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1、会计学1遗传学遗传图的制作和基因定位遗传学遗传图的制作和基因定位遗传作图、基因定位的意义遗传作图、基因定位的意义n n展开基因功能研究的需要;展开基因功能研究的需要;n n阐明发育的分子机制、分子标记辅助育种阐明发育的分子机制、分子标记辅助育种工作的基础;工作的基础;n n对于农作物等基因组序列冗长的物种,作对于农作物等基因组序列冗长的物种,作图定位是基因克隆的必备环节。图定位是基因克隆的必备环节。第1页/共12页3.1 3.1 基因定位的基本方法基因定位的基本方法基因定位的基本方法基因定位的基本方法n n两点测验:通过一次杂交和一次两点测验:通过一次杂交和一次测交来确定两对基因的重组率,测交
2、来确定两对基因的重组率,然后根据重组率确定距离。然后根据重组率确定距离。n n首先将三对性状两两组合成三组,首先将三对性状两两组合成三组,进行三次杂交和三次测交,求算进行三次杂交和三次测交,求算每两对相对性状基因的重组率,每两对相对性状基因的重组率,推出三个基因的排列顺序。推出三个基因的排列顺序。第2页/共12页ShShCCshsh cc同源染色体同源染色体Sh Csh cSh csh C Sh CCShshshccc(交换)(交换)同源染色体同源染色体同源染色体同源染色体(交换后)(交换后)CCccshshShSh(后期II染色单体分开)同源染色体配对、交换重组示意图同源染色体配对、交换重组
3、示意图交换都发生在同源染色交换都发生在同源染色体相靠近的非姊妹染色体相靠近的非姊妹染色体之间体之间第3页/共12页Sh Csh c二二分分体体Sh CSh CSh CSh CSh Csh csh csh csh csh csh CSh cC ShC ShC Shc ShC shc shc shc sh全部亲本型全部亲本型1/2亲型亲型 1/2重组型重组型F1交换交换F1新新一部分染色体交换发生在连锁基因之内,重组配子 1/2重组、1/2亲型配子所以重组型配子自然少于所以重组型配子自然少于50%50%交交换换发发生生在在连连锁锁基基因因之之外外非非重重组组配配子子第4页/共12页玉米两点测验数据
4、玉米两点测验数据试验类别试验类别亲本和亲本和后代后代表现型及基因型表现型及基因型种子粒数种子粒数重组型配重组型配子()子()种类种类亲本组合或亲本组合或重新组合重新组合 第第 一一 相相 个个 引引 试试 组组 验验P1P2 有色、饱满(有色、饱满(CCShSh)无色、凹陷(无色、凹陷(ccshsh)测测交交(Ft)后后代代有色、饱满(有色、饱满(CcShsh)有色、凹陷(有色、凹陷(ccShsh)有色、凹陷(有色、凹陷(Ccshsh)无色、凹陷(无色、凹陷(ccshsh)亲亲新新新新亲亲403215214940353.6T8368 第第 二二 相相 个个 斥斥 试试 组组 验验P1P2糯性、
5、饱满(糯性、饱满(wxwxShSh)非糯性、凹陷非糯性、凹陷WxWxshsh)测测交交(Ft)后后代代非糯性、饱满非糯性、饱满WxwxShsh)非糯性、凹陷非糯性、凹陷Wxwxshsh)糯性、饱满(糯性、饱满(wxwxShsh)糯性、凹陷(糯性、凹陷(wxwxshsh)亲亲新新新新亲亲588515311488599120.0T14985 第第 三三 相相 个个 引引 试试 组组 验验P1P2非糯性、有色非糯性、有色 WxWxCC)糯性、无色(糯性、无色(wxwxcc)测测交交(Ft)后后代代非糯性、有色(非糯性、有色(WxwxCc)非糯性、无色(非糯性、无色(Wxwxcc)糯性、有色(糯性、有
6、色(wxwxCc)糯性、无色(糯性、无色(wxwxcc)亲亲新新新新亲亲2542739717271622.0T6714第5页/共12页由第一、二实验测得的由第一、二实验测得的CSh间的间的重组率重组率重组率重组率为为3.6,WxSh间的间的重组率重组率重组率重组率为为20.0,据此初步推测,据此初步推测3个基因的排列顺序可能是:个基因的排列顺序可能是:Wx 20.0 Sh 3.6 C 23.6Wx 20.0 Sh C3.616.4由第三组试验测得由第三组试验测得WxC之间的之间的重组率重组率重组率重组率为为22.0,与,与23.6较为接近,所以可以推断较为接近,所以可以推断3个基因的排列顺序为
7、第一种排列方式。个基因的排列顺序为第一种排列方式。WxC重组率重组率为23.6WxC重组率重组率为16.4两点测验繁杂,确定三个基因位置需要进行三次杂交和测交;以重组率两点测验繁杂,确定三个基因位置需要进行三次杂交和测交;以重组率代替交换值,未将双交换估计在内,在距离超过代替交换值,未将双交换估计在内,在距离超过5个遗传单位时,可发个遗传单位时,可发生双交换,所以准确性较差。生双交换,所以准确性较差。第6页/共12页三点测验(三点测验(三点测验(三点测验(一定要掌握!一定要掌握!一定要掌握!一定要掌握!)n n是三对连锁基因定位最常用的方法,首先是三对连锁基因定位最常用的方法,首先用三对相对性
8、状用三对相对性状用三对相对性状用三对相对性状均有差异的两纯合亲本杂交,然后用杂种均有差异的两纯合亲本杂交,然后用杂种均有差异的两纯合亲本杂交,然后用杂种均有差异的两纯合亲本杂交,然后用杂种F F1 1与纯隐与纯隐与纯隐与纯隐性个体进行测交,性个体进行测交,性个体进行测交,性个体进行测交,根据测交子代不同类型占总类型的百分根据测交子代不同类型占总类型的百分数,确定数,确定F F1 1所产生的配子类型和比例,用于估计双交换值、推所产生的配子类型和比例,用于估计双交换值、推出基因排列顺序,并估算基因之间的距离。出基因排列顺序,并估算基因之间的距离。n n三点测验通过一次杂交和一次测交,三点测验通过一
9、次杂交和一次测交,同时确定同时确定同时确定同时确定3 3对基因在对基因在对基因在对基因在染色体上的位置,染色体上的位置,染色体上的位置,染色体上的位置,将将双交换包括在交换值中双交换包括在交换值中双交换包括在交换值中双交换包括在交换值中,因而对,因而对距离的估算更加准确。又因只做一次杂交、一次测交,所以距离的估算更加准确。又因只做一次杂交、一次测交,所以更便于控制环境影响。更便于控制环境影响。第7页/共12页玉米的三点测验(玉米的三点测验(玉米的三点测验(玉米的三点测验(+表示显性基因型)表示显性基因型)表示显性基因型)表示显性基因型)P P 凹陷、非糯、有色凹陷、非糯、有色饱满、糯性、饱满、
10、糯性、无色无色 sh +wx csh +wx cF F1 1凹陷、糯性、无色凹陷、糯性、无色凹陷、糯性、无色凹陷、糯性、无色 第8页/共12页玉米三点测验数据玉米三点测验数据玉米三点测验数据玉米三点测验数据测交子代的测交子代的表现型表现型由测交子代表现型推知由测交子代表现型推知的的F1配子类型配子类型粒粒 数数 F1配子来源配子来源 饱满、糯性、无色饱满、糯性、无色+wx c 2708 亲型亲型 凹陷、非糯性、有色凹陷、非糯性、有色 sh +3538 亲型亲型 饱满、非糯性、无色饱满、非糯性、无色+c 626 单交换单交换型型 凹陷、糯性、有色凹陷、糯性、有色 sh wx +601 单交换单交
11、换型型 凹陷、非糯性、无色凹陷、非糯性、无色 sh +c 113 单交换单交换型型 饱满、糯性、有色饱满、糯性、有色+wx +116 单交换单交换型型 饱满、非糯性、有色饱满、非糯性、有色 +4 双交换型双交换型 凹陷、糯性、无色凹陷、糯性、无色 sh wx c 2 双交换型双交换型 8 8种类型的种类型的种类型的种类型的FtFt子代,子代,子代,子代,4 4种比例,典型的种比例,典型的种比例,典型的种比例,典型的3 3对基因连锁遗传表现,对基因连锁遗传表现,对基因连锁遗传表现,对基因连锁遗传表现,可用于推断可用于推断可用于推断可用于推断3 3对基因在染色体上的顺序,并计算距离。对基因在染色体
12、上的顺序,并计算距离。对基因在染色体上的顺序,并计算距离。对基因在染色体上的顺序,并计算距离。第9页/共12页确定三对基因的顺序确定三对基因的顺序确定三对基因的顺序确定三对基因的顺序 根据测交子代表现型,推测根据测交子代表现型,推测F1杂杂合体合体3对连锁基因的顺序:双交对连锁基因的顺序:双交换配子中,没有变化的基因决定换配子中,没有变化的基因决定的性状在中间。的性状在中间。据此可以确定本例三对连锁基因据此可以确定本例三对连锁基因在染色体上顺序是在染色体上顺序是wx sh c 第10页/共12页计算相邻基因的交换值,确定基因之间的距离计算相邻基因的交换值,确定基因之间的距离计算相邻基因的交换值,确定基因之间的距离计算相邻基因的交换值,确定基因之间的距离wx 18.4 sh 3.5 c 标出遗传距离标出遗传距离第11页/共12页