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1、抗核抗体自身抗体的血清学检测，包括抗核抗体（ANAs）和特异性核抗原（如双链 DNA（dsDNA）的抗体，在全身性风湿性疾病的诊断中发挥重要作用。然而，单独的自身抗体的测试结果不足以确定全身性风湿性疾病的诊断。如果没有导致推定诊断的临床评估，则不应进行自身抗体检测。ANA 的最初发现基于间接免疫荧光。免疫荧光抗体（IFA）仍然是最常用的检测抗核抗体的方法。在该方法中，将稀释的患者血清在含有单层人上皮细胞的载玻片上孵育。如果存在抗体，则其与细胞核结合。洗涤后，通过添加荧光抗人IgG来检测结合的抗体。阳性细胞显示出明亮的绿色核荧光，具有明显的染色模式。最初以 1:40 至 1：160 的稀释度测试
2、患者样品。然后稀释阳性样品并报告荧光图案和滴度。滴度是仍然显示免疫荧光核染色的最高血清稀释度。Hep-2 细胞是优选的细胞系，因为它们具有人源，高有丝分裂活性和诱导临床上重要抗原表达的能力。HEp-2 细胞估计有 100 至 150 种抗原，是所有方法中的大多数，允许检测最大数量的抗体特异性。四种公认的染色模式是均匀的，斑点的，核仁的和着丝粒的。以前，尝试将荧光模式与特定疾病相关联。例如，认为均质模式表明SLE 或药物诱导的 SLE，核仁模式硬皮病，着丝粒模式 CREST 综合征和斑点模式多种疾病。然而，在过去几年中，染色模式的临床重要性已经减弱。不同的荧光模式和风湿性疾病之间存在相当大的重叠
3、，并且已经可以获得更具体的自身抗体测试。在 20 世纪 80 年代，开发了 ANA ELISA 筛选。在该方法中，抗原从细胞中提取或合成，然后固定在微量滴定板的表面上。将稀释的患者血清加入微孔中并使其孵育。如果存在 ANA，它们与固相抗原结合。洗涤后，通过添加酶偶联的抗人 IgG抗体检测结合的抗体。添加无色酶底物，如果存在酶偶联抗体，则将其转化为有色产物。光度测量颜色强度。颜色强度超过确定的截止值的微孔被认为是阳性的。ELISA 提供了优于 IFA 的几个优点，包括更自动化的样品制备和更客观的半定量测量。ELISA 的缺点包括在提取过程中可能使核抗原变性和粘附到固相上。今天，大多数商业 ELI
4、SA 试剂盒使用 HEp-2 细胞提取物和/或重组抗原。不幸的是，抗原的数量和数量尚未标准化，导致制造商对制造商的测试变异性。通常，基于HEp-2细胞提取物的 ELISA 试剂盒与 IFA 最佳相关。最新的分析方法是多重免疫测定（MIA），其使用与具有不同荧光信号的荧光聚苯乙烯珠共价结合的合成个体核抗原。将抗原包被的荧光珠的混合物与患者血清在单个管中孵育。如果存在 ANA，它与涂有互补抗原的荧光珠结合。洗涤后，使用荧光染料缀合的抗人 IgG 抗体检测结合的抗体。然后通过流式细胞术分析珠子组，其从聚苯乙烯珠子和标记的检测抗体检测两种荧光信号。使用该方法，可以快速分析单个患者样品的多种不同抗体。这
5、消除了 ELISA 和 HEp-2 细胞测定所需的多样品移液。MIA 似乎比 IFA 或 ELISA 敏感得多。比较研究表明，如果单独使用 MIA 作为 ANA筛查，它将错过大量 ANA 阳性患者。自 2006 年以来美国病理学家的能力测试（CAPPT）结果分析表明，MIA 的敏感性降低（假阴性率较高），表明 MIA 无法检测 IFA检测到的某些 ANA 特异性。事实上，一些 MIA 试剂盒中不存在核仁抗原。ANA 屏幕是 CTD 测试算法中的标记实验室测试。MIA 的敏感性降低引起了风湿病学家对 CTD 丢失病例可能性的担忧。最近发表了一篇由于假阴性固相 ANA 筛查引起的疑似 CTD 延迟
6、诊断的病例报告（NEJM 2009;360：711-20）。2009 年 2 月，美国风湿病学会发表了一份立场声明，声称 IFA 应该仍然是 ANA 测试的标准，因为它具有更高的灵敏度。他们建议使用 ELISA 或 MIA 的医院和实验室应证明其检测方法具有与 IFA 相当的敏感性和特异性。如果医生根据临床病史，身体检查结果和其他实验室检查结果认为有合理的临床怀疑 SLE 或其他系统性风湿性疾病，则应订购 ANA 检查。除了 SLE 之外，大量不同的病症与阳性 ANA 相关，包括许多慢性炎症和传染病以及一些药物治疗。阳性阳性 ANAANA 的频的频率（）率（）95-10060-8040-703
7、0-8020-5020-60ANAANA 的临床应用的临床应用ANAANA 对诊断非常有用的疾病对诊断非常有用的疾病SLE系统性硬化症（硬皮病）ANAANA 对诊断有一定作用的疾病对诊断有一定作用的疾病干燥综合症特发性炎性肌炎（皮肌炎或多发性肌炎）ANAANA 对于监测或预后有用的疾病对于监测或预后有用的疾病少年慢性少关节炎与葡萄膜炎雷诺现象ANAANA 是诊断标准的一部分是诊断标准的一部分药物诱导的 SLE自身免疫性肝病混合性结缔组织病（MCTD）ANAANA 对诊断无效的疾病对诊断无效的疾病类风湿关节炎多发性硬化症特发性血小板减少性紫癜甲状腺疾病盘状狼疮传染性疾病恶性肿瘤硅胶乳房植入患者纤
8、维肌痛患有自身免疫性疾病的患者的亲属滴度 1:40 的正常人滴度 1：160 的正常人10010010030-502510-3030-505-25变化很大变化很大15-2515-255-2520-30五大量正常健康人的ANA阳性。健康人群中ANA的流行程度因性别和年龄而异;老年人，特别是 65 岁以上的女性，更常见的是有积极的结果。滴度通常很低;不到 5的健康人的滴度为 1：160 或更高。由于一般人群 SLE 患病率低（每 10 万人 50 例），随机发现 ANA 阳性结果的大多数人没有 SLE。ANA 和特异性自身抗体是美国风湿病学会系统性红斑狼疮（SLE）诊断标准的组成部分。几乎所有患有
9、活性，未治疗的 SLE 的患者（95-100）都具有阳性 ANA。美国风湿病学会美国风湿病学会 SLESLE 分类标准分类标准颧骨皮疹盘状皮疹光敏性口腔或鼻腔溃疡2 个或更多周围关节的关节炎胸膜炎或心包炎肾脏疾病伴有持续性蛋白尿或细胞管型不明原因的癫痫发作或精神病溶血性贫血，白细胞减少或淋巴细胞减少 2 次或更多次阳性 ANA，抗 ds DNA 抗体，抗 Sm 抗体或抗磷脂抗体没有迹象或症状提示 SLE 的患者患前期的可能性较低。在这些患者中，阳性ANA测试结果几乎不会增加患者患 SLE 的可能性。事实上，阳性 ANA 导致这样的情况可能会误导并导致不必要的测试，错误的诊断，甚至不适当的治疗。
10、患有硬皮病（系统性硬化症）的患者通常会出现一组独特的临床症状和体征。60至 80的患者有阳性结果。诊断不需要阳性 ANA，但可以提供支持。阴性结果可能导致医生考虑其他纤维化疾病，如局部硬皮病，嗜酸性筋膜炎和硬肿症。干燥综合征患者中有 40至 70具有阳性 ANA 检测结果。这一发现支持诊断，但不是绝对的要求。测试对于患有持续性干燥症症状的患者或生下患有先天性心脏传导阻滞的儿童的女性非常有用。ANA在30至 80的多发性肌炎和皮肌炎患者中呈阳性。阳性结果是支持性的，但阴性结果不排除诊断。ANA 阳性结果是药物诱发的红斑狼疮，自身免疫性肝炎和混合性结缔组织病的诊断的不可或缺的组成部分。在进行这些诊
11、断之前，患者必须具有阳性ANA。药物诱导的 SLE 的所有研究都包括 ANA 阳性结果的定义。类似地，诊断某些类型的自身免疫性肝炎和混合结缔组织病（MCTD）的标准规定 ANA 测试结果对于诊断是阳性的。雷诺现象通过体格检查或通过引发特定的临床病史来诊断。ANA 测试无助于确定诊断，但可能提供预后信息。雷诺现象可能与几种风湿性疾病有关，包括 SLE，类风湿性关节炎和硬皮病。然而，雷诺现象在一般人群中也很常见，并且这些患者中 80从未发生过全身性风湿性疾病。雷诺现象患者的阳性 ANA 使全身性风湿性疾病发生的可能性从 20增加到 30，而阴性结果则降低了约 7的可能性。ANA 对于诊断青少年慢性
12、关节炎没有用。然而，在患有已知疾病的儿童中，ANA阳性结果可能预示葡萄膜炎的发展，这是一种严重的并发症。大约三分之一的ANA 阳性患者发生葡萄膜炎。ANA 阳性的患者应进行葡萄膜炎筛查。ANA 不是诊断抗磷脂抗体综合征所必需的。然而，大约 50患有该综合征的患者具有阳性 ANA。ANA 的存在增加了该综合征继发于 SLE 的可能性。除上述疾病外，ANA 检测未提供有关预后的有用信息。即使对于ANA 可用于诊断的那些疾病也是如此。ANA 在评估疾病活动方面无用。由于ANA 没有提供关于预后或疾病活动的有用信息，因此没有迹象表明顺序监测 ANA 滴度。ANAANA 后续测试后续测试可获得针对以下抗
13、原的抗体的特异性后续测试：dsDNA，Sm，RNP，SS-A（Ro），SS-B（La，）Scl-70，组蛋白和 Jo-1。除少数例外情况外，如果 ANA 为阴性或弱阳性，则不应订购这些测试，因为不到 5的 ANA 滴度1：160 的患者将进行阳性随访测试。除了针对双链 DNA 的抗体外，这些抗体滴度的变化不能提供有用的临床信息。因此，没有指出在获得阳性结果后重复除抗 dsDNA 之外的测试。由于与这些检查相关的疾病往往是动态的，如果临床情况随着时间的推移发生了相当大的变化，则可能需要重新检查阴性结果。ANAANA 模式模式同质自身抗体自身抗体/抗原抗原双链 DNA疾病协会疾病协会SLE 和其他
14、风湿性疾病的低水平组蛋白史密斯（Sm）核糖核蛋白（RNP）斑点SS-A（Ro）SS-B（La）着丝粒着丝粒药物诱发狼疮，SLESLEMCTD，SLESjogren，SLE干燥波峰Sclerodorma多发性肌炎核仁Scl-70（DNA 拓扑异构酶 1）核仁/胞质SLE乔1ANA 可能在许多疾病中呈阳性，其中一些疾病具有与SLE 类似的临床特征。另外两项测试可以帮助确定 SLE 的诊断：测试 dsDNA（抗 dsDNA）和 Smith 抗原（抗-Sm）的自身抗体。抗 DNA 抗体是指与双链 DNA 特异性结合的抗体。通过称为 Farr 测定的放射免疫测定技术检测抗 dsDNA 抗体。与更常用的酶
15、免疫测定相比，Farr 测定对 SLE 的诊断更具特异性。抗 dsDNA 抗体对 SLE 的特异性接近 100。SLE 的高抗体浓度比正常上限（4 IU/mL）以上的低浓度更具特异性。50至 85的 SLE 患者具有高滴度抗体。在其他自身免疫疾病和健康人中很少发生弱阳性抗 dsDNA 抗体。除了诊断 SLE 外，抗 dsDNA 抗体的测量有助于评估预后和监测疾病活动。肾病在高抗体水平的患者中更常见。抗 dsDNA 浓度的增加通常先于 SLE 患者的疾病活动发作。由于这种关联，许多医生连续测量抗DNA 水平。活动性疾病患者每 1 至 3个月适当的检测间隔，疾病活动较少的患者每 6 至 12 个月
16、检测一次。如果要随着时间的推移可靠地监测疾病活动，则应在同一实验室进行连续测试。Sm（Smith）和相关的核核糖核蛋白（nRNP）是 SLE 中自身抗体的靶标。这些抗原存在于称为剪接体的亚细胞器中，所述剪接体由含有小 RNA 的肽组成。抗 Sm抗体仅存在于 SLE 患者中的 15至 30，但它们对 SLE 具有高度特异性。它们更常发生在患有 SLE 的年轻黑人女性身上。它们几乎从未发生在健康个体或患有其他疾病的患者身上。不应将抗 Sm 抗体与自身免疫性肝病中检测到的抗平滑肌抗体相混淆。抗-RNP 抗体通常与抗-Sm 一起测试，存在于 30-40的 SLE 患者中。然而，抗 RNP 抗体不是 S
17、LE 特异性的，并且不能用于建立 SLE 的诊断。在 35至 60的 SLE 患者中检测到核糖核蛋白 SS-A（Ro）的抗体。抗 SS-A 自身抗体与光敏性，干燥症状，血小板减少症和亚急性皮肤 LE 皮疹有关。亚急性皮肤红斑狼疮是一种广泛的，非瘢痕性的，通常是光敏性的皮肤狼疮形式，具有轻微的全身表现和中枢神经系统和肾脏受累的频率低。抗 SS-A（Ro）抗体与新生儿狼疮强烈相关。母体 IgG 抗体穿过胎盘，导致新生儿疾病。新生儿红斑狼疮的两种主要表现是短暂性皮炎和永久性心脏传导阻滞。光敏性皮炎在生命的最初几周后发展并在 6 个月内消退，与从婴儿的血液循环中清除母体抗体一致。心脏传导阻滞是由于 S
18、S-A 抗体在传导系统组织中的结合。混合性结缔组织病混合性结缔组织病许多患者出现的临床体征和症状与多种系统性风湿性疾病相容。一种这样的重叠综合征是混合性结缔组织病（MCTD）。MCTD 患者具有 SLE，硬皮病和肌炎的重叠特征。关节炎，关节痛，雷诺现象，食道功能障碍和肌炎很常见，但肾脏受累很少见。在没有其他抗体的情况下检测RNP 抗体强烈提示 MCTD 的诊断。诊断MCTD需要两个实验室标准：（1）高滴度RNP 抗体的存在和（2）不存在抗DNA，抗Sm和组蛋白抗体。干燥综合症干燥综合症外分泌腺，尤其是唾液腺和泪腺以及其他器官的淋巴细胞浸润是干燥综合征的特征。最常见的临床表现是干燥症状，干眼症和
19、口腔干燥症。与斯耶格伦综合征最密切相关的自身抗体针对核糖核蛋白 SS-A（Ro）和 SS-B（La）。在 Sogogren综合征患者中，40至 60的患者中检测到 SS-A 抗体。SS-B（La）抗体的发生频率略低，并且在 SS-A 抗体不存在时不会发生。SS-A 和 SS-B 抗体的存在可用于支持干燥综合征的诊断。然而，它们的存在必须在适当的临床背景下进行解释，因为它们也存在于患有 SLE 和其他疾病的患者中。除了诊断，这些抗体提供了一些预后信息。患有这些抗体的患者更多地患有腺外疾病，包括血管炎，紫癜，淋巴结病，白细胞减少，血小板减少，高球蛋白血症和类风湿因子的存在。硬皮病硬皮病硬皮病患者主
20、要分为两类疾病：有限和弥漫性疾病。疾病有限的患者（也称为CREST 综合征）往往比患有弥漫性疾病的患者预后更好。钙质沉着症，雷诺现象，食管功能障碍，硬化和毛细血管扩张是 CREST 综合征的特征。自身抗体可用于区分两种类型的疾病。有限的疾病最常与 ANA 染色的抗着丝粒模式相关。大约 60的硬皮病有限的患者具有抗着丝粒抗体。他们在高加索人中的发生频率高于非洲裔美国人，西班牙裔美国人或亚洲人。抗着丝粒抗体对硬皮病的特异性为 95。大约 40的弥漫性疾病患者具有 Scl-70 的自身抗体。Scl-70 是存在于 DNA 拓扑异构酶 I 上的抗原，其是在基因转录期间负责扭曲和解旋 DNA 螺旋的核酶
21、。针对Scl-70 的抗体通常产生核仁 ANA 图案。具有抗 Scl-70 抗体的硬皮病患者倾向于具有更广泛的皮肤病和内部器官损伤，尤其是肺纤维化。抗 Scl-70 和抗着丝粒抗体很少在同一个体中共存。药物诱发的狼疮药物诱发的狼疮药物诱导的狼疮的适当临床环境包括暴露于致病药物，开发高滴度ANA，不存在抗 dsDNA 抗体，以及存在 SLE 的临床特征。许多药物与 ANA 的发展和提示 SLE的临床体征和症状有关。常见表现包括关节炎，浆膜炎和皮疹。通常不存在肾和CNS 表现。最常见的药物是肼苯哒嗪，异烟肼，普鲁卡因胺和几种抗惊厥药。药物诱导的狼疮也与组蛋白自身抗体的发展有关，组蛋白是 DNA 结
22、合碱性蛋白。抗组蛋白抗体存在于 90至 100的药物性狼疮患者中。80的特发性 SLE 患者也可检测到这些抗体，以及类风湿性关节炎，硬皮病，血管炎和自身免疫性肝病患者。缺乏抗组蛋白抗体使得药物诱导的 SLE 的诊断不太可能，但它们的存在并不能证实该病例是药物诱导的。因此，该抗体的存在偶尔比其不存在有帮助。特发性炎症性肌炎特发性炎症性肌炎患有皮肌炎和多发性肌炎的患者具有炎性浸润和肌肉及其他器官系统的破坏。抗原自身抗体 Jo-1 与肺部受累和关节炎有关。Jo-1 抗原存在于酶，组氨酰-tRNA合成酶上，通常位于细胞的细胞质中，而不是细胞核。约 25的成年肌炎患者中检测到 Jo-1 抗原的抗体，包括：多发性肌炎，皮肌炎和重叠综合征。下表总结了每种系统性风湿性疾病及其敏感性最有用的随访测试。推荐的推荐的 ANAANA 阳性患者随访测试阳性患者随访测试疑似疾病疑似疾病SLEMCTD干燥综合症后续测试后续测试双链 DNA钐SS-ARNPSS-A灵敏度灵敏度（）（）50-8515-3035-6010040-60有限的硬皮病弥漫性硬皮病药物诱发狼疮炎性肌炎标本要求是血液的一个 SST 管SS-B着丝粒图案SCL-70组蛋白乔130-50604090-10025