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1、红细胞比容和三种平胞比容和三种平均均值网网织红细胞胞计数数 1.常量法常量法(Wintrobe法法)和微量法和微量法(microhematocrit)将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中，将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。5层：血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原层：血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法血液分析仪法 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出，由红细胞平均体积和红细
2、胞计数两项指标后导出，Hct红细胞计数红细胞计数红细胞平均体积。红细胞平均体积。检测原理检测原理方法方法优点优点 缺点缺点温氏法温氏法无需特殊仪器，广泛无需特殊仪器，广泛应用应用不能完全排除残留血浆，且不能完全排除残留血浆，且单独采血，用血量大单独采血，用血量大微量法微量法快速快速(5min)标本用量标本用量小、结果准确、小、结果准确、重复重复性好。性好。WHO推荐的首推荐的首选参考方法选参考方法有残留血浆，但较温氏法少有残留血浆，但较温氏法少电阻抗法电阻抗法简便快速简便快速(5-15s)白细胞、血小板增多可引白细胞、血小板增多可引起血液导电异常，使结果不起血液导电异常，使结果不可靠可靠血细胞
3、分析仪法血细胞分析仪法简便快速、精密度高，简便快速、精密度高，无需单独采血无需单独采血准确性稍低，结果仅供参考准确性稍低，结果仅供参考4 1.操作规范化操作规范化 避免操作误差，如抗凝量不准，混匀不充分，离心避免操作误差，如抗凝量不准，混匀不充分，离心速度不均等。速度不均等。2注意干扰因素注意干扰因素 假性增高：红细胞形态异常和红细胞增多时应注明，假性增高：红细胞形态异常和红细胞增多时应注明，(细胞变形性减低和数量增多细胞变形性减低和数量增多 血浆残留量增加血浆残留量增加)；高网织红细胞或高白细胞等高网织红细胞或高白细胞等 假性降低：体外溶血、自身凝集等。假性降低：体外溶血、自身凝集等。质量保
4、证质量保证参考值参考值男性：男性：0.3800.508；女性：女性：0.3350.450 临床意义临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标，减低是诊断贫血的指标，HCT的高低与红细胞的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。临床意义临床意义 1临床补液量的参考临床补液
5、量的参考 各种原因导致脱水时，各种原因导致脱水时，HCT都会增高，补液时可都会增高，补液时可监测监测HCT，HCT恢复正常表示血容量得到纠正。恢复正常表示血容量得到纠正。2真性红细胞增多症诊断指标真性红细胞增多症诊断指标 当当HCT大于大于0.7，RBC为为(7-10)X1012L,Hb大于大于180gL，即可诊断。，即可诊断。临床意义临床意义 3红细胞平均指数计算的基础数据红细胞平均指数计算的基础数据 红细胞平均值红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态可用于贫血的形态学分类。学分类。4血液流变学指标血液流变学指标 HCT增高表明红细胞数量偏高，增高表明红细胞数量偏高，全血黏度增加，
6、严重者表现为高黏滞综合征，全血黏度增加，严重者表现为高黏滞综合征，微循环障碍、组织缺氧。微循环障碍、组织缺氧。HCT与其他血液流变学指标联合应用，可对一些与其他血液流变学指标联合应用，可对一些血栓前状态进行监测。血栓前状态进行监测。任务五任务五 红细胞平均指数计算红细胞平均指数计算红红细细胞胞平平均均容容积积(mean corpuscular volume，MCV)，指指每每个个红细胞平均体积的大小，以飞升红细胞平均体积的大小，以飞升(f1)为单位；为单位；红红细细胞胞血血平平均均红红蛋蛋白白含含量量(mean corpuscular he-moglobin，MCH)，指指每每个个红红细细胞胞
7、内内平平均均所所含含血血红红蛋蛋白白的的量量，以以皮皮克克(pg)为为单位；单位；红红细细胞胞平平均均血血红红蛋蛋白白浓浓度度(mean corpuscular Hemoglobin concentration，MCHC)，指指平平均均每每升升红红细细胞胞中中所所含含血血红红蛋蛋白白浓度浓度(gL)。1011 检测原理检测原理 1手手工工法法 同同时时计计数数红红细细胞胞，测测定定血血红红蛋蛋白白和和血血细细胞胞比比容容，计算出红细胞计算出红细胞3个平均指数。个平均指数。例：例：RBC为为3.50X1012L，Hct为为0.36，Hb为为120g/L Hct 0.36MCV（fl）103（fl
8、）RBC 3.50X1012L Hb HbMCH（pg），），MCHC（gL）RBC Hct检测原理检测原理2血血液液分分析析仪仪 能能直直接接导导出出MCV的的值值，再再结结合合仪仪器器直直接接测测定定的的RBC和和Hb，计计算算出出MCH和和MCHC MCHHbRBC，MCHCHb(RBCMCV)。参考值参考值14临床意义临床意义贫血分类贫血分类 MCVMCHMCHC 贫血贫血 正细胞贫血正细胞贫血 正常正常正常正常正常正常再生障碍性贫血、急再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些性失血性贫血、某些溶血性贫血溶血性贫血大细胞贫血大细胞贫血 增高增高增高增高正常正常 各种造血物质缺乏或各种造血物
9、质缺乏或利用不良的贫血利用不良的贫血单纯小细胞贫血单纯小细胞贫血 减低减低减低减低正常正常慢性感染、慢性肝肾慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血疾病性贫血小细胞低色素贫小细胞低色素贫血血 减低减低减低减低减低减低缺铁性贫血及铁利用缺铁性贫血及铁利用不良贫血，慢性失血不良贫血，慢性失血性贫血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类作为贫血的红细胞形态学分类（一）检测原理红细胞体积分布宽度（RDW）反映样本中红细胞体积大小的异质程度，即反映红细胞大小不等客观指标，常用变异系数（CV）表示，由血液分析仪的红细胞体积直方图导出。（二）方法学评价RDW是对红细胞体积大小的评价，比血涂片红细胞形态大小的观察更为客观和准确
10、。（三）质量控制RDW异常受样本中红细胞碎片、红细胞凝集、双相性红细胞的影响。（四）临床意义1.贫血形态学分类：根据红细胞形态大小不同，将贫血分成6类1983年由Bessman提出的新贫血分类法对贫血病因鉴别诊断具有更大意义。MCV和RDW联合检测对贫血形态学鉴别诊断灵敏度为86.7%100%，特异度为83.4%100%。2.作为缺铁性贫血（IDA）：筛选诊断和疗效观察的指标：RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上，特异性不强，可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时，RDW开始增大，随后逐渐降至正。3.鉴别缺铁性贫血和-珠蛋白生成障碍性贫血：RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上
11、，特异性不强，可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时，RDW开始增大，随后逐渐降至正常。18任务六任务六 网织红细胞计数网织红细胞计数网网织织红红细细胞胞(reticulocyte(reticulocyte，Ret)Ret)是是晚晚幼幼红红细细胞胞脱脱核核后后到到完完全全成熟红细胞间的过渡细胞成熟红细胞间的过渡细胞胞胞质质中中残残存存嗜嗜碱碱性性物物质质核核糖糖核核酸酸(RNA)(RNA)，经经煌煌焦焦油油蓝蓝等等活活体体染染色色后后，嗜嗜碱碱性性物物质质凝凝聚聚成成蓝蓝黑黑色色颗颗粒粒，连连缀缀成成线线，线连接成网。线连接成网。属属于于尚尚未未完完全全成成熟熟的的红红细细胞胞(当当嗜嗜
12、碱碱性性物物质质消消耗耗殆殆尽尽后后才才被视为成熟红细胞被视为成熟红细胞)，一般为，一般为8 89.5m9.5m。1920 检测原理检测原理 1.普通光学显微镜法普通光学显微镜法 活体染色（新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色（新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团的碱性着色基团 网织红细胞网织红细胞RNA的磷酸基的磷酸基(带负电荷带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，胶体间的负电荷减少而发生凝缩，蓝色的点状、线状或网状结构蓝色的点状、线状或网状结构，显显微微镜镜下下计计数数1000个个红红细细胞胞中中所所占占的的网网织织红红细细胞胞数数，以以百百分比或分数数表示。分比或分数数表示。检测原理检测原理
13、 流式细胞仪法流式细胞仪法2仪器法仪器法 网织红细胞计数仪网织红细胞计数仪 血液分析仪法。血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中荧光染料与网织红细胞中RNA结合，结合，发出特定颜色的荧光进行发出特定颜色的荧光进行RNA定量定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞 比率比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。并计算网织红细胞其他参数。血液分析仪法血液分析仪法 提供与网织红细胞相关的提供与网织红细胞相关的多个多个参数，参数，网织红细胞绝对值、网织
14、红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。网织红细胞成熟指数。24【质量保证质量保证】以手工计数法为重点。以手工计数法为重点。1染料选择染料选择【质量保证质量保证】2正确辨认网织红细胞正确辨认网织红细胞 外周血中网织红细胞主要为外周血中网织红细胞主要为型，凡含有型，凡含有2个以上个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。网织颗粒的红细胞均应计为网
15、织红细胞。3网织红细胞计数方法网织红细胞计数方法 (1)Miller窥盘：窥盘：(2)显微成像系统：计算机和细胞形态分析软件，显微成像系统：计算机和细胞形态分析软件，HFR：粗颗粒堆积成网状。：粗颗粒堆积成网状。MFR：粗颗粒在：粗颗粒在10个以上，或细小颗粒超过个以上，或细小颗粒超过15个。个。LFR：细胞内含：细胞内含15个以下细小颗粒个以下细小颗粒 网织红细胞百分数：网织红细胞百分数：成人和儿童成人和儿童:0.0050.025 新生儿新生儿:0.020.06网织红细胞绝对数：网织红细胞绝对数：成人和儿童成人和儿童:(2484)X109L参考值参考值临床意义临床意义1评价骨髓增生能力，判断
16、贫血类型评价骨髓增生能力，判断贫血类型。(1)网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，各种增生性贫血各种增生性贫血(2)网织红细胞减少：常见于再生障碍性贫血网织红细胞减少：常见于再生障碍性贫血(3)鉴别贫血：鉴别贫血：临床意义临床意义2评价疗效评价疗效(1)观察贫血疗效观察贫血疗效：贫血随访贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后，缺铁贫或巨幼贫有效治疗后，23d后后Ret开始上升，开始上升，710d达到最高峰达到最高峰(约约10)，2周后渐降至正常。周后渐降至正常。(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复：骨髓移植后监测骨髓造血恢复：骨髓移植后第骨髓移植后第21天，如天，
17、如Ret大于大于15X109L，常表，常表示无移植并发症；示无移植并发症；若骨髓开始恢复造血功能，首先若骨髓开始恢复造血功能，首先HFR和和MFR上升，上升，其次为网织红细胞计数值上升。其次为网织红细胞计数值上升。临床意义临床意义3放疗和化疗的监测放疗和化疗的监测 指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。骨髓抑制。机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和和MFR降低，而后网织红细胞数值降低；降低，而后网织红细胞数值降低；停止放、化疗，骨髓功能恢复后，这些指标依次停止放、化疗，骨髓功能恢复后，这些指标依次上升。上升。临床意义临床意义谢谢大家！结结 语语