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1、实验七实验七 荧光显微镜的使用及观察荧光显微镜的使用及观察 一、实验目的与要求：一、实验目的与要求：了解荧光显微镜的构造及其维护方法。掌握荧光显微镜的使用方法和使用中的注意事项。学习胼脂质荧光的观察方法。二、实验材料和仪器：二、实验材料和仪器：荧光显微镜、镊子、解剖针、盖玻片、载玻片、脱色苯胺蓝染色液、蒸馏水、拟南芥开花植株。三、实验内容与方法：三、实验内容与方法：1.观察荧光显微镜的结构、练习使用荧光显 微镜。2.花粉四分体胼胝质壁的观察。3.花粉粒在柱头上的萌发和花粉管的生长。四、作业：四、作业：1、描述在荧光显微镜下所观察到的实验现象。2、绘拟南芥花粉四分体的形态图。激发滤片激发滤片型号
2、型号允许通过的波长允许通过的波长配用的阻断滤片配用的阻断滤片应用应用UVUV365W365W410W410W硫代黄素荧光硫代黄素荧光染色和染色和FITCFITCV V410410420W420W460W460W单胺荧光单胺荧光BVBV404404435W435W515W515W、530W530W吖啶橙吖啶橙B B490W490W515W515WFITCFITC和金胺和金胺G G520520550W550W580W580WTRITCTRITC和佛根和佛根反应荧光染色反应荧光染色荧光显微镜的配套滤片荧光显微镜的配套滤片 荧光显微镜使用方法荧光显微镜使用方法 1 1打开灯源，超高压汞灯要预热几分钟才
3、能达打开灯源，超高压汞灯要预热几分钟才能达 到最亮点。到最亮点。2 2用低倍镜白光观察，调整光源中心，使其位用低倍镜白光观察，调整光源中心，使其位 于整个照明光斑的中央。于整个照明光斑的中央。3 3选择合适的激发光和滤光片。选择合适的激发光和滤光片。4 4观察。观察。使用中应注意：末装滤光片不要用眼直接观使用中应注意：末装滤光片不要用眼直接观 察，以免引起眼的损伤；用油镜观察标本时，必察，以免引起眼的损伤；用油镜观察标本时，必须用无荧光的特殊镜头油；须用无荧光的特殊镜头油；汞灯使用注意事项汞灯使用注意事项 a.a.汞灯接通电源后需要汞灯接通电源后需要10-1510-15分钟预热，汞才能充分汽化
4、分钟预热，汞才能充分汽化并形成汞弧，产生高亮度而稳定的激发光。并形成汞弧，产生高亮度而稳定的激发光。b.b.在汞灯使用过程中，不要随意开关汞灯的电源。在汞灯使用过程中，不要随意开关汞灯的电源。c.c.关掉汞灯电源后，必须等待关掉汞灯电源后，必须等待15-2015-20分钟待汞灯自燃冷却后分钟待汞灯自燃冷却后才可再次接通电源，违反这一操作规定时，将会造成严才可再次接通电源，违反这一操作规定时，将会造成严重后果！（轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈，重后果！（轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈，重则汞灯爆炸）重则汞灯爆炸）d.d.汞灯的使用寿命一般只有汞灯的使用寿命一般只有300300小时，使用得当可达小时，使用得当可达600600小小时，使用寿命与开关的次数成反比，样品应集中观察。时，使用寿命与开关的次数成反比，样品应集中观察。花粉小孢子花粉小孢子四分体四分体水溶性苯胺蓝染色液水溶性苯胺蓝染色液拟拟南南芥芥花花粉粉在在柱柱头头上上的的萌萌发发授粉后10-30分钟的拟南芥柱头、水溶性苯胺蓝染色液