抗体效价测定操作规程修订稿741.pdf

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1、 抗体效价测定操作规程 WEIHUA system office room【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-抗体效价测定操作规程 操作步骤:一IgG 类 1.IgG 类抗体效价滴定,须取适量血清 200L加等体积 2Me溶液混合,封口,置 37水浴箱作用 60分钟,先稀释血清:200L病人血清 600L生理盐水备用,排列 6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,在第一管和第二管中各加入稀释血清 200L,第二管混匀后移出 200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。这

2、样从第一管到第六管的血清稀释度依次是 1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。2.加红细胞悬液(自配红细胞悬液同反定型试剂)每管各加 2相应红细胞悬液200L,混匀。(如待检血清抗体为抗 A,则加入 A型标准红细胞悬液;如待检血清抗体为抗 B,则加入 B型标准红细胞悬液;如待检血清中既有抗 A又有抗B,则倍量稀释两份血清,一份加入 A型标准红细胞悬液,另一份加入 B型标准红细胞悬液;)3.先直接观察离心结果,之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的 R1 液 3d,混合 30S均匀后,在各加 R2 液 2 滴,操作方法同凝聚胺交叉配血法,然后判读结果。通常以肉眼观察到的第一个“

3、”的凝集管作为判断的终点,终点血清稀释度的倒数为效价(Titer),或称滴度。二IgM 1.血清连续倍量稀释法 先稀释血清:100L 病人血清+700L 生理盐水备用,排列 6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,第一管和第二管中各加入稀释血清 200L,第二管混匀后移出 200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出 200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。2.加红细胞悬液(自配红细胞悬液同反定型试剂)每管各加 2相应红细胞悬液200L,混匀。(如待检血清抗体为抗 A,则加入 A型标准红细胞悬液;如待检血清抗体为抗 B,则加入 B型标准红细胞悬液;如待检血清中既有抗 A又有抗B,则倍量稀释两份血清,一份加入 A型标准红细胞悬液,另一份加入 B型标准红细胞悬液;)三此类为 IgM 类盐水抗体可立即离心后观察。

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