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1、- - word.zl-文件名穿插配血试验标准化操作规程聚凝胺法编制人审核人批准人批准日期修改日期签字修改日期签字复审日期签字复审日期签字- - word.zl-穿插配血试验标准化操作规程聚凝胺法一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血平安，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进展穿插配血试验。二、方法采用聚凝胺介质试管法；三、原理聚凝胺法第一步采用低离子强度溶液降低红细胞和抗体反响介质的离子强度， 从而减少了红细胞周围的阳离子云，促进带正电荷的IgG 抗体与带负电荷的红细胞发生反响，这样大大加快了抗原和抗体反响的速率。第二步
2、通过参加聚凝胺来促使红细胞产生可逆性的非特异性凝聚。聚凝胺是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物，可以中和红细胞外表的负电荷，使红细胞的Zeta 电位降低，从而产生红细胞可逆性的聚集， 缩短红细胞之间的距离， 让 IgG 抗体可直接引起红细胞凝聚。第三步参加重悬液，重悬液可中和聚凝胺的作用。可区分由聚凝胺诱发的红细胞之间的非特异性凝聚与由抗原抗体反响所致的特异性凝聚。四、适用范围适用于输血前需进展穿插配血试验的血液及血液成分。五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂- - word.zl-1、试剂名称：快速聚凝胺试剂盒2、试剂生产厂家： XX 贝索生物技术 XX；3、批准文号：国食药监械准
3、字2009第 3400076号；4、包装规格 (盒)：4.1低离子强度溶液 LIM49ml2；4.2聚凝胺溶液 (Polybrene Solution) 15ml1；4.3重悬液 (Resuspending Solution) 15ml1；4、贮藏条件； 2-8避光保存。5、有效期：自检定合格之日起2 年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血 (EDTA 抗凝剂:血液=1:10)。2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。3、标本储存和运输：新鲜血28贮存时间不超过72小时。4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。八、操作步骤1、收集标本，严格进展查对无误后，
4、别离血清浆。2、取 10mmx60mm干净小试管 2 支，分别标明主次侧管。3、主次侧管参加受供血者血清浆1 滴，加供受血者 3-5%红细胞悬液 1 滴。4、向各管加低离子强度溶液0.7ML，混匀，静置 30-60秒；5、向各管加聚凝胺溶液1 滴，混匀， 3000r/min 离心 15 秒，轻- - word.zl-轻摇均，肉眼可见明显的凝集状如无凝集须重做；6、向各管中加重悬液1 滴于管底，轻轻摇起观察结果。 1 分钟内凝集消失呈均匀混悬液， 如反响很弱，应镜下观察并与阴性对照比拟。镜下无凝集红细胞为阴性，1 分钟内凝集不消失，既为阳性，7、阴性结果说明受血者与献血者血型相合；阳性结果说明受
5、血者与献血者血型不相合九、质量控制1、此检测工程应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩合格；2、每日做室内质量控制，且要求在控。3、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，防止笔误等引起的过失。4、穿插配血标本应在28保存留一周，以备复查。十、生物参考区间相合，不相合。十一、考前须知与干扰因素1、本方法可结合盐水介质穿插配血相合后进展临床发血。2、穿插配血标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；3、穿插配血试验血样要求是输血前3 天内的血样预防受血者在输血前的3 个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规那么抗体 。- - wor
6、d.zl-4、标本血液离体后要求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d，每次检测后受血者和供血者的血标本应在28保存 7 天；5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、 PVP 等治疗，应注意将红细胞洗涤； 如果受者使用肝素治疗， 那么应用硫酸鱼精蛋白对抗，使样本凝结；7、穿插配血试验不相合时应注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别，可结合盐水介质穿插配血试验镜下观察或离心去上清液后重悬观察。8、抗体筛选试验阴性，而穿插配血结果阳性，提示有未检测明的同种抗体存在。9、穿插配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。10、注意穿插配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例；11、血清或血浆中如含有溶血性抗体，那么相应红细胞被溶解而不凝集，穿插配血结果阳性，如排除标本中补体干扰因素的影响，可来活后重新试验。12、注意在室温反响中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体，应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。十二、参考文献1、胡丽华主编，临床输血检验，第1 版。中国医药科技， 2004 ；2、叶应妩，等主编，全国临床检验操作规程，第3 版。东南大学，- - word.zl-2006 ，11；3、安万新主编 ,输血技术学 ,第 1 版.科学技术文献， 2006,9 ；4、聚凝胺试剂盒说明书。