、配制培养基、配制培养基 四、培养四、培养 五、移栽五、移栽 六、栽培六、栽培二、实验操作二、实验操作3 3、灭菌、灭菌三、接种三、接种配制配制配制配制MSMSMSMS培基：培基：培基：培基：调节调节调节调节pHpHpHpH；分装。；分装。；分装。；分装。由于菊花的茎段由于菊花的茎段的组织培养比较容易，的组织培养比较容易，因此不必添加植物激因此不必添加植物激素。素。（高压蒸气灭菌）（
11、高压蒸气灭菌）（高压蒸气灭菌）（高压蒸气灭菌）二、外植体消毒二、外植体消毒第21页，本讲稿共34页选取生长旺盛的菊花茎段嫩枝选取生长旺盛的菊花茎段嫩枝刷洗刷洗流水冲洗流水冲洗20min吸干表面水分吸干表面水分70的酒精消毒的酒精消毒67s无菌水清洗无菌水清洗吸干表面水分吸干表面水分0.1的氯化汞溶液的氯化汞溶液 12min无菌水清洗无菌水清洗3次次第22页，本讲稿共34页在植物组织培养的过程中，在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？并且要求无菌操作？小组合作探讨小组合作探讨2 2第23页，本讲稿共34页植物组织培养所利用的植物
12、材料体积小、植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高：抗性差，对培养条件的要求较高：u用于植物组织培养的培养基同样适合于用于植物组织培养的培养基同样适合于 某些微生物的生长，某些微生物的生长，消耗了营养物质消耗了营养物质；u微生物产生的代谢废物会微生物产生的代谢废物会毒害培养的对象毒害培养的对象；u培养物一旦受到微生物的污染，培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃；就会导致实验前功尽弃；因此要进行严格的无菌操作。因此要进行严格的无菌操作。第24页，本讲稿共34页一、制备一、制备MS固体培养基固体培养基 1、配制母液、配制母液 2、配制培养基、配制培养基二、外植
13、体消毒二、外植体消毒四、培养四、培养五、移栽五、移栽六、栽培六、栽培实验操作实验操作3 3、灭菌、灭菌三、接种三、接种第25页，本讲稿共34页结果分析与评价结果分析与评价1、对接种操作中、对接种操作中污染情况污染情况的分析的分析2、是否完成对植物组织的、是否完成对植物组织的脱分化和再分化脱分化和再分化3、是否进行了、是否进行了统计、对照与记录统计、对照与记录4、生根苗的、生根苗的移栽移栽是否合格是否合格第26页，本讲稿共34页课题延伸课题延伸探究植物激素的使用比例探究植物激素的使用比例（A=生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素）对植物组织培养的影响对植物组织培养的影响 例如：设计对照实验例如：设
14、计对照实验 （1）不加植物激素）不加植物激素 （2）A1 （3）A1 （4）A1第27页，本讲稿共34页1下列四个选项中，下列四个选项中，肯定没有采用植物组织培养技术的一项是（肯定没有采用植物组织培养技术的一项是（）A花药离体培养得到单倍体植株花药离体培养得到单倍体植株 B秋水仙素处理萌发的种子秋水仙素处理萌发的种子 或幼苗得到多倍体植株或幼苗得到多倍体植株 C基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株 D细胞工程培育细胞工程培育“番茄马铃薯番茄马铃薯”杂种植株杂种植株第28页，本讲稿共34页2在植物组织培养中，在植物组织培养中，切取胡萝卜的外植体时一般选择（切取胡萝卜的
15、外植体时一般选择（）A具有木质部的部分具有木质部的部分 B具有韧皮部的部分具有韧皮部的部分 C具有形成层的部分具有形成层的部分 D具有髓的部分具有髓的部分第29页，本讲稿共34页3菊花的花粉经组织培养可发育成一株幼苗，菊花的花粉经组织培养可发育成一株幼苗，这一过程不涉及下列哪一项（这一过程不涉及下列哪一项（）A有丝分裂、细胞分化、组织器官的形成有丝分裂、细胞分化、组织器官的形成 B呼吸作用、光合作用、相关激素的调控呼吸作用、光合作用、相关激素的调控 CDNA的复制、转录、蛋白质的生物合成的复制、转录、蛋白质的生物合成 D等位基因的分离、非等位基因的自由组合等位基因的分离、非等位基因的自由组合第
16、30页，本讲稿共34页4某花卉感染了植物病毒，叶子呈现疱状，欲培某花卉感染了植物病毒，叶子呈现疱状，欲培 养出无病毒的后代，应采取的方法是（养出无病毒的后代，应采取的方法是（）A用种子培养后代用种子培养后代 B用无明显症状部分的枝扦插用无明显症状部分的枝扦插C用茎尖进行组织培养诱导出植株用茎尖进行组织培养诱导出植株D用叶表皮细胞进行组织培养，诱导出植株用叶表皮细胞进行组织培养，诱导出植株第31页，本讲稿共34页5下列关于影响植物组织培养的因素的叙述下列关于影响植物组织培养的因素的叙述 不正确的是（不正确的是（）A幼嫩组织较成熟组织易培养成功幼嫩组织较成熟组织易培养成功B给外植体消毒用给外植体消
17、毒用70%的酒精的酒精C接种花药后一段时间内不需要光照，接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照但幼小植株形成后需要光照D生长素与细胞分裂素含量之比较高时生长素与细胞分裂素含量之比较高时 有利于芽的分化有利于芽的分化第32页，本讲稿共34页6乙醇等乙醇等“绿色能源绿色能源”的开发备受关注，利用玉米秸秆等生的开发备受关注，利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成大势所趋。植物组织培养可实现玉米等的大产燃料酒精已成大势所趋。植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖，图解如上，由外植体通过植物组织培养技术规模快速繁殖，图解如上，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株，培育成完整植株，这项技术利用了这项技术利用了 原理，原理，通过组织培养技术进行植物繁育，通过组织培养技术进行植物繁育，可以很好地保持亲本的优良性状，可以很好地保持亲本的优良性状，原因是原因是 A、B分别代表分别代表 和和 ，过程过程、分别表示分别表示 和和 。植物细胞全能性植物细胞全能性 子代遗传物质与亲代相同，子代遗传物质与亲代相同，不会像有性生殖一样出现不会像有性生殖一样出现性状分离性状分离 愈伤组织愈伤组织 胚状体胚状体 脱分化脱分化 再分化再分化 第33页，本讲稿共34页第34页，本讲稿共34页