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1、实验四实验四 高效液相色谱法测定高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量 一、目的要求一、目的要求 l1掌掌握握高高效效液液相相色色谱谱外外标标法法含含量量测测定的原理。定的原理。l2熟悉高效液相色谱仪的操作、使熟悉高效液相色谱仪的操作、使用及注意事项。用及注意事项。二、操作步骤二、操作步骤 l本品为阿莫西林的胶囊剂（本品为阿莫西林的胶囊剂（标示量标示量为为250mg），），含阿莫西林含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的应为标示量的90%110.0%。1色谱条件色谱条件 l用十八烷基硅烷键合硅胶为用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相固定相；l水水-甲醇（
2、甲醇（40：60）为）为流动相流动相；l流速流速为为1ml/min；l检测波长检测波长为为254nm。2对照品溶液的制备对照品溶液的制备 l精密称取阿莫西林对照品适量，置精密称取阿莫西林对照品适量，置50ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶溶解并稀释至刻度，摇匀，即得解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶对照品溶液液。（实称阿莫西林对照品。（实称阿莫西林对照品0.0308g）3供试品溶液的制备供试品溶液的制备 l取阿莫西林胶囊取阿莫西林胶囊(平均装量平均装量0.2498g0.2498g）内）内容物，混合均匀，精密称取细粉适量，容物，混合均匀，精密称取细粉适量，置置
3、 100 ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶解并稀释成每溶解并稀释成每1ml中约含中约含0.6mg的溶液，用的溶液，用0.45m孔径的孔径的滤膜滤膜滤滤过，取过，取续滤液续滤液，即得，即得供试品溶液供试品溶液。l（实称细粉（实称细粉0.0659 g）l4 4测定测定 精精密密吸吸取取供供试试品品溶溶液液10L10L与与对对照照品品溶溶液液3 3、6 6、9 9、1212、15L15L进进样样，测测定定 ，即即得。得。l5 5计算计算 按标准曲线法以峰面积计算出供试品按标准曲线法以峰面积计算出供试品中阿莫西林（中阿莫西林（C C1616H H1919N N3 3O O5 5S S）占标示量的百）占标示量的百分含量。分含量。三、思考题三、思考题 l1.1.中国药典中国药典HPLCHPLC法常用的固定相及流动相有法常用的固定相及流动相有哪些？哪些？l2.HPLC2.HPLC法系法系统适用性试验内容有哪些？统适用性试验内容有哪些？l3.HPLC3.HPLC法常用的检测器有哪些？法常用的检测器有哪些？l4.4.含量测定方法的效能指标有哪些？含量测定方法的效能指标有哪些？液相色谱流程图溶剂溶剂输液泵输液泵进样器进样器柱温箱柱温箱检测器检测器数据处理数据处理 高效液相色谱工作站高效液相色谱工作站