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1、药物分析-08第八章-杂环类药物分析.第一节第一节 吡啶类药物吡啶类药物一、典型药物的结构与主要化学性质一、典型药物的结构与主要化学性质（一）典型药物的结构（一）典型药物的结构 吡啶（吡啶（pyridinepyridine）异烟肼（异烟肼（isoniazidisoniazid）（二）主要化学性质（二）主要化学性质 1.1.弱碱性弱碱性 吡啶环上的氮为碱性氮原子，吡啶环的吡啶环上的氮为碱性氮原子，吡啶环的pKpKb b 值为值为8.88.8（水中）。（水中）。尼可刹米除了吡啶上氮外，尼可刹米除了吡啶上氮外，位上被酰氨基取代。酰氨基位上被酰氨基取代。酰氨基化学性质不甚活泼，但遇碱水解后释放出具有碱
2、性的二乙化学性质不甚活泼，但遇碱水解后释放出具有碱性的二乙胺，故可以进行鉴别。胺，故可以进行鉴别。2 2还原性还原性 异烟肼的吡啶环异烟肼的吡啶环位上被具有还原性位上被具有还原性 酰肼取代，可被氧化剂氧化，可与含羰基的化合酰肼取代，可被氧化剂氧化，可与含羰基的化合 物发生缩合反应。物发生缩合反应。3 3吡啶环的特性吡啶环的特性 异烟肼和尼可刹米的吡啶环异烟肼和尼可刹米的吡啶环 、位未取代，而位未取代，而或或位被羧基衍生物所位被羧基衍生物所 取代；硝苯地平的吡啶环取代；硝苯地平的吡啶环、位被甲酸甲酯位被甲酸甲酯 所取代，其吡啶环可发生开环反应所取代，其吡啶环可发生开环反应。二、鉴别试验二、鉴别试
3、验（一）吡啶环的开环反应（一）吡啶环的开环反应 本反应适用于吡啶环的本反应适用于吡啶环的、位无取代基的异位无取代基的异 烟肼和尼可刹米。烟肼和尼可刹米。1.1.戊烯二醛反应（戊烯二醛反应（k kning ning 反应）反应）尼可刹米尼可刹米+溴化氰溴化氰H2O戊烯二醛衍生物戊烯二醛衍生物苯胺苯胺黄色黄色（黄色（黄色黄棕色）黄棕色）2 2二硝基氯苯反应（二硝基氯苯反应（VongerichtenVongerichten反应）反应）吡啶及其衍生物吡啶及其衍生物+2,4-二硝基氯苯二硝基氯苯至熔融或混合醇制KOH紫红色紫红色无水条件无水条件 采用本法鉴别采用本法鉴别异烟肼异烟肼、尼可刹米尼可刹米时，
4、需适当处理，时，需适当处理，即将酰肼氧化成羧基或将酰胺水解为羧基后进行鉴别。即将酰肼氧化成羧基或将酰胺水解为羧基后进行鉴别。如异烟肼鉴别：如异烟肼鉴别：异烟肼不经处理的反应：异烟肼不经处理的反应：异烟肼异烟肼+2+2，4-4-二硝基氯苯二硝基氯苯乙醇乙醇OH-紫红色紫红色（二）酰肼基团的反应（二）酰肼基团的反应1 1还原反应还原反应异烟肼异烟肼+AgNOAgNO3 3异烟酸银异烟酸银+N2+Ag(白色）白色）银镜银镜异烟肼异烟肼+亚硒酸亚硒酸硒硒（红色红色）2 2缩合反应缩合反应 异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的熔点，可熔点，可用以鉴别。用以
5、鉴别。ChPChP和和BPBP均采用本法鉴别均采用本法鉴别.异烟腙异烟腙黄色结晶黄色结晶 mpmp为为228228231231 -NHNH2 2活性活性-CHCH2 2-+1+1，2-2-萘醌萘醌-4-4-磺酸磺酸OHOH-红色红色（三（三）形成沉淀的反应形成沉淀的反应 具有吡啶环的结构，可与具有吡啶环的结构，可与重金属盐类重金属盐类及及苦味酸苦味酸等试剂形等试剂形成沉淀。成沉淀。如如尼可刹米尼可刹米+CuSOCuSO4 4+硫氰酸铵硫氰酸铵草绿色草绿色尼可刹米尼可刹米异烟肼异烟肼+HgClHgCl2 2白色白色（四）分解产物的反应四）分解产物的反应使湿润的红色石蕊试纸变蓝使湿润的红色石蕊试纸
6、变蓝尼可刹米尼可刹米异烟肼异烟肼+无水无水NaNa2 2COCO3 3Ca(OH)Ca(OH)2 2吡啶臭吡啶臭尼可刹米尼可刹米+NaOHNaOH二乙胺二乙胺 （五）（五）紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征 本类药物的分子结构中均含有芳杂环，在紫外光区有特征本类药物的分子结构中均含有芳杂环，在紫外光区有特征吸收，其最大、最小吸收波长及百分吸收系数可供鉴别。本吸收，其最大、最小吸收波长及百分吸收系数可供鉴别。本类药物的紫外特征吸收鉴别方法见下表类药物的紫外特征吸收鉴别方法见下表。本类药物的紫外特征吸收鉴别方法本类药物的紫外特征吸收鉴别方法 药药 物物 溶溶 剂剂 maxmax（nmnm）min m
7、in（nmnm）E E1cm1cm1%1%异烟肼异烟肼 HClHCl（0.01mol/L0.01mol/L）265 265 约约420420 水水 266 234 378 266 234 378 尼可刹米尼可刹米 HClHCl（0.01mol/L0.01mol/L）263 263 285 285 NaOH NaOH（0.1mol/L0.1mol/L）255 255 840 840 260 260 860 860 硝苯地平硝苯地平 无水乙醇无水乙醇 333 333 140 140（一）异烟肼中游离肼的检查（一）异烟肼中游离肼的检查 1.1.TLCTLC法法 Ch.PCh.P中异烟肼及其注射中异烟
8、肼及其注射,采用采用TLCTLC法中杂质对照法法中杂质对照法。对照品：对照品：硫酸肼硫酸肼0.200.20mg/mlmg/ml（相当于游离肼相当于游离肼5050gg）薄层板：薄层板：硅胶（用羧甲基纤维素钠溶液制备）硅胶（用羧甲基纤维素钠溶液制备）展开剂：展开剂：异丙醇异丙醇-丙酮（丙酮（3 3：2 2）显色剂：显色剂：乙醇制对乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液二甲氨基苯甲醛试液 检测结果：检测结果：供试品主斑点前方，不得显黄色斑点供试品主斑点前方，不得显黄色斑点 三、有关物质检查三、有关物质检查 BPBP的检查方法：的检查方法：供试品溶液制备供试品溶液制备:取异烟肼取异烟肼1.01.0g g，加丙酮
9、加丙酮-水水(1:1)(1:1)制成制成1010ml.ml.对照溶液制备对照溶液制备:取硫酸肼取硫酸肼5050mgmg，加水加水5050mlml使溶解后，加丙酮稀使溶解后，加丙酮稀 释至释至100100mlml；量取量取1010mlml，加供试品溶液加供试品溶液0.20.2mlml，加丙酮加丙酮-水水(1:1)(1:1)稀释至稀释至100100mlml。薄层板：薄层板：硅胶硅胶GFGF254254薄层板薄层板 展开剂：展开剂：醋酸乙酯醋酸乙酯-丙酮甲醇水丙酮甲醇水(50:20:20:10)(50:20:20:10)显色剂：显色剂：乙醇制对乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液二甲氨基苯甲醛试液 检测结果
10、：检测结果：于于254254nmnm紫外光下检测，供试品中的杂质斑点强度应紫外光下检测，供试品中的杂质斑点强度应小于对照溶液中小于对照溶液中异烟肼异烟肼色谱斑点；再喷以对色谱斑点；再喷以对-二甲氨基苯二甲氨基苯甲醛溶液，并在日光下检视，对照溶液中甲醛溶液，并在日光下检视，对照溶液中硫酸肼硫酸肼斑点的斑点的强度大于供试液中的强度大于供试液中的杂质杂质斑点。斑点。2 2比浊法比浊法 JPJP（1414）采用样品中加水杨醛的乙醇溶液观察混浊采用样品中加水杨醛的乙醇溶液观察混浊的方法来控制游离肼的限量。的方法来控制游离肼的限量。此法专属性差，因异烟肼此法专属性差，因异烟肼(慢慢)和硫酸肼均生成腙而和硫
11、酸肼均生成腙而析出沉淀。析出沉淀。3.3.差示分光光度法差示分光光度法 肼肼异烟肼异烟肼+对对-二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛黄色缩合物黄色缩合物对对-二甲氨基苯甲醛连氮二甲氨基苯甲醛连氮 (maxmax=456nm =456nm 有最大吸收有最大吸收)形成的缩合产物对形成的缩合产物对-二甲氨基苄叉二甲氨基苄叉(于于maxmax=456456nmnm波长处无吸收波长处无吸收)可在可在456456nmnm波长处测定并计算二者的差示吸收度波长处测定并计算二者的差示吸收度AA456456，同时以同时以 对照品比较法计算游离肼含量。对照品比较法计算游离肼含量。具体测定法：具体测定法：对照品溶液：对照品溶
12、液：硫酸肼硫酸肼C CR R1g/ml1g/ml 5 ml+5 ml+丙酮丙酮 maxmax=456nm=456nm 测测A A1 1 +对对-二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛(AA456456A A2 2A A1 1)AAR R 5 5 ml ml maxmax=456nm=456nm 测测A A2 2 供试品溶液：供试品溶液：异烟肼异烟肼C C2mg/ml2mg/ml 游离肼游离肼 C CX X=AAs s/A/AR RCCR R 1 1份份+丙酮丙酮 maxmax=456nm=456nm 测测A A1 1 +对对-二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛 (AA456456A A2 2A A1 1)AA
13、s s 2 2份份 maxmax=456nm=456nm 测测A A2 2(二二)尼可刹米中有关杂质检查尼可刹米中有关杂质检查 因有关杂质的化学结构不明，故因有关杂质的化学结构不明，故Ch.pCh.p采用采用TLCTLC法中的法中的高低浓度对比法高低浓度对比法进行检查。进行检查。(三三)硝苯地平中有关物质检查硝苯地平中有关物质检查 硝苯地平遇光分子内部发生光化学歧化作用，降解为硝苯地平遇光分子内部发生光化学歧化作用，降解为4-4-（2-2-硝硝基苯基）基苯基）-2,6-2,6-二甲基吡啶二甲基吡啶-3,5-3,5-二羧酸二甲酯（二羧酸二甲酯（A A）和和4-4-（2-2-亚亚硝基苯基）硝基苯基
14、）-2,6-2,6-二甲基吡啶二甲基吡啶-3,5-3,5-二羧酸二甲酯（二羧酸二甲酯（B B）。）。其化学其化学结构如下结构如下:具体方法具体方法 1 1。供试液。供试液和和的制备的制备 2 2。有关杂质对照品液。有关杂质对照品液和和的制备的制备 3.3.色谱条件与灵敏度调节色谱条件与灵敏度调节 填充剂：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶 流动相：流动相：甲醇甲醇-水（水（3 3：2 2）；）；检测波长：检测波长：235235nmnm。取对照品溶液取对照品溶液2020ll注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使杂质杂质A A和和B B组分色谱峰的峰高为
15、满量程的组分色谱峰的峰高为满量程的20%20%；杂质；杂质A A和和B B组分之间，组分之间，杂质杂质B B与硝苯地平之间的分离度均符合规定。与硝苯地平之间的分离度均符合规定。4.4.有关物质检测有关物质检测 取供试液取供试液和对照液和对照液各各2020ll，分别进样记录色谱图至主成分分别进样记录色谱图至主成分峰保留时间的峰保留时间的2 2倍。供试液倍。供试液如出现与对照液如出现与对照液中杂质中杂质A A和和B B相对应相对应的峰，其峰面积不得大于对照液的峰，其峰面积不得大于对照液中杂质中杂质A A和和B B的峰面积；如出现除的峰面积；如出现除杂质杂质A A和和B B以外的其他杂质峰，其峰面积
16、不得大于对照液以外的其他杂质峰，其峰面积不得大于对照液中硝苯地中硝苯地平的峰面积；各杂质总量不得大于平的峰面积；各杂质总量不得大于0.5%0.5%。供试液。供试液中小于对照液中小于对照液中硝苯地平峰面积的中硝苯地平峰面积的10%10%以下的杂质峰忽略不计。以下的杂质峰忽略不计。一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质（一）典型药物的结构（一）典型药物的结构 硫酸奎宁硫酸奎宁 硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁 （quinine sulfatequinine sulfate）(quinidine sulfate)(quinidine sulfate)第二节第二节 喹啉类药物喹啉类药物 盐酸环丙沙星盐酸环丙
17、沙星(ciprofloxacinhydrochloride)（二）主要化学性质二）主要化学性质 1.1.碱性碱性 喹啉环上的氮原子具有碱性，与强酸形成稳定的盐。喹啉环上的氮原子具有碱性，与强酸形成稳定的盐。环丙沙星与盐酸成盐，奎宁和奎尼丁可与二元酸成盐，结环丙沙星与盐酸成盐，奎宁和奎尼丁可与二元酸成盐，结 构中喹核碱含脂环氮，碱性强，可与硫酸成盐；而喹啉环系构中喹核碱含脂环氮，碱性强，可与硫酸成盐；而喹啉环系 芳环氮，碱性较弱，不与硫酸成盐。奎宁芳环氮，碱性较弱，不与硫酸成盐。奎宁pKpKb1b1为为5.075.07，pKpKb2b2 为为9.79.7，饱和溶液的，饱和溶液的pHpH值为值为8
18、.88.8。奎尼丁。奎尼丁pKpKb1b1为为5.45.4，pKpKb2b2为为1010。2.2.旋光性旋光性 硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为-237-237o o至至-244-244o o；硫酸奎尼丁为右旋体，其比旋度为硫酸奎尼丁为右旋体，其比旋度为+275+275o o至至+290+290o o；而盐酸环而盐酸环 丙沙星无旋光性。丙沙星无旋光性。3.3.荧光特性荧光特性 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均显蓝硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均显蓝 色荧光，而盐酸环丙沙星则无荧光。色荧光，而盐酸环丙沙星则无荧光。（一）绿奎宁反应一）绿奎宁反应（Thalleioq
19、uin）绿奎宁反应是绿奎宁反应是奎宁奎宁和和奎尼丁奎尼丁的特殊鉴别反应。其反应如下：的特殊鉴别反应。其反应如下：Ch.P Ch.P收载方法收载方法二、鉴别试验二、鉴别试验（二）光谱特征二）光谱特征1.1.UVUV Ch.P Ch.P采用本法鉴别盐酸环丙沙星。采用本法鉴别盐酸环丙沙星。2.2.荧光光谱特征荧光光谱特征 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁，在稀硫酸奎宁和硫酸奎尼丁，在稀H H2 2SOSO4 4中均显中均显 蓝色荧光，盐酸环丙沙星则无荧光，可用于本类药物的鉴别。蓝色荧光，盐酸环丙沙星则无荧光，可用于本类药物的鉴别。3.3.IRIR Ch.P Ch.P中硫酸奎宁和盐酸环丙沙星均采用红外光谱的方中硫
20、酸奎宁和盐酸环丙沙星均采用红外光谱的方 法进行鉴别，而硫酸奎尼丁未采用此法。法进行鉴别，而硫酸奎尼丁未采用此法。（三）无机酸盐（三）无机酸盐 n硫酸硫酸奎宁、奎宁、硫酸硫酸奎尼丁奎尼丁硫酸根氯化钡白色沉淀硫酸根氯化钡白色沉淀n盐酸盐酸环丙沙星环丙沙星盐酸根硝酸银白色沉淀盐酸根硝酸银白色沉淀（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查 1.1.酸度酸度 主要控制药物中酸性杂质。用主要控制药物中酸性杂质。用pHpH计测定计测定,pHpH为为5.75.76.66.6。2.2.氯仿氯仿-乙醇中不溶物乙醇中不溶物 主要控制药物中不溶性杂质或无机盐类主要控制药物中不溶性杂质或无机盐类.3.3.
21、其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱 主要控制硫酸奎宁中其他生物碱，因没有合主要控制硫酸奎宁中其他生物碱，因没有合 适的对照品，因此采用薄层色谱中的高低浓度对比法进行检查。适的对照品，因此采用薄层色谱中的高低浓度对比法进行检查。三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查（二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查1 1。酸度。酸度 主要控制药物中酸性杂质。用主要控制药物中酸性杂质。用pHpH计测定计测定,pHpH为为3.03.04.54.5。2.2.溶液的澄清度与颜色溶液的澄清度与颜色 主要控制本品中不溶性物质和有色杂质。主要控制本品中不溶性物质和有色杂质。3.3.有关物质有关物质 主要控制本
22、品中可能引入结构不清的有关杂质，主要控制本品中可能引入结构不清的有关杂质，采用采用HPLCHPLC法中归一化法进行检查，其检查方法如下：法中归一化法进行检查，其检查方法如下：色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验：色谱柱色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱流动相：流动相：0.050.05mol/Lmol/L枸橼酸枸橼酸-乙腈乙腈(82:18)(82:18)用三乙胺调节用三乙胺调节pHpH值值3.3.检测器：检测器：UVUV检测波长为检测波长为277277nmnm；按盐酸环丙沙星峰计算按盐酸环丙沙星峰计算n n2000;2000;盐酸环丙沙星峰与相邻杂质
23、峰的分离度盐酸环丙沙星峰与相邻杂质峰的分离度R R 1.5.1.5.测定方法：测定方法：取本品适量，加水制成每取本品适量，加水制成每1 1mlml中含中含0.40.4mgmg的溶液，取的溶液，取 20 20ll注入液相色谱仪，调节检测灵敏度和记录仪衰注入液相色谱仪，调节检测灵敏度和记录仪衰 减，使主成分的峰高为记录仪满量程的减，使主成分的峰高为记录仪满量程的2-42-4倍，记录倍，记录 时间应为主成分峰保留时间的时间应为主成分峰保留时间的2 2倍。按倍。按面积归一化法面积归一化法 计算，杂质总量不得超过计算，杂质总量不得超过1.5%1.5%。一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质（一）典
24、型药物的结构（一）典型药物的结构 硫酸阿托品硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）第三节第三节 托烷类药物托烷类药物（二）主要化学性质二）主要化学性质1 1。水解性。水解性 本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇以阿托品为例，水解生成莨菪醇()()和莨菪和莨菪 酸酸()()。2.2.碱性碱性 阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有 叔胺氮原子叔胺氮原子,具有较强的碱性具有较强的碱性,易与酸成盐。如易与
25、酸成盐。如 阿托品的阿托品的pKpKb1b1为为4.354.35。3.3.旋光性旋光性 氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱结结构构中中含含有有不不对对称称碳碳原原子子，呈呈左左旋旋体体，比比旋旋度度为为-24-24至至-27-27，而而阿阿托托品品结结构构中中虽虽然然也也含含有有不不对对称称碳碳原原子子，但但因因外外消消旋旋化化而而为为消消旋旋体体，无无旋旋光光性性。利利用用此此性质可区别阿托品与东莨菪碱。性质可区别阿托品与东莨菪碱。（一）托烷生物碱一般鉴别试验（一）托烷生物碱一般鉴别试验二、鉴别试验二、鉴别试验生物碱生物碱水解水解莨菪酸莨菪酸发烟硝酸发烟硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H
26、5OH）固体固体KOH有色的醌型产物有色的醌型产物（深紫色）（深紫色）（二）氧化反应（二）氧化反应本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：(三三)沉淀反应沉淀反应本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。如如：阿托品：阿托品+氯化汞醇试液氯化汞醇试液黄色沉淀黄色沉淀东莨菪碱东莨菪碱+氯化汞醇试液氯化汞醇试液白色沉淀白色沉淀nn硫酸阿托品：水
27、溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸硫酸阿托品：水溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸硫酸阿托品：水溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸硫酸阿托品：水溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解；加醋酸铅试液也生成白色沉淀，在醋或硝酸中均不溶解；加醋酸铅试液也生成白色沉淀，在醋或硝酸中均不溶解；加醋酸铅试液也生成白色沉淀，在醋或硝酸中均不溶解；加醋酸铅试液也生成白色沉淀，在醋酸铵或氢氧化钠试液中溶解。酸铵或氢氧化钠试液中溶解。酸铵或氢氧化钠试液中溶解。酸铵或氢氧化钠试液中溶解。nn氢溴酸东莨菪碱：水溶液加硝酸银试液，生成淡黄色凝乳氢溴酸东莨菪碱：水溶液加硝酸银试液，生成淡黄色凝乳氢溴酸
28、东莨菪碱：水溶液加硝酸银试液，生成淡黄色凝乳氢溴酸东莨菪碱：水溶液加硝酸银试液，生成淡黄色凝乳沉淀，能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；滴加氯沉淀，能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；滴加氯沉淀，能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；滴加氯沉淀，能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。（四）硫酸盐与溴化物反应（四）硫酸盐与溴化物反应 1.1.酸度酸度 东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱
29、性反应。东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其5%5%水溶水溶 液的液的pHpH值为值为4.04.05.55.5，来控制本品中的酸性杂质。，来控制本品中的酸性杂质。2.2.其他生物碱其他生物碱三、氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查三、氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查本品水溶液本品水溶液+氨试液氨试液不混浊不混浊合格合格混浊混浊存在其他生物碱存在其他生物碱+KOH试液试液混浊（东莨菪碱）混浊（东莨菪碱）3.3.易氧化物易氧化物 主主要要是是检检查查本本品品在在生生产产中中可可能能引引入入的的阿阿扑扑阿阿托托品品及及其它含有
30、双键的有机物质，可使其它含有双键的有机物质，可使KMnOKMnO4 4溶液褪色。溶液褪色。第四节第四节 吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质（一）结构特点与典型药物（一）结构特点与典型药物nR:-H、-Cl、-CF3、-COCH3、-SCH2CH3nR:具有23碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物奋乃静奋乃静癸氟奋乃静癸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪（二）主要化学性质（二）主要化学性质 1.1.紫外和红外吸收光谱特征紫外和红外吸收光谱特征 硫氮杂蒽母核为共轭三环硫氮杂蒽母核为共轭三环系统系统 三个最大吸收峰别在：三个最大
31、吸收峰别在：205205nmnm、254nm254nm、300nm300nm 由于由于2 2位、位、1010位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。硫氮杂蒽母核的硫氮杂蒽母核的硫硫为为二价二价，易氧化为砜和亚砜，其紫外吸，易氧化为砜和亚砜，其紫外吸 收光谱有明显不同，它们具有四个峰值。收光谱有明显不同，它们具有四个峰值。另外，另外，取代基取代基R R和和R R的不同，则可产生不同的红外光谱的不同，则可产生不同的红外光谱2.2.易氧化呈色易氧化呈色 二价硫易氧化，遇不同氧化剂如硫酸、硝酸、二价硫易氧化，遇不同氧化剂如硫酸、硝酸、三氯化铁试液及过氧化氢等
32、，随着取代基的不同，而呈不同三氯化铁试液及过氧化氢等，随着取代基的不同，而呈不同 的颜色。的颜色。3.3.与金属离子络合呈色与金属离子络合呈色 本类药物中未被氧化的硫，可与钯离本类药物中未被氧化的硫，可与钯离 子形成配位化合物，其氧化产物则无此反应。此性质可用于子形成配位化合物，其氧化产物则无此反应。此性质可用于 鉴别和含量测定，并具有专属性，可消除氧化产物的干扰。鉴别和含量测定，并具有专属性，可消除氧化产物的干扰。（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱一）紫外特征吸收和红外吸收光谱本类药物可用本类药物可用UV和和IR鉴别，鉴别，Ch.P中中UV鉴别实例如下：鉴别实例如下：药物名称药物名称 溶溶 剂
33、剂 浓度（浓度（g/mlg/ml）maxmax（nmnm）A E A E1%1%1cm1cm盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 盐酸（盐酸（9 10009 1000）5 254 0.46 915 5 254 0.46 915 306 306 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 盐酸（盐酸（0.010.01mol/Lmol/L）6 249 6 249 883937 883937奋乃静奋乃静 无水乙醇无水乙醇 7 258 0.65 7 258 0.65 癸氟奋乃静癸氟奋乃静 乙醇乙醇 10 260 10 260 盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静 盐酸（盐酸（9 10009 1000）10 255 10 255 553593 5535
34、93 盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪 盐酸（盐酸（1 201 20）10 256 10 256 630 630盐酸硫利达嗪盐酸硫利达嗪 乙醇乙醇 8 264 8 264与与315 315 二、鉴别试验二、鉴别试验（二）显色反应二）显色反应1.与氧化剂的显色反应与氧化剂的显色反应 药物名称药物名称 硫硫 酸酸 硝硝 酸酸 过氧化氢过氧化氢 盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 显红色显红色,渐变淡黄色渐变淡黄色 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 显樱桃红色显樱桃红色,放置放置 生成红色沉淀生成红色沉淀,加热即溶解加热即溶解,后颜色渐变深后颜色渐变深 溶液由红色转变为橙黄色溶液由红色转变为橙黄色 奋乃静奋乃静 显深红色显深红色;放
35、置后放置后 红色渐褪去红色渐褪去 盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静 显淡红色显淡红色,温热温热 后变成红褐色后变成红褐色 盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪 生成微带红色的白色沉淀生成微带红色的白色沉淀;放放 置后置后,红色变深红色变深,加热后变黄色加热后变黄色 盐盐酸硫利达嗪酸硫利达嗪 显蓝色显蓝色 2.与钯离子络合显色反应与钯离子络合显色反应 利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络 合物，如与癸氟奋乃静形成红色络合物。合物，如与癸氟奋乃静形成红色络合物。（三）分解产物的反应三）分解产物的反应 癸氟奋乃静癸氟奋乃静 碳酸钠及碳酸钾碳酸钠及碳酸钾
36、 F F-+酸性茜素锆试液酸性茜素锆试液 ZrFZrF6 6 2-2-配位离子，茜素磺酸钠游离使溶液由配位离子，茜素磺酸钠游离使溶液由红红色变为色变为黄黄色。色。600600炽灼炽灼(一一)盐酸异丙嗪中特殊杂质检查盐酸异丙嗪中特殊杂质检查 主要有：主要有：2-2-二甲氨基二甲氨基-1-1-丙醇；丙醇；N,N,-N,N,-三甲基三甲基-10-10H-H-吩噻嗪吩噻嗪-10-10-乙胺异构体和结构不清的分解产物乙胺异构体和结构不清的分解产物。因此采用。因此采用TLCTLC法中的法中的 高低浓度对比法高低浓度对比法控制上述这些杂质的限量。控制上述这些杂质的限量。(二二)盐酸硫利达嗪中有关物质检查盐酸
37、硫利达嗪中有关物质检查 本品遇光不稳定，在生产和贮藏过程中易引入有关物质，因本品遇光不稳定，在生产和贮藏过程中易引入有关物质，因 其结构不清，因此也采用其结构不清，因此也采用TLCTLC法中的法中的高低浓度对比法高低浓度对比法控制杂控制杂 质的限量。质的限量。三、三、特殊杂质检查特殊杂质检查第五节第五节 苯并二氮杂卓类药物苯并二氮杂卓类药物一、结构特征与典型药物一、结构特征与典型药物 地西泮 阿普唑仑 奥沙西泮 氯氮卓 (diazepam)(alprozolam)(oxazepam)(chlordiazepoxide)vv碱碱碱碱碱碱 性：性：性：性：性：性：非水溶液滴定法测定含量非水溶液滴定
38、法测定含量非水溶液滴定法测定含量非水溶液滴定法测定含量非水溶液滴定法测定含量非水溶液滴定法测定含量vv水水水水水水 解：解：解：解：解：解：在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，具有的特性可用于鉴别和含有测定具有的特性可用于鉴别和含有测定具有的特性可用于鉴别和含有测定具有的特性可用于鉴别和含有测定具有的特性可用于鉴别和含有测定具有的特性可用于鉴别和含有测定二、化学性质二、化学性质二、化学性质二、化学性质(一一)化学鉴别
39、试验化学鉴别试验 1 1。沉淀反应。沉淀反应 氯氮卓氯氮卓 橙红色橙红色沉淀沉淀 阿普唑仑阿普唑仑 盐酸氟西泮盐酸氟西泮 KBiIKBiI4 4 也生成也生成橙红色橙红色沉淀沉淀 氯硝西泮氯硝西泮 放置后，沉淀颜色变深，放置后，沉淀颜色变深，因此可以相互区别。因此可以相互区别。三、鉴别试验三、鉴别试验阿普唑仑阿普唑仑+遇硅钨酸遇硅钨酸 白色沉淀，药典中也用于鉴别。白色沉淀，药典中也用于鉴别。2.2.水解后呈芳伯胺反应水解后呈芳伯胺反应 氯氮卓和奥沙西泮，其反应如下：氯氮卓和奥沙西泮，其反应如下：药物药物药物药物硫酸硫酸硫酸硫酸稀硫酸稀硫酸稀硫酸稀硫酸地西泮地西泮地西泮地西泮黄绿色黄绿色黄绿色黄
40、绿色黄色黄色黄色黄色氯氮卓氯氮卓氯氮卓氯氮卓黄色黄色黄色黄色紫色紫色紫色紫色艾司唑仑艾司唑仑艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色亮绿色亮绿色天蓝色天蓝色天蓝色天蓝色硝西泮硝西泮硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色淡蓝色淡蓝色蓝绿色蓝绿色蓝绿色蓝绿色3.3.硫酸硫酸-荧光反应荧光反应 本类药物溶于硫酸本类药物溶于硫酸/稀硫酸后，在紫外光（稀硫酸后，在紫外光（365365nmnm）下，显不同颜色的荧光。例如：下，显不同颜色的荧光。例如：4.4.分解产物的反应分解产物的反应 本类药物多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，本类药物多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，显氯化物反应。显氯化物反应。Ch.PCh.P用于地西泮和三
41、唑仑药物的鉴别。用于地西泮和三唑仑药物的鉴别。5.5.氯化铜焰色反应氯化铜焰色反应 分子结构中含有氯元素的药物，分子结构中含有氯元素的药物，在铜网上燃烧在铜网上燃烧发发出出CuCl2绿色火焰。此反应药典未用于本类药物鉴别。绿色火焰。此反应药典未用于本类药物鉴别。（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱药物名称药物名称 溶溶 剂剂 浓度（浓度（g/mlg/ml）maxmax（nmnm）A A地西泮地西泮 0.5%0.5%硫酸甲醇溶液硫酸甲醇溶液 5 242 5 242 约约0.510.51 282 282 约约0.230.23 366 366 氯氮卓氯氮卓 盐酸溶液盐酸溶
42、液(91000)7 245,308 (91000)7 245,308 阿普唑仑阿普唑仑 盐酸溶液盐酸溶液(91000)12 264 (91000)12 264 盐酸氟西泮盐酸氟西泮 硫酸甲醇硫酸甲醇(136)10 2392,2842(136)10 2392,2842 比值比值1.951.952.502.50 3622 3622 氯硝西泮氯硝西泮 0.5%0.5%硫酸甲醇溶液硫酸甲醇溶液 10 2392,3072 10 2392,3072 奥沙西泮奥沙西泮 乙醇乙醇 10 229,3152(10 229,3152(较弱较弱)红外吸收光谱红外吸收光谱:已用于地西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、盐酸氟西已用
43、于地西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、盐酸氟西 泮、氯硝西泮和奥沙西泮的鉴别。泮、氯硝西泮和奥沙西泮的鉴别。（三）（三）TLC法法 1.1.常用的五种苯并二氮杂卓类药物的常用的五种苯并二氮杂卓类药物的TLCTLC法法 按按常常规规法法点点样样1010ll于于硅硅胶胶G G薄薄层层板板上上，以以苯苯-丙丙酮酮（3 3：2 2）为展开剂）为展开剂,饱和饱和1515minmin，用上行法展开用上行法展开1515cmcm，挥发溶剂，挥发溶剂，用稀硫酸喷雾，于用稀硫酸喷雾，于105105干燥干燥3030minmin，置紫外灯下检视荧光置紫外灯下检视荧光 斑点，结果见表斑点，结果见表8-68-6。2.2.酸水解产
44、物的酸水解产物的TLCTLC法法 利用苯并二氮杂卓类药物经酸水解产生的二苯甲酮衍生利用苯并二氮杂卓类药物经酸水解产生的二苯甲酮衍生物进行鉴别。由于不同的苯并二氮杂卓类药物水解后可能会物进行鉴别。由于不同的苯并二氮杂卓类药物水解后可能会获得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的获得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的专属性较差专属性较差。（三唑仑、阿普唑仑等经水解后不产生二苯甲酮衍生物，（三唑仑、阿普唑仑等经水解后不产生二苯甲酮衍生物，可以区别）。可以区别）。1.1.地西泮中有关物质的检查地西泮中有关物质的检查 地西泮在合成过程中因其副反应，地西泮在合成过程中因其副反应，可能引入可能引入N-N-去甲基苯甲
45、二氮卓去甲基苯甲二氮卓及及化学结构不清的有关物质化学结构不清的有关物质，可，可 采用采用TLCTLC法中的高低浓度对比法进行检查。法中的高低浓度对比法进行检查。2.2.氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查 USP(24)USP(24)用用TLCTLC法检查氯氮卓中的法检查氯氮卓中的 有关物质，并规定其分解产物有关物质，并规定其分解产物2-2-氨基氨基-5-5-氯氯-2-2-苯甲酮苯甲酮含量不得含量不得 过过0.01%0.01%；中间体；中间体7-7-氯氯-1-1，3-3-二氢二氢-5-5-苯基苯基-2-2H-1H-1，4-4-苯并二氮杂苯并二氮杂卓卓-2-2-酮酮-4-4-氧化物氧化物
46、含量不得过含量不得过0.1%0.1%。四、特殊杂质检查四、特殊杂质检查 3.3.氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法 色谱条件：色谱条件：色谱柱为色谱柱为250250mm2.6mmmm2.6mm（i.d.i.d.）Nucleosil10CNucleosil10C1818柱；柱；n=3000n=3000；流动相为甲醇流动相为甲醇-磷酸液磷酸液(0.05(0.05mol/L)(60:40),mol/L)(60:40),40%40%氢氧化钠溶液调氢氧化钠溶液调pHpH为为6.06.0；流速为；流速为1 1ml/min;ml/min;紫外检测紫外检测 器波长为器波长
47、为254254nmnm。检测结果：检测结果：氨基物（氨基物（）的）的t tR R为为12.012.0minmin、氧化物（氧化物（）的）的t tR R 为为4.34.3minmin，痕量杂质（痕量杂质（、）的）的t tR R为为13.813.8、3.6 3.6、4.74.7minmin。(二二)降解产物的检查降解产物的检查 地地西西泮泮注注射射液液列列入入此此项项检检查查，因因本本品品在在贮贮藏藏过过程程中中有有可可能能分分解解成成2-2-甲甲氨氨基基-5-5-氯氯-二二苯苯甲甲酮酮等等杂杂质质。采用采用HPLCHPLC法进行检查法进行检查。一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法(一一)基本原理
48、基本原理第六节第六节 含量测定含量测定当当HAHA酸性较强时，反应不能定量酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低完成，必须除去或降低HAHA的酸性，的酸性，使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。(二二)一般方法一般方法供供试试品品+冰冰醋醋酸酸10ml30ml若供试品为氢卤酸盐再若供试品为氢卤酸盐再加加5%5%醋酸汞的冰醋酸液醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结结果果高氯酸滴定液滴定高氯酸滴定液滴定以空白以空白试验校试验校正正 (三
49、三)问题讨论问题讨论1.1.适用范围适用范围 主要用于主要用于K Kb b1010-8-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱 的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使可使pKpKb b为为8 81313的弱碱性药物采用本法滴定。的弱碱性药物采用本法滴定。一般来说：一般来说：K Kb b为为1010-8-81010-10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的药物的 K Kb b为为1010-10-101010-12-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；时，宜选冰醋酸
50、与醋酐的混合溶液；K Kb b1010-12-12时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。另外，另外，在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的甲酸甲酸，也能使滴定突跃显著增，也能使滴定突跃显著增 大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。2.2.酸根的影响：酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸 消除消除HXHX干扰的方法：干扰的方法：加加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 量不足终点不明显，结果偏低。量不足终点不明显，结果偏低。