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1、生物:2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体课件(新人教版选修3)Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望教学重点、难点:教学重点、难点:教学目标教学目标:直击考纲:直击考纲:细胞融合和单克隆抗体(细胞融合和单克隆抗体(A A)1 1、简述动物细胞融合的方法和过程、简述动物细胞融合的方法和过程 2 2、简述单克隆抗体的制备过程及其应用、简述单克隆抗体的制备过程及其应用 3 3、关注细胞工程研究的发展和应用前景、关注细胞工程研究的发展和应用前景 1 1、简述动物细
2、胞融合的方法和过程、简述动物细胞融合的方法和过程 2 2、简述单克隆抗体的制备过程、简述单克隆抗体的制备过程思考思考1 1、什么叫动物细胞融合?植物体杂交技术、什么叫动物细胞融合?植物体杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢?与动物细胞融合有什么不同呢?2 2、动物细胞在结构上有何区别?这与它们、动物细胞在结构上有何区别?这与它们杂交或融合过程有什么影响?杂交或融合过程有什么影响?3 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样?一样?一、动物细胞融合一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动。
3、细胞融合是正常的生命活动。两个细胞正在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用1 1、概念:、概念:两个或多个动物细胞结合形成一个细两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成的具有两个或多个胞的过程,融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。2 2、原理:、原理:细胞膜的流动性细胞膜的流动性3 3、方法:、方法:物理法:物理法:离心、振动、电激离心、振动、电激化学法:化学法:PEG(聚乙二醇)(聚乙二醇)生物法:生物法:灭活的病毒灭活的病毒为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗?
4、活?不灭活行吗?因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭活的话会感染开,细胞发生融合,不灭活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。细胞,而不能诱导细胞融合。思考思考4、动动物物细细胞胞融融合合的的过过程程5 5、意义:、意义:(1 1)使远缘杂交成为可能。)使远缘杂交成为可能。(2 2)是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、)是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、和生物新品种培育的重要手段。和生物新品种培育的重要手段。(2)(2)为单克隆抗体开辟了新途径。为单克隆抗体开辟了新途径。6、植物体细胞
5、杂交和动物细胞融合的比较、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导原生质体融合原生质体融合使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合诱导方法诱导方法物理(离心、振荡、物理(离心、振荡、电刺激)电刺激)化学(聚乙二醇)化学(聚乙二醇)物理、化学方法物理、化学方法(同左)(同左)灭活的病毒灭活的病毒用途用途获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体(一)
6、、抗体(一)、抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B B淋巴细淋巴细胞产生抗体。胞产生抗体。B B淋巴细胞与抗体的关系:淋巴细胞与抗体的关系:、B B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。、动物体内的、动物体内的B B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗淋巴细胞可以产生百万种以上的抗 体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。、每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。、每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。
7、传统生产抗体的方法缺陷是产量低、纯度传统生产抗体的方法缺陷是产量低、纯度低、特异性差。低、特异性差。小结小结(二)、单克隆抗体(二)、单克隆抗体 1 1、概念、概念 由单个由单个B B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆)淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群,形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。称为单克隆抗体。2 2、特点:、特点:特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 3、如何大量生产单克隆抗体?、如何大量生产单克隆抗体?(1)利用淋巴细胞产生抗体的功能)利用淋巴细胞产生抗体的功能(2)利用
8、肿瘤细胞无限增殖的特性)利用肿瘤细胞无限增殖的特性(3)利用细胞融合的技术将两种细胞融合)利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞交瘤细胞(4)利用动物细胞培养技术大量培养杂交)利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞瘤细胞 4 4、过程:、过程:注射抗原注射抗原B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选,继续培养筛选,继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体思考:思
9、考:(1)(1)、本过程利用了哪些原理?、本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理(2)(2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合?细胞融合?这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有遗传物质,不仅具有B B细胞分泌抗体的能力,而细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体克隆抗体5 5、应用:、应用:(1)(1)、临床诊断、临床诊断(2)(2)、作为载体,运载抗癌药物,形成、作
10、为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹生物导弹”治疗肿瘤治疗肿瘤资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和定位体内做体内诊断,借以鉴别和定位体内“病灶病灶”也引起人也引起人们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的
11、诊断。断。小结小结两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法灭活一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案风杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗?为什么?、该方案能达到预期效果吗?为什么?4、图中、图中B为为_过程,常用过程,常用_作为诱导剂,该细胞继作为诱导剂,该细胞继承承_的
12、遗传特性,既能的遗传特性,既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养,该过程包括过程指细胞培养,该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段,其培养两个阶段,其中中_代以内的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代50B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A
13、C1.1.动物细胞工程技术的基础是:()动物细胞工程技术的基础是:()A A动物细胞融合动物细胞融合B B胚胎移植胚胎移植C C动物细胞培养动物细胞培养D D核移植核移植在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()确的是()A A结果是相同的结果是相同的B B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同C C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同D D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,诱导融合后
14、,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是(在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A A B B C C D D C;https:/ ;uyd68vau 他的这一番话后却断然摇头,轻轻地说:“我知道,老大哥你是好意,可我,这辈子里不会再青丫头她爹,永远也走不出我的心里了”乔氏说不下去了,拿出手绢擦拭着不断涌流出来的泪水。船老大一时语塞,不知道如何继续往下说了。停一停,乔氏又说:“不错,耿大哥实在是一个少见的
15、好男人,可我和他,只能永远做兄妹了。你说得对,我和小青她爹是希望耿大哥的大儿子能够做我们的女婿的。所以啊,我倒是希望,老大哥你找个合适的机会,给这两个娃娃撮合撮合吧。如果这事情真成了的话,那我和耿大哥就是儿女亲家了。这件事情,是我最挂心的”看乔氏已经把话说到这个份儿上,船老大也不好再开导劝说她什么了。但犹豫一下,他还是轻轻地对乔氏说:“为两个娃娃撮合婚事的事情,你大可不必为难,包在我身上了。不过啊,我还是很担心”乔氏着急地问:“你担心什么啊?”“白兄弟如今不在了,耿兄弟如果不愿意被人瓜田李下的说闲话,非要搬出去住,或者离开武昌镇呢?果真那样的话,这事情就有些不太好办了。”乔氏赶快说:“不会的,
16、还有娃娃们呢。再者说了,身正不怕影子歪,没事儿的。”船老大只好说:“那好吧。如果你想让我什么时候给娃娃们撮合婚事了,请随时告诉我!”乔氏点点头,感激地说:“我一定会的!”这时候,就听到小青大声喊:“姆妈,老大伯伯,你们也来呀!”乔氏和船老大远远望去,耿老爹正被小儿子拉着满江边追着看鱼群呢!更远的地方,小青、耿正和耿英正在向他们招手。乔氏对船老大说:“咱们也去他们那边吧。像耿大哥说的,不要扫了他们的兴!”于是,乔氏和船老大也轻快地往他们那边走去了。看看日头正午了,船老大招呼大家说:“走喽,吃饭去!吃完饭再接着玩儿。下午,咱们坐小船儿到下游不远处的静水弯钓鱼去!”112第三十回 耿老爹一诺千金完新
17、屋|(船老大亲送抚恤金,照顾遗亲兄弟情;重返汉口探消息,一诺千金完新屋。)蔬菜水果的贩卖生意还好。在进入腊月之前,耿家父子们又赚了一些辛苦钱。这期间,耿老爹估摸着新屋的房顶、后墙和隔间墙已经干得差不多了,还停了几天蔬菜水果的贩卖生意,带领耿正兄妹三人和小青,将五间新屋的第一次屋内大胶泥也做好了。乔氏的情绪慢慢好转了,还专门做了两次红烧武昌鱼犒劳他们。“七七”是最后做的一个“七”,也称作“尽七”。古人认为,做完“尽七”以后,逝者就投胎转世去了;所以,还活在世上的亲人们就不应该太多地想念他们了。当然,以后还会做“百日”祭和“周年”祭,但相对来讲,亲人们悲伤情绪会随着时间的推移越来越少,心情自然也就越来越轻松了。白百大逝去七七四十九天那一日早饭后,船老大照例又早早派马车来