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1、关于杂环类药物的分析关于杂环类药物的分析(6)第一页，本课件共有72页l杂环杂环含有非碳原子的环状有机物，常见有含有非碳原子的环状有机物，常见有氧、氮和硫等原子。氧、氮和硫等原子。l杂环类药物的分类是根据杂原子的种类（氧氮杂环类药物的分类是根据杂原子的种类（氧氮硫）和数目、环的元数（常见的五元环、六元硫）和数目、环的元数（常见的五元环、六元环和七元环等）和环数（常见环和七元环等）和环数（常见1 1、2 2和和3 3环等）环等）而进行。而进行。l教材中介绍了教材中介绍了吡啶类吡啶类、喹啉类喹啉类、托烷类托烷类、酚噻酚噻嗪类嗪类和和苯骈二氮杂卓苯骈二氮杂卓类五种药物的结构、鉴类五种药物的结构、鉴别
2、和含量测定方法。别和含量测定方法。第二页，本课件共有72页吡啶类吡啶类喹啉类喹啉类托烷类托烷类酚噻嗪类酚噻嗪类苯骈二氮杂卓类苯骈二氮杂卓类杂杂环环类类药药物物有机有机酸酯酸酯第三页，本课件共有72页吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析典典型型药药物物异烟肼异烟肼尼可刹米尼可刹米硝苯地平硝苯地平 1.结结 构构烟酸、维生素烟酸、维生素B3B3 第四页，本课件共有72页 2.官能团与分析方法官能团与分析方法开环反应开环反应Br2CNBrH2OAr-NH2黄棕色黄棕色NaOH 固OH乙醇紫红紫红N3 N5弱碱性：弱碱性：可与重金属离子生可与重金属离子生 BCuSO4NH4SCNB Cu（SCN）2BHg
3、Cl2BHgCl2白白弱碱性杂环类原料药多采用弱碱性杂环类原料药多采用非水碱量法进行含量测定。非水碱量法进行含量测定。还原性还原性 H2NNH2AgNO3AgNO3Ag缩合反缩合反应应异烟腙异烟腙（黄色结晶）（黄色结晶）mp228231Cp.Bp.用作用作鉴别鉴别 鉴别鉴别鉴别鉴别 l（1）溴酸钾法：在强）溴酸钾法：在强酸溶液，利用氢溴酸的氧酸溶液，利用氢溴酸的氧化性和异烟肼的还原性进化性和异烟肼的还原性进行反应。行反应。l（2）剩余碘量法：利用）剩余碘量法：利用碘的氧化性和异烟肼的还碘的氧化性和异烟肼的还原性。原性。戊烯二醛二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应银镜银镜成不溶性盐成不溶性盐 鉴别鉴别2
4、2绿绿尼可刹米 二乙胺配位物，吡啶配位物，吡啶奈醌磺酸奈醌磺酸定定量量第五页，本课件共有72页第六页，本课件共有72页第七页，本课件共有72页I2(the excess)+2Na2S2O3(VS)2NaI+Na2S4O6异烟肼的含量测定方法异烟肼的含量测定方法21.本法简便本法简便,但因碘氧化力较弱但因碘氧化力较弱,反应不反应不 易完全。常因反应时间、温度不同有易完全。常因反应时间、温度不同有 所差异所差异2.用于制剂分析时用于制剂分析时,含有还原性赋形剂时有干扰；含有还原性赋形剂时有干扰；3.化学计量关系：化学计量关系：(1:4)0.1mol/L I23.429mg C6H7N3第八页，本课
5、件共有72页异烟肼的含量测定方法The indicator was oxidized into colorless by bromine.T=3/2MW0.01667=3/2137.145/300 5/200=3.429(mg/ml)2 2第九页，本课件共有72页 1.缓缓缓缓滴滴定定并并充充分分振振摇摇,防防止止局局部部浓浓度度过过高高终终点点提前；提前；2.到到终终点点后后,补补加加一一滴滴指指示示剂剂,如如颜颜色色褪褪去去即即可可,否否则未到终点；则未到终点；第十页，本课件共有72页3.特殊杂质检查特殊杂质检查 l异烟肼中游离肼的检查异烟肼中游离肼的检查l异烟肼是一种不稳定的药物，其中的
6、游离肼是由制备时原料引入，或在贮存过程中降解而产生。而肼又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典多数规定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常用的方法有薄层色谱法，（CP）比浊法（JP）P.200。第十一页，本课件共有72页 CP 薄层色谱法进行异烟肼中游离肼的检查薄层色谱法进行异烟肼中游离肼的检查0.02%第十二页，本课件共有72页 喹琳类药物分子结构中含有吡喹琳类药物分子结构中含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，环上啶与苯稠合而成的喹啉杂环，环上杂原子的反应性能基本与吡啶相同。杂原子的反应性能基本与吡啶相同。喹啉类药物喹啉类药物的分析的分析第十三页，本课件共有72页 硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸
7、奎尼丁硫酸奎尼丁 1.结结 构构典型药物典型药物其结构分为喹啉环和喹啉碱两个部分，各含一个氮原子，喹啉环含芳香族氮，碱性其结构分为喹啉环和喹啉碱两个部分，各含一个氮原子，喹啉环含芳香族氮，碱性较弱；喹啉碱含脂环氮，碱性强。较弱；喹啉碱含脂环氮，碱性强。左旋体左旋体右旋体右旋体喹啉碱立体结构不同喹啉碱立体结构不同H2SO42H2OH2SO42H2O第十四页，本课件共有72页第十五页，本课件共有72页盐酸环丙沙星盐酸环丙沙星HCLH2O其中环丙沙星与盐酸成盐其中环丙沙星与盐酸成盐第十六页，本课件共有72页 2.官能团与分析方法官能团与分析方法碱性：喹核碱含脂环氮，碱碱性：喹核碱含脂环氮，碱性强，可
8、与强酸形成稳定的性强，可与强酸形成稳定的盐（硫酸盐）盐（硫酸盐）在水溶液中在水溶液中能完成二级电离，生成能完成二级电离，生成SO42-。含量测定时不同的。含量测定时不同的条件下反应进行的程度不同，条件下反应进行的程度不同，滴定度不同滴定度不同碱性：喹啉环系芳环氮，碱性较弱，碱性：喹啉环系芳环氮，碱性较弱，不能直接与硫酸成稳定的盐，不能直接与硫酸成稳定的盐，而与喹核碱可与二元硫酸成盐。而与喹核碱可与二元硫酸成盐。旋光性：硫酸奎宁为左旋体，其比旋旋光性：硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为度为-237至至-244；硫酸奎尼丁为右旋；硫酸奎尼丁为右旋体，其比旋度为体，其比旋度为275至至290；而盐；而盐酸
9、环丙沙星无旋光性酸环丙沙星无旋光性绿奎宁反应（绿奎宁反应（Thalleioquin)经氯化反应，再以氨水处理，经氯化反应，再以氨水处理，生成绿色的二醌基吲胺的铵盐生成绿色的二醌基吲胺的铵盐6绿色绿色兰色兰色中性中性红色红色酸性酸性转入醇、转入醇、氯仿中氯仿中荧光特性荧光特性 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光，而盐酸环丙沙星则无荧光。中均显蓝色荧光，而盐酸环丙沙星则无荧光。鉴别鉴别鉴别鉴别含量测定含量测定鉴别鉴别第十七页，本课件共有72页 硫酸奎宁硫酸奎宁 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为1 3 加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后
10、滴定加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后滴定 硫酸奎宁硫酸奎宁 反应摩尔比为反应摩尔比为1 2 碱化、有机溶剂提取后，碱化、有机溶剂提取后，HClO4滴定时，反应摩尔比为滴定时，反应摩尔比为1 4 第十八页，本课件共有72页硫酸奎宁片硫酸奎宁片 ChP（2000）取取本本品品 10 片片，除除去去糖糖衣衣后后，精精密密称称定定，研研细细，精精密密称称取取适适量量（约约相相当当于于硫硫酸酸奎奎宁宁 0.3g），置置分分液液漏漏斗斗中中，加加氯氯化化钠钠0.5g 与与 0.1mol/L 氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液 10ml，混混匀匀，精精密密加加氯氯仿仿50ml，振振摇摇10min，静置，分取氯仿液，用干燥
11、滤纸滤过。，静置，分取氯仿液，用干燥滤纸滤过。第十九页，本课件共有72页精精密密量量取取续续滤滤液液25ml，加加醋醋酐酐5ml 与与二二甲甲基基 黄黄 指指 示示 液液2滴滴，用用 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1mo1/L）滴滴定定，至至溶溶液液显显玫玫瑰瑰红红色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每1ml 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1 mol/L）相相 当当 于于19.57mg的（的（C20H24N2O2）2 H2SO42H2O。分子量：分子量：782.96第二十页，本课件共有72页光谱特征光谱特征 1.1.紫紫外外吸吸收收光光谱谱特特
12、征征 中中国国药药典典采采用用本本法法鉴鉴别别盐盐酸环丙沙星。酸环丙沙星。鉴鉴别别方方法法：取取本本品品，加加0.0.1 1 mol/Lmol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1 1 mlml中中含含8ug8ug的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法测测定定，在在277nm277nm与与315mn315mn的波长处有最大吸收。的波长处有最大吸收。2.2.红红外外吸吸收收光光谱谱特特征征 硫硫酸酸奎奎宁宁和和盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在中中国国药药典典均均采采用用红红外外光光谱谱的的方方法法进进行行鉴别。鉴别。第二十一页，本课件共有72页 硫酸奎宁中特殊杂质硫酸奎宁中特殊杂质 根根据据硫硫酸酸奎奎
13、宁宁的的合合成成工工艺艺，产产品品中中特特殊殊杂杂质质主主要要是是合合成成中中产产生生的的中中间间体体以以及及副副反反应应产产物，通过检查物，通过检查 3.特殊杂质检查特殊杂质检查酸度酸度氯仿氯仿-乙醇中不溶物乙醇中不溶物其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱第二十二页，本课件共有72页酸度酸度 本项检查主要控制药物中的本项检查主要控制药物中的酸性杂质酸性杂质。奎宁和奎尼丁奎宁和奎尼丁的碱性不同，奎尼的碱性略大于奎尼丁，其饱和水溶液的的碱性不同，奎尼的碱性略大于奎尼丁，其饱和水溶液的PH为为8.8。氯仿一乙醇中不溶物氯仿一乙醇中不溶物 本项检查主要控制药物在制备过本项检查主要控制药物在制备过程中引入的醇中不
14、溶性杂质或无机盐类等。程中引入的醇中不溶性杂质或无机盐类等。奎宁在氯仿奎宁在氯仿-无水乙醇无水乙醇(2:1)的混合液中的混合液中易溶，易溶，奎尼丁在乙奎尼丁在乙醇中易溶。醇中易溶。检查方法：取本品约检查方法：取本品约20mg，加水，加水20m1溶解后，用酸度计进行测定，溶解后，用酸度计进行测定，pH值应为值应为5.7一一6.6。检查方法：取本品检查方法：取本品2克，加氯仿克，加氯仿-无水乙醇无水乙醇(2:1)的混合液的混合液15m1，在，在50度加热度加热l0min后，用已称定重量的垂熔坩锅（垂熔玻璃滤器）滤过，滤渣用上述混合液分后，用已称定重量的垂熔坩锅（垂熔玻璃滤器）滤过，滤渣用上述混合液
15、分5次洗涤，次洗涤，每次每次10 ml，在，在105度干燥至恒重，遗留残渣不得超过度干燥至恒重，遗留残渣不得超过2mg。第二十三页，本课件共有72页其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱 本本项项检检查查主主要要控控制制硫硫酸酸奎奎宁宁中中其其他他生生物物碱碱，因因其其化化学学结结构构不不十十分分明明确确，没没有有合合适适的的对对照照品品，因因此此采用薄层色谱中的高低浓度对比法进行检查。采用薄层色谱中的高低浓度对比法进行检查。检查方法：取本品，加稀乙醇制成检查方法：取本品，加稀乙醇制成 l0mg/1mll0mg/1ml溶液溶液 供试品溶液；供试品溶液；50ug/1ml50ug/1ml溶液溶液 对照溶液对照溶
16、液。TLC法法检查方法：检查方法：同一硅胶同一硅胶G薄层板上，以氯仿薄层板上，以氯仿-丙酮丙酮-二乙胺（二乙胺（5：4:1.25）为展开剂，展开）为展开剂，展开后，微热使展开剂挥散，喷以碘铂酸钾试液使显色。供试品溶液如显杂质斑后，微热使展开剂挥散，喷以碘铂酸钾试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。第二十四页，本课件共有72页盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查 盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的特特殊殊杂杂质质，通通过过酸酸度度、溶溶液液的的澄澄清清度度与与颜颜色色、
17、有有关关物物质质等等项项目目的的检查进行控制。检查进行控制。盐酸环丙沙星有关物质盐酸环丙沙星有关物质 本项检查主要控制盐酸环丙沙星在生产和贮藏过程中可本项检查主要控制盐酸环丙沙星在生产和贮藏过程中可能引人结构不清的有关杂质，采用能引人结构不清的有关杂质，采用HPLC法中归一化法法中归一化法进行进行检查。检查。第二十五页，本课件共有72页 色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L枸橼酸溶枸橼酸溶液液-乙睛（乙睛（82:18）用三乙胺调节）用三乙胺调节pH值值3.5为流动相；检测波长为为流动相；检测波
18、长为277nm理论板数按盐酸环丙沙星峰计算应不低于理论板数按盐酸环丙沙星峰计算应不低于2000，盐酸环丙，盐酸环丙沙星峰与相邻杂质峰的分离度应符合规定。沙星峰与相邻杂质峰的分离度应符合规定。测定方法：测定方法：取本品适量，加水制成每取本品适量，加水制成每1 ml中含中含0.4mg的溶液，取的溶液，取20ul注入液相色谱仪，调节检测灵敏度和记录仪衰减，使主成分注入液相色谱仪，调节检测灵敏度和记录仪衰减，使主成分的峰高为记录仪满量程的的峰高为记录仪满量程的20%一一25%倍，记录时间应为主成分峰倍，记录时间应为主成分峰保留时间的保留时间的2倍。按面积归一化法计算，杂质总量不得超过倍。按面积归一化法
19、计算，杂质总量不得超过1.5。第二十六页，本课件共有72页 托烷类药物大多数是由莨菪烷衍生的氨托烷类药物大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱，常见基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱，常见的有颠茄生物碱和古柯生物碱，。现以典型药的有颠茄生物碱和古柯生物碱，。现以典型药物硫酸阿托品和氢溴酸东莨菪碱为例进行其性物硫酸阿托品和氢溴酸东莨菪碱为例进行其性质与分析的讨论。质与分析的讨论。托烷类药物托烷类药物分析分析第二十七页，本课件共有72页 1.结结 构构典型药物典型药物第二十八页，本课件共有72页碱性碱性 五元脂环上含有叔胺氮原子，有五元脂环上含有叔胺氮原子，有较强的碱性，如阿托
20、品的较强的碱性，如阿托品的pKb为为4.35易与酸成盐，易与酸成盐，与生物碱沉淀剂形成沉淀。与生物碱沉淀剂形成沉淀。HgL2 阿托品阿托品旋光性不对称碳原子，有旋光性东莨菪碱旋光性不对称碳原子，有旋光性东莨菪碱呈左旋体。比旋度为呈左旋体。比旋度为-240至至-270，阿托品因，阿托品因外消旋化外消旋化而为消旋体，无旋光性。利用此性质可区别阿托品与东而为消旋体，无旋光性。利用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。莨菪碱。区别区别水解性水解性 阿托品和东莨菪碱分子结构中，具有酯的结构，阿托品和东莨菪碱分子结构中，具有酯的结构，易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇（易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇（I）
21、和）和莨菪莨菪酸酸（II）P.209 2.官能团与分析方法官能团与分析方法Vitaili反应反应氧化反应氧化反应鉴别鉴别阿托品阿托品东莨菪碱东莨菪碱用四苯硼钠滴定用四苯硼钠滴定硫酸根氢溴酸根的反应硫酸根氢溴酸根的反应含量测定含量测定鉴别鉴别鉴别鉴别第二十九页，本课件共有72页鉴鉴别别方方法法：取取供供试试品品约约10mg,10mg,加加发发烟烟硝硝酸酸5 5滴滴，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，得得黄黄色色的的残残渣渣，放放冷冷，加加乙乙醇醇2 2一一3 3滴滴湿湿润润，加加固固体体氢氢氧氧化化钾钾一小粒，即显深紫色一小粒，即显深紫色。Vitaili反应反应醌式结构醌式结构第三十页，本课件共有72页
22、莨莨菪菪酸酸可可与与硫硫酸酸和和重重铬铬酸酸钾钾在在加加热热的的条条件件下下，发发生生氧氧化化反反应应，生生成成苯苯甲甲醛醛，而而逸逸出出类类似似苦苦杏杏仁的臭味仁的臭味。氧化反应氧化反应第三十一页，本课件共有72页硫酸盐与溴化物反应硫酸盐与溴化物反应 硫硫酸酸阿阿托托品品的的水水溶溶液液，加加氯氯化化钡钡试试液液，即即生生成成白白色色沉沉淀淀，沉沉淀淀在在盐盐酸酸或或硝硝酸酸中中均均不不溶溶解解；加加醋醋酸酸铅铅试试液液，也也生生成成白白色色沉沉淀淀，但但沉沉淀淀在在醋醋酸酸胺胺或或氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中溶溶解解。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱的的水水溶溶液液，加加硝硝酸酸银银试试液液，
23、即即生生成成淡淡黄黄色色凝凝乳乳沉沉淀淀，沉沉淀淀能能在在氨氨试试液液中中微微溶溶，但但在在硝硝酸酸中中几几乎乎不不溶溶；滴滴加加氯氯试试液液，溴溴即即游游离离，加加氯氯仿仿振振摇摇，氯仿层显黄色或红棕色。氯仿层显黄色或红棕色。第三十二页，本课件共有72页氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱是是从从茄茄科科植植物物颠颠茄茄、白白曼曼陀陀罗罗、莨莨菪菪等等植植物物中中提提取取得得到到的的莨莨菪菪碱碱的的氢氢溴溴酸酸盐盐。我我国国是是从从茄茄科科植植物物白白曼曼陀陀罗罗的的干干燥燥品品（洋洋金金花花）中中提提取取东东莨莨菪菪碱碱，然然后后制制成成氢氢溴溴酸酸盐盐。根根据据其其制制备备工工艺艺，本本品品在在
24、生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中可可能能引引人人的的特特殊殊杂杂质质，通通过对过对 氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查酸度酸度其他生物碱其他生物碱易氧化物易氧化物检查进行控制检查进行控制第三十三页，本课件共有72页酸度酸度 东东莨莨菪菪碱碱碱碱性性很很弱弱，对对石石蕊蕊试试纸纸几几乎乎不不显显碱碱性性反反应应。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱为为强强酸酸弱弱碱碱形形成成的的盐盐，通通过过其其5%5%水溶液的水溶液的pHpH值为值为4.0-5.54.0-5.5，来控制本品中的酸性杂质。，来控制本品中的酸性杂质。检查方法：取本品检查方法：取本品0.l0g，加水，加水2m1溶解后，分成
25、两等溶解后，分成两等份：一份中加氨试液份：一份中加氨试液2一一3滴，不得发生浑浊；另一份中加滴，不得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。第三十四页，本课件共有72页其他生物碱其他生物碱 本本品品的的水水溶溶液液加加入入氨氨试试液液不不得得发发生生混混浊浊。当当有有其其他他生生物物碱碱，如如阿阿扑扑阿阿托托品品、颠颠茄茄碱碱存存在在时时，则则产产生生混混浊浊；本本品品水水溶溶液液加加入入氢氢氧氧化化钾钾试试液液，则则有有东东莨莨菪碱析出显浑浊。菪碱析出显浑浊。因东莨菪碱在碱性条件下水解，生成异东莨菪碱因东莨菪碱在碱性
26、条件下水解，生成异东莨菪碱醇和莨菪酸，前者在水中易溶；后者生成碱式盐在水醇和莨菪酸，前者在水中易溶；后者生成碱式盐在水中也能溶解，故可使瞬即发生的浑浊消失。中也能溶解，故可使瞬即发生的浑浊消失。第三十五页，本课件共有72页易氧化物易氧化物 主主要要是是检检查查本本品品在在生生产产过过程程中中可可能能引引入入的的杂杂质质阿阿扑扑阿阿托托品品及及其其它它含含有有不不饱饱和和双双键键的的有有机机物物质质，可使高锰酸钾溶液褪色。可使高锰酸钾溶液褪色。检查方法：取本品检查方法：取本品0.15g，加水，加水5m1溶解后，在溶解后，在5一一20 加高锰酸钾滴定液（加高锰酸钾滴定液（0.02mo1/L)0.0
27、5 ml，l0min内红色不得完全消失。内红色不得完全消失。第三十六页，本课件共有72页 是离子对提取技术与比色法相结合形成的一种定量方法是离子对提取技术与比色法相结合形成的一种定量方法.对于弱碱性对于弱碱性的药物的药物托烷类托烷类(莨菪烷莨菪烷)可以选择合适的条件进行分析可以选择合适的条件进行分析.机理（以弱碱性药物为例）：机理（以弱碱性药物为例）：BHBHBHInIn HIn H分取有机层分取有机层比色测定比色测定碱化碱化,使使In游离游离,比色测定比色测定.实验条件的选择实验条件的选择 水相的水相的PH,要求要求B BHIn,H对二个平衡都有影响对二个平衡都有影响,H是是 多好还是少好？
28、多好还是少好？BHIn定量定量 酸性染料比色法酸性染料比色法阿托品阿托品pKb=4.35有机相有机相水相水相第三十七页，本课件共有72页 B H BH HIn H InKb=BHBHKa=HInHInBH=In KbBH=Ka HInHH2=Ka HInKbBPH=1/2（）Ka HInKbB理想情况理想情况则则 式中四个数在具体实验中是已知的式中四个数在具体实验中是已知的,故可求出最佳故可求出最佳PH.第三十八页，本课件共有72页 （1）酸性染料酸性染料：常用酸性染料有溴百里酚兰、溴酚兰、溴甲常用酸性染料有溴百里酚兰、溴酚兰、溴甲 酚紫、溴甲酚绿、甲基橙、金莲橙酚紫、溴甲酚绿、甲基橙、金莲橙
29、00、铬天青铬天青S、四溴酚酞乙酯、苦味酸。四溴酚酞乙酯、苦味酸。有机相：有机相：缓冲溶液：缓冲溶液：脱水：脱水：条条 件件 优优 化化第三十九页，本课件共有72页酸性染料比色法测定盐酸利多卡酸性染料比色法测定盐酸利多卡 因注射液含量因注射液含量l盐酸利多卡因是一种临床常用的局部麻醉用盐酸利多卡因是一种临床常用的局部麻醉用l因其紫外吸收系数很低因其紫外吸收系数很低,直接采用紫外分光光度法则灵敏度很低。中国药典直接采用紫外分光光度法则灵敏度很低。中国药典 2000 年版二部年版二部 采用液相色谱法和电位滴定法做为其制剂含量测定采用液相色谱法和电位滴定法做为其制剂含量测定,上述方法在上述方法在医院
30、快速检测时医院快速检测时,很难达到其要求件。盐酸利多卡因的结构类似生物碱很难达到其要求件。盐酸利多卡因的结构类似生物碱,可可与酸性染料在一定的与酸性染料在一定的pH 条件下条件下,定量络合定量络合,产生有色络合物产生有色络合物,并能被适当的并能被适当的有机溶剂完全萃取有机溶剂完全萃取,络合物的颜色强度与溶液中的盐酸利多卡因的含量络合物的颜色强度与溶液中的盐酸利多卡因的含量成正比成正比,符合比尔定律。形成高灵敏的可见光吸收符合比尔定律。形成高灵敏的可见光吸收,本法具有高灵敏度和准本法具有高灵敏度和准确性确性,方便快速。在方便快速。在pH 为为6.86 介质中介质中,溴百里酚蓝与盐酸利多卡因以溴百
31、里酚蓝与盐酸利多卡因以5 1 生成有色络合物生成有色络合物,于于 415nm 波长处波长处,测吸收度。结果盐酸利多卡因浓测吸收度。结果盐酸利多卡因浓度在度在 3.0 15ugmL 内符合比尔回归方程为内符合比尔回归方程为:A=0.0557C+010334,r=0.9995,平均回收率为平均回收率为100.4%。第四十页，本课件共有72页l1.测定方法按一定比例准确移取盐酸利多卡因标准溶液和溴百里酚测定方法按一定比例准确移取盐酸利多卡因标准溶液和溴百里酚l蓝缓冲溶液蓝缓冲溶液,置于预先精密加入置于预先精密加入 10mL 氯仿的氯仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,振摇振摇l 2m in,分取
32、氯仿层分取氯仿层,以空白试剂以空白试剂(即不含盐酸利多卡因即不含盐酸利多卡因)同法操作为空白同法操作为空白,分别测定其氯分别测定其氯仿液的吸收度。仿液的吸收度。l2.波长的选择精密量取波长的选择精密量取 1.5mL 盐酸利多卡因标准溶液盐酸利多卡因标准溶液,和和pH 值为值为 6.86 的溴百里的溴百里酚蓝缓冲溶液酚蓝缓冲溶液2.0mL,置于预先精密加入置于预先精密加入 10mL 氯仿的氯仿的 125mL 分分l液漏斗中液漏斗中,按上述方法操作按上述方法操作,分别在波长分别在波长 370nm470nm 处处,测定吸收度测定吸收度,结果结果(见图见图1)。415nm由图由图 可知可知,在在415
33、nm 波长处有最大吸收峰波长处有最大吸收峰,在在420nm 波长以后波长以后,吸收度急剧下降吸收度急剧下降,不不易作为测定的波长易作为测定的波长,故选择故选择 415nm 为测定波长。为测定波长。第四十一页，本课件共有72页l3最佳最佳pH 值的选择精密量取值的选择精密量取 1.5mL 盐酸利多卡因标准溶液盐酸利多卡因标准溶液,和和pH 为为 4.00、6.86、8.00、9.18、12.00 的溴百里酚蓝缓冲溶液的溴百里酚蓝缓冲溶液 2.0mL,置于预先精密加入置于预先精密加入 10mL 氯仿的氯仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,按上述方法操作按上述方法操作,在波长在波长 415nm
34、处处,测定吸收处测定吸收处,结果见图结果见图l 6.86l由图由图 2 可知可知,在在pH 为为 6.86 的条件下有最大的吸收值的条件下有最大的吸收值,即能使盐酸利多卡因与溴百即能使盐酸利多卡因与溴百里酚蓝定量结合后完全转溶于有机相里酚蓝定量结合后完全转溶于有机相,又能将过量溴百里酚蓝完全保留在水相。又能将过量溴百里酚蓝完全保留在水相。pH 值过低值过低,抑制了溴百里酚蓝的解离抑制了溴百里酚蓝的解离;pH 过高过高,利多卡因游离利多卡因游离,与溴百里酚蓝结合的盐酸利与溴百里酚蓝结合的盐酸利多卡因的浓度降低多卡因的浓度降低,从而使有机相的吸收度降低。所以从而使有机相的吸收度降低。所以,用溴百里
35、酚蓝性染料比色法测定盐用溴百里酚蓝性染料比色法测定盐酸利多卡因含量酸利多卡因含量,选用溶液选用溶液pH 为为 6.87.0。实验时采用。实验时采用6.86。pHA第四十二页，本课件共有72页l4溴百里酚蓝的用量选择在溴百里酚蓝的用量选择在pH 为为 6.86 的介质中的介质中,考察溴百里酚蓝的用量考察溴百里酚蓝的用量对吸光度的影响。当溴百里酚蓝与盐酸利多卡因的质量比分别为对吸光度的影响。当溴百里酚蓝与盐酸利多卡因的质量比分别为 1 1、2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 1 时时,于于 415nm 波长处测定吸收度见图。波长处测定吸收度见图。由图由图 3 可知可知,质量比超过质量比超过
36、 4 1 时时,吸收度基本保持恒定。所以吸收度基本保持恒定。所以,溴百里酚蓝与盐酸利多溴百里酚蓝与盐酸利多卡因的质量比不能低于卡因的质量比不能低于4 1。5盐酸利多卡因波度吸收度的线性方程精密量取盐酸利多卡因标准溶液盐酸利多卡因波度吸收度的线性方程精密量取盐酸利多卡因标准溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,分别置于分别置于 个预先精密加入个预先精密加入 氯仿的氯仿的 分分5.0mL 125mL液漏斗中液漏斗中 分别精密加分别精密加入入 为为 溴百里酚蓝溶溴百里酚蓝溶,pH 6.86液液 2.0mL,振摇振摇 2m in,分取氯仿层分取氯仿层,同法做空白同法做空白,在在415nm 波长处
37、测定氯仿吸收度波长处测定氯仿吸收度,结果盐酸利多卡因结果盐酸利多卡因-1浓度在浓度在3.0 15.0g/mL,线性线性关系良好关系良好,回归方程为回归方程为A=0.0557C+0.0334,相关系数相关系数 r=0.9995。A质量比质量比1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1第四十三页，本课件共有72页6回收率测定按盐酸利多卡因注射液处方回收率测定按盐酸利多卡因注射液处方,用已知含量的盐酸利多卡因用已知含量的盐酸利多卡因原料配制原料配制 3 种不同浓度的盐酸利多卡因模拟溶液各种不同浓度的盐酸利多卡因模拟溶液各 3 份份,精密量取模拟溶液精密量取模拟溶液各各 3.0mL,置置
38、100mL 容量瓶容量瓶,用水稀释至刻度用水稀释至刻度,摇匀摇匀,精密量取精密量取 5.0mL,置置 50mL 量瓶中量瓶中,精密量取精密量取2.0mL 置于预先精密加入置于预先精密加入 10mL 氯仿的氯仿的 125mL 分液漏斗中分液漏斗中,精密加入精密加入 pH 为为 6.86 的溴百里酚蓝的溴百里酚蓝2.0mL,振摇振摇 2m in,分取氯分取氯仿层仿层,同法做空白同法做空白,在在415nm 波长处测定氯仿液的吸收度波长处测定氯仿液的吸收度,代入回归方程代入回归方程,计计算回收率算回收率,结果结果(见表见表 1),平均回收率为平均回收率为 100.4%,RSD 为为1.0%。第四十四页
39、，本课件共有72页 酚噻嗪类药物的分析酚噻嗪类药物的分析 1.结结 构构第四十五页，本课件共有72页l结构特点：结构特点：l母核母核2位上的位上的R2取代基，通常为取代基，通常为lH、Cl、CF3、COCH3、SCH2CH3等；等；l10位上的位上的R1取代基，则为具有取代基，则为具有2-3个碳链的二甲或个碳链的二甲或二乙胺基，或为含氮杂环如二乙胺基，或为含氮杂环如哌嗪和哌啶哌嗪和哌啶的衍生物等，的衍生物等，由于其氮多为叔氮有较强的碱性由于其氮多为叔氮有较强的碱性可与盐酸成盐。临可与盐酸成盐。临床上使用的本类药物多为其盐酸盐。床上使用的本类药物多为其盐酸盐。第四十六页，本课件共有72页第四十七
40、页，本课件共有72页奋乃静奋乃静第四十八页，本课件共有72页 紫外与红外吸收光谱紫外与红外吸收光谱 含含S、N的三环共轭的大的三环共轭的大 体系，体系，S、N与苯环与苯环 形成形成p-共轭形成具有特征的紫外吸收光谱。共轭形成具有特征的紫外吸收光谱。主要由主要由母核三环的母核三环的系统系统所产生，一般具有所产生，一般具有三个峰三个峰 即在即在 204209nm（205nm附近）附近）250265nm（254nm附近）附近）300325nm（300nm附近）附近）最强峰多在最强峰多在 250265nm。药典用于鉴别药典用于鉴别第四十九页，本课件共有72页200 300254205300325 紫外
41、吸收光谱受取代基的影响，特别是紫外吸收光谱受取代基的影响，特别是S被氧被氧化的程度不同，有不同的改变，在紫移的同时在化的程度不同，有不同的改变，在紫移的同时在270附近产生一新的吸收。紫外吸收用于鉴别附近产生一新的吸收。紫外吸收用于鉴别270成为四个峰成为四个峰第五十页，本课件共有72页第五十一页，本课件共有72页奋乃静奋乃静 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品，加无水乙醇制成每）取本品，加无水乙醇制成每1ml 中中含含 7 g 的的溶液，照分光光度法（附录溶液，照分光光度法（附录A）测定，在测定，在 258nm 的波长处有最大吸收，吸收的波长处有最大吸收，吸收度约为度约为0.65。（3
42、）本品的红外吸收图谱应与对照的图）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集谱（光谱集 243 图）一致图）一致 奋乃静奋乃静 鉴别鉴别（1）取本品）取本品 5mg，加盐酸与水各，加盐酸与水各 1ml，加热至，加热至80，加入过氧化氢溶液数滴，加入过氧化氢溶液数滴，即显深红色；放置后，红色渐褪去。即显深红色；放置后，红色渐褪去。第五十二页，本课件共有72页第五十三页，本课件共有72页2.官能团与分析方法官能团与分析方法可被氧化为可被氧化为亚砜和砜亚砜和砜，氧化剂可以是，氧化剂可以是HNO3、H2SO4、H2O2不同的氧化剂，不同不同的氧化剂，不同的样品产生不同的颜色的样品产生不同的颜色鉴别，产物
43、复杂鉴别，产物复杂。其中。其中HNO3伴有沉淀；伴有沉淀；H2O2仅能氧仅能氧化奋乃静红色不稳定。化奋乃静红色不稳定。噻嗪中的噻嗪中的S是一良好的电子给予体，分二周期给出四个电子，每周期二个电子，而是一良好的电子给予体，分二周期给出四个电子，每周期二个电子，而紫外吸收光谱随紫外吸收光谱随S被氧化在被氧化在335355nm产生新的吸收被用于制剂（片、栓、注射剂、产生新的吸收被用于制剂（片、栓、注射剂、糖浆剂）的含量测定（示差法）。糖浆剂）的含量测定（示差法）。铈量法（铈量法（Ce（SO4）2）测定含量）测定含量 失失1e 红色红色，再失再失1e 无色。无色。T=？（原料药）钯离子比色法钯离子比色
44、法 仅未受氧化的仅未受氧化的 S 能与能与Pd+2生成红色的配合物生成红色的配合物，可选择测量未被氧化的，可选择测量未被氧化的药物。药物。PdCl2PH=2A500nm（50ug150ug/1ml）R1取代基为取代基为 有碱性有碱性,可用非水滴定法定量可用非水滴定法定量.、非水滴定条件的控制：盐酸盐要加非水滴定条件的控制：盐酸盐要加Hg（AC）2除去除去Cl 的影响的影响.对于加对于加Hg（AC）2产生红色的药物产生红色的药物,(氯丙嗪氯丙嗪)可加入可加入Vc 来消除来消除.制剂中（注射剂）加有抗氧剂制剂中（注射剂）加有抗氧剂NaHCO3 须要须要NaOHCHCl3提提取取脱水脱水T不同的氧化
45、剂产生不同的颜色不同的氧化剂产生不同的颜色 没有很专属性的反应，鉴别要配合没有很专属性的反应，鉴别要配合IR、UV含含量测定利用其还原性和取代基的碱性量测定利用其还原性和取代基的碱性 2.官能团与分析方法官能团与分析方法第五十四页，本课件共有72页红色红色 500nm10分钟反应完全，呈色可稳定分钟反应完全，呈色可稳定2小时，测定范围小时，测定范围50250微克微克讨论：讨论：1.钯离子试剂：钯离子试剂：PdCl2和十二烷基硫酸酯钯盐和十二烷基硫酸酯钯盐.用用PdCl2时，形成的有色络合物水中溶时，形成的有色络合物水中溶 解度小解度小,当样品浓度大时会产生沉淀影响测定。当样品浓度大时会产生沉淀
46、影响测定。十二烷基硫酸酯钯盐十二烷基硫酸酯钯盐,其络合物溶解度大其络合物溶解度大,吸收强度增大（约吸收强度增大（约2倍）对样品浓度大倍）对样品浓度大 时应使用该试剂。时应使用该试剂。2.本法优点：氧化产物不干扰。本法优点：氧化产物不干扰。第五十五页，本课件共有72页苯骈二氮杂卓类药物的分析苯骈二氮杂卓类药物的分析典典 型型 药药 物物 1.结结 构构第五十六页，本课件共有72页 氯氮卓（1955年合成）地西泮（1959年合成）典型药物典型药物第五十七页，本课件共有72页 2.官能团与分析方法官能团与分析方法二氮杂卓环为七元环，环上氮原子具有二氮杂卓环为七元环，环上氮原子具有强碱性，苯基的取代使
47、碱性降低，可进强碱性，苯基的取代使碱性降低，可进行非水滴定法测定；本品多为游离碱，行非水滴定法测定；本品多为游离碱，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。UV吸收，用于吸收，用于含量测定含量测定环比较稳定，在强酸性下水解，形环比较稳定，在强酸性下水解，形成相应的二苯甲酮衍生物，可用于成相应的二苯甲酮衍生物，可用于鉴别和比色测定。（氯氮卓水解生鉴别和比色测定。（氯氮卓水解生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）；胺基和甘氨酸）；鉴别鉴别芳伯胺基反应：芳伯胺基反应：氯氮卓水解生成芳伯胺基氯氮卓水解生成芳伯胺基(重重氮化偶合反应氮
48、化偶合反应 鉴别鉴别茚三酮反应：茚三酮反应：地西泮水解生成甘氨酸（茚三地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反应）酮反应）鉴别鉴别硫酸荧光反应：硫酸荧光反应：本类药物本类药物加硫酸，加硫酸，在紫外灯下，呈荧光在紫外灯下，呈荧光 鉴别鉴别定量定量第五十八页，本课件共有72页 在非水溶剂中进行的滴定分析方法在非水溶剂中进行的滴定分析方法称为非水滴定法。称为非水滴定法。非水溶剂：指的是有机溶剂与不含水的非水溶剂：指的是有机溶剂与不含水的 有机溶剂。有机溶剂。非非 水水 滴滴 定定 法法 (nonaqueous titrations)第五十九页，本课件共有72页l非水溶剂有异味、有毒、而且价格又贵，为何发展非水
49、溶剂有异味、有毒、而且价格又贵，为何发展非水滴定法？非水滴定法？l原因一：许多物质在水中原因一：许多物质在水中Ka 或或Kb小于小于10-7，l 不能在水中滴定。不能在水中滴定。l l 二：许多有机物在水中基本不溶或溶解甚二：许多有机物在水中基本不溶或溶解甚l 少，不能在水中滴定。少，不能在水中滴定。l l 三：强酸或强碱在水中全部离解为三：强酸或强碱在水中全部离解为H+和和l OH-在水中不能区分强酸或强碱，不在水中不能区分强酸或强碱，不l 能分别滴定。能分别滴定。l 第六十页，本课件共有72页 基本原理基本原理l一、溶剂的分类一、溶剂的分类l非水滴定中溶剂分为质子溶剂和无质子溶剂。非水滴定
50、中溶剂分为质子溶剂和无质子溶剂。l质子溶剂质子溶剂(protonic solvent):能给出或接受质能给出或接受质子子l的溶剂。质子溶剂可分为酸性溶剂，碱性溶剂的溶剂。质子溶剂可分为酸性溶剂，碱性溶剂l和两性溶剂。和两性溶剂。第六十一页，本课件共有72页l1、酸性溶剂：给出质子能力较强的溶剂。如冰、酸性溶剂：给出质子能力较强的溶剂。如冰醋酸，丙酸等。酸性溶剂适于作为滴定弱碱性醋酸，丙酸等。酸性溶剂适于作为滴定弱碱性物质的介质。物质的介质。l2、碱性溶剂：接受质子能力较强的溶剂。如乙二、碱性溶剂：接受质子能力较强的溶剂。如乙二胺、液氨、乙醇胺等。碱性溶剂适于作为滴定弱胺、液氨、乙醇胺等。碱性溶