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1、（一）、温度、PH 对酶活性的影响 一、实验目的 了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适 PH 及掌握一种检测最适 PH 的方法。二、实验原理 三、实验步骤 1、温度对酶活性的影响 取 3 支试管，编号后按下表加入试剂 试剂 试管编号 1 2 3%淀粉溶液 稀释唾液/ml 1 1 无 煮沸过的稀释唾液/ml 无 无 1 摇匀后，将 1、3 号两试管放入 37 摄氏度恒温水浴中，2 号试管放入冰水中。10min 后取出，将 2 号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验 1、2、3 号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。将 2 号试管剩下的一半溶液放入 37 摄氏度水浴中继续保温 10min
2、 后，再用碘液检验，结果如何记录并解释结果。注意事项：1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，1min后，使其流入量筒，并稀释到 50ml。2、PH 对酶活性的影响 取 4 个标有号码的 20ml 试管。用吸管按下表添加 L 磷酸氢二钠溶液和 L 柠檬酸溶液以制备 PH=的 4 种缓冲液。试剂 试管编号 1 2 3 4 L 磷酸氢二钠/ml L 柠檬酸/ml PH 5 8 从 4 个试管中各取缓冲液 3ml，分别注入到 4 支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加%淀粉溶液 2ml 和稀释唾液 2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为 1min。将各试管内容物混
3、匀，并依次置于 37 摄氏度恒温水浴中保温。第四管加入唾液 2min 后，每隔 1min 由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加 1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1 或 2 滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为 1min。观察各试管内容物呈现的颜色，分析 PH 对唾液淀粉酶活性的影响。注意事项：1、从第三管中取混合液，是因为它的 PH 接近唾液淀粉酶的最适 PH。2、间隔 1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各试管反应时间相同。四、实验结果 1、温度 1 2 3 浅蓝 一半暗褐 一半浅蓝
4、深蓝 2、PH 1 2 3 4 深蓝 浅蓝 浅紫 深紫 分析：酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适温度为 37 摄氏度。低温抑制酶的活性，高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。PH 也能影响酶的活性，在最适 PH 下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾液淀粉酶的最适 PH 为。（二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 一、实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。二、实验原理 三、实验步骤 取 4 支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。试剂 试管编号 1 2 3 4%淀粉溶液/ml 1%CuSO4 溶液/ml 无 无 无 1%Nacl 溶液/ml 无 无 无 1%Na2SO4 溶液/ml 无 无 无 蒸馏水/ml 无 无 无 稀释唾液/ml 37 摄氏度恒温水浴 5min 碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2 四、实验结果 1 2 3 4 深蓝 浅蓝 中蓝 中蓝 分析：酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。加入 Na2SO4 是为了消除 Na+和 SO42-对酶活性的影响。