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1、红细胞和白细胞计数红细胞和白细胞计数医学检验系一、红细胞计数一、红细胞计数l目的目的 掌握显微镜手工计数的方法。l原理原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数。一、红细胞计数一、红细胞计数l器材器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球l试剂试剂 生理盐水l标本标本 EDTA抗凝血6操作操作l1 加稀释液 取小试管1支,加红细胞稀释液2ml。l2 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10l,擦去管外余血,轻轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管23次,立即混匀。l3 充池 混匀后用微量吸管将红细胞
2、悬液冲入计数池,室温下平放35分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。l4 计数 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。5计算 红细胞/L=N25/510106200=N1010 =N/1001012注意事项注意事项 1.将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。2.红细胞在计数池中若分布不均,每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内,2次红细胞计数相差不得超过5%。二、白细胞计数二、白细胞计数l目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。l原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,在显
3、微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数。l器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球l试剂 白细胞稀释液l标本 EDTA抗凝血二、白细胞计数二、白细胞计数l1.加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液于小试管中。l2.加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l,擦去管外余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管23次,混匀。l3.充池 混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池,室温下平放35分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。l 4.计数 用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。l 5.计算 红细胞/L=N/41010620=N/20109/L 操作操作l 1.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。l 2.白细胞在计数池中若分布不均,大方格间细胞计数相差一般不超过10%。l 3.白细胞数量过多时,可采取加大稀释倍数的方法。l 4.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,它可使白细胞计数偏高,此时应计算白细胞校正值。注意事项注意事项l作业作业 l1.本次实验的关键环节是什么?l2.假定某次白细胞计数为6109/L,其中分类100个白细胞有20个有核红细胞,问白细胞的实际数量是多少二、白细胞计数二、白细胞计数