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1、探究：培养液中酵母菌种群数量的变化探究：培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素、体会影响种群数量变化的因素1、酵母菌的繁殖方式主要是、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考回顾思考:出芽生殖出芽生殖例如：酵母菌的种群数量在营养条件有限例如：酵母菌的种群数量在营
2、养条件有限的情况下呈的情况下呈S型增长。型增长。探究：培养液中探究：培养液中酵母菌种群数量的变化酵母菌种群数量的变化 介绍介绍:血球计数板的构造血球计数板的构造1、血球计数板：是显微镜上的外挂物件、血球计数板：是显微镜上的外挂物件,可用来测量可用来测量细胞细胞,细菌等一些微小物体的长度细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽玻片中有四条下凹的槽,构构成三个平台成三个平台.中间的平台较宽中间的平台较宽,其中间又被一短
3、横槽隔为其中间又被一短横槽隔为两半两半,每半边上面每半边上面,刻有一个方格网刻有一个方格网.化化放大后的方格网计数室放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A251616252、方格网的构成：、方格网的构成：方格网上刻有方格网上刻有9个大方格个大方格,其中只有中间的一个大方格为其中只有中间的一个大方格为计数室计数室,计数室通常有两种规格计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为一种是大方格内分为16中格中格,每一中格又分为每一中格又分为25小格小格;另一种是大方格内分为另一种是大方格内分为25中格中格,每一中格又分为每一中格又分为16小格小格.但是不管计数室是哪一种但是不管计数室是
4、哪一种构造构造;它们都有一个共同的特点它们都有一个共同的特点,即即每一大方格都是由每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。个小方格组成。3、使用方法、使用方法:将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.加盖盖玻片.计数室有长计数室有长宽：宽：1mm1mm为例为例,2mm2mm,3mm3mm等等深度均为深度均为0.1mm。5、单位换算、单位换算:大方格的长和大方格的长和宽各为宽各为1mm,深度为深度为0.1mm,其体积为其体积为
5、0.1mm3.换算为换算为1mL为为0.1/1000即即1/10000mL即即10-4 mL。4、计数室的规格：、计数室的规格：如果使用如果使用16格格25格规格的计数室格规格的计数室,要按对角要按对角线位线位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4个中格个中格(即即100个个小格小格)的酵母菌数的酵母菌数.我们用规格为我们用规格为25格格16格的计数板格的计数板,除了取其除了取其4个对角方位外个对角方位外,还需再数中央的一个中格还需再数中央的一个中格(即即80个小方格个小方格)的酵母菌数的酵母菌数.（五点取样法）（五点取样法）出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，出芽的酵母菌，芽体达
6、到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。即可作为两个菌体计算。6、如何计数呢？、如何计数呢？每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（如长和宽各为长和宽各为1mm）：(1)16格25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)400稀释倍数10-4即(100小格内酵母细胞个数/100)4 106稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数10-4即(80小格内酵母细胞个数/80)4 106稀释倍数7、课本中大方格的长和宽各为课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为深度为0.1mm,其其体积为体积
7、为0.4mm3.换算为换算为1mL为为0.4/1000即即4/10000mL即即410-4mL 则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（如长和宽各为长和宽各为2mm）：(1)16格25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)400稀释倍数410-4即即(100小格内酵母细胞个数/100)106稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数即即(80小格内酵母细胞个数/80)106稀释倍数410-4使酵母菌混合均匀。使酵母菌混合均匀。可以设置对照。用无菌水代替培养液培养，可以设置对照。用无
8、菌水代替培养液培养，取样、计数、对比。取样、计数、对比。或不需要，因不同时间取样已形成对照。或不需要，因不同时间取样已形成对照。需要。尽量减少误差。对每个样品计数三需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次次,取其平均值。取其平均值。时间时间（d）酵母菌细胞数量（酵母菌细胞数量（106个个/mL）A组 B组 C组A1A2A3平均B1B2B3平均C1C2C3平均1234567.当遇到位于方格线上的酵母菌当遇到位于方格线上的酵母菌,一一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计或只计数下方和左方线上的酵母细胞数下方和左方线上的酵母细胞).稀释培养液。稀释的
9、目的是便于酵母菌悬液的计数稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每以每小方格内含有小方格内含有4-5个酵母细胞为宜个酵母细胞为宜,一般稀释一般稀释10倍即可倍即可.8、血球计数板的清洁、血球计数板的清洁血球计数板使用后血球计数板使用后,用自来水冲洗用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷切勿用硬物洗刷,洗洗后自行晾干或用吹风机吹干后自行晾干或用吹风机吹干,或用或用95%的乙醇的乙醇,无水乙无水乙醇醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净若不干净,则必须重则必须重复清洗直到干净为止复
10、清洗直到干净为止 酵母菌的种群数量在营酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈养条件有限的情况下是呈S型增长。但之型增长。但之后会下降。后会下降。2根据各组平均数据画出的增长曲线有没根据各组平均数据画出的增长曲线有没有什么总趋势？如果有，作出说明。如果设有什么总趋势？如果有，作出说明。如果设计了无菌水的对照，也画出增长曲线。计了无菌水的对照，也画出增长曲线。0 酵母菌细胞数（酵母菌细胞数（106个个/mL）时间时间对照组对照组实验组实验组3影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么？影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么？1取少量酵母菌液放入血球计数板直接计数，测得的数目是（）A活细胞数 B
11、死细胞数 C菌落数 D细胞总数A2、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作过程如下：过程如下：（1）把）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养，酵母菌培养液放置于冰箱中培养，（2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到第）到第七天取样计数，请纠正其错误七天取样计数，请纠正其错误：（1）_（2）_（3）_.该同学用该同学用25格格x16格格,其中其中长和宽各为长和宽各为2mm,深度为深度为0.1mm的血球计数板计数的血球计数板计数,用五用五点取样法读取点取样法读取酵母菌有酵母菌有40个个,其中稀释了其中稀释了10倍倍,则则1ml菌菌液中所含的酵母菌个数为液中所含的酵母菌个数为_应将静置改为轻轻振荡几次应将静置改为轻轻振荡几次.应放在适宜温度下培养应放在适宜温度下培养.应连续七天取样计数应连续七天取样计数.练习练习:（40/80）106 10 =5 106