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1、交叉配血试验标准操作规程（微柱凝胶抗人球蛋白法）1.目的 为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据输血实验室管理程序的要求制定本规程。2.适用范围 适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。3.职责 医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。4.原理 红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积
2、于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。5.所需设备和试剂 普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡 6.检测环境条件 室湿应控制在 1827，湿度应保持 30%70%。7.操作步骤 先将供（受）血标本制备%红细胞低离子介质（LIM）悬液。撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者%红细胞 LIM 悬液 100l，加入受（供）血者血浆或血清25l（或 50l）。将检测卡 37孵育 15min 取出，置离心机 1800r/min 离心 1min,2500r/min离心1min。取出，判定结果，结果判定标准
3、按下表：（可参照结果判定示图）阳性 4+表示 RBC 绝大部份凝聚于凝胶表层 3+表示 RBC 多数凝聚于凝胶表层，少数 RBC 凝集颗粒悬浮于近胶表层 2+表示部份 RBC 沉积于胶底，部分 RBC 凝集颗粒悬浮于凝胶中 1+表示 RBC 多数沉积于胶底，可见少数 RBC 凝集颗粒悬浮于凝胶中 表示 RBC 绝大多数沉积于胶底，极少数 RCB 凝集颗粒悬浮于近胶底 dcp 表示混合凝集外观，部份 RBC 凝集颗粒集结于凝胶表层，部分 RBC 沉于胶底 PH 表示部分溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中有残留 RBC H 表示完全溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中无 RBC 阴性 表
4、示 RBC 全部沉积于胶底 检验结果的解释：阳性结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不完全抗体 IgG 或完全抗体 IgM），供受血者血液不相容。阴性结果，表示供受血者血液相容。8.质量控制 微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。试剂质量控制方法 即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于 2 个反应腔中分别加入已致敏IgG 抗 D 的 1%O 型 RhD(+)红细胞 LIM 悬液 50l、健康者 1%O 型 RhD(+)红细胞LIM 悬液 50l。将检测卡于离心机 1800r/min 离心 1min,2500r/min 离心 1min。取出，结果判定同 9.注意事项 检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室平衡至室温。检测卡试验前，应 3000r/min 离心 1min，正立放置待用。如因运输过程产生的气泡，可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡，使气泡漂移至胶面为止，3000r/min 离心 2min。细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血，可产生假阳性。离心速度过快，时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。10.相关文件 中山市生科试剂仪器有限公司抗人球蛋白检测卡说明书