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1、Ultraviolet/VisiblespectroscopyFifthgroupspeaker:GaoxianzheUVradiationUVradiationistheelectromagneticradiationofawavelengthshorterthanthatofvisiblelight,butlongerthanthatofx-rays.ThetypicalrangeofUVwavelengthis10-400nm.UVabsorption日常生活中,各种溶液之所以呈现不同的颜色,与它对光的选择性吸收有关。当一束由各种波长按一定比例组成的光透过一溶液时,某些波长的光被溶液吸收
2、,而另一些波长的光不被吸收而透过溶液。当透过的光包含有可见光波长范围内的光时,就可以被人眼察到,溶液的颜色正是由透过光的波长所决定。二、Lambert-Beer定律vv研究表明研究表明,有色溶液对单色光的吸收程度与溶液的有色溶液对单色光的吸收程度与溶液的浓度和液层的厚度存在定量关系浓度和液层的厚度存在定量关系,这就是著名的朗这就是著名的朗伯伯-比尔比尔(Lambert-Beer)(Lambert-Beer)定律定律,它是比色分析的基它是比色分析的基础。础。vv当一束平行单色光通过溶液时当一束平行单色光通过溶液时,一部分光被介质吸一部分光被介质吸收收,一部分透过溶液一部分透过溶液,而另一部分则被
3、器皿的表面而另一部分则被器皿的表面反射。如果入射光的强度为反射。如果入射光的强度为I0I0、吸收光的强度为、吸收光的强度为IaIa、透过光的强度为、透过光的强度为It,It,则它们之间的关系为则它们之间的关系为:vvI0=Ia+ItI0=Ia+Itvv当入射光强度当入射光强度I0I0一定时一定时,Ia,Ia越大越大,It,It就越小就越小,即透即透过光的强度越小过光的强度越小,表明有色溶液对光的吸收程度越表明有色溶液对光的吸收程度越大。大。(1)朗伯定律vv一束单色光通过吸光物质后,光的吸收程度与溶液液层厚度成正比关系,即:vvA=lg(I0/It)=Klvv式中:A吸光度;vvI0入射光强度
4、;vvIt透射光强度;vvK比例常数;vvl液层厚度。(2)比尔定律vv一束单色光通过吸光物质后,光的吸收程度与吸光物质微粒的数目(溶液的浓度)成正比关系,即:vvA=lg(I0/It)=Kcvv式中:K比例常数;vvc溶液浓度。(3)朗伯-比尔定律vv若同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响,即把朗伯定律和比尔定律合并,即:vvA=lg(I0/It)=Klcvv式中:K与入射光波长、溶液性质及温度有关的常数。vv一束平行单色光通过一均匀溶液时,其吸光度与溶液浓度和光线通过的液层厚度的乘积成正比,此即为朗伯-比尔定律。vv在单色光和稀溶液的实验条件下，溶液对光线的吸收遵循Lambert-Be
5、er定律。即吸光度（A）与溶液的浓度（C）和吸收池的厚度（l）成正比。A=KlCvv若溶液的浓度用摩尔浓度，吸收池的厚度以厘米为单位，则Beer定律的吸光系数（K）可表达为，即摩尔吸光系数。A=lC=-lgI/I0;即=A/lCvvI0:入射光强度；I:透射光强度UV/VisspectroscopyDefinition:Itstheanalysismethodswithanalysis,determinationandinferenceofmaterialcomposition,contentandstructurebyusingheuv-visspectraandthedegreeofabs
6、orptionwhichproducedbymaterialmolecules,orionsontheabsorptionofultravioletandvisiblelight.Features:highsensitivity,highaccuracy,goodselectivity,easytooperate,fastanalysisspeed,wideapplicationrange.二、紫外可见吸收光谱与分子结构的关系(一)有机化合物的紫外可见吸收光谱1.电子跃迁类型电子跃迁类型vv有机化合物的紫外可见吸收光谱是是三三种种电电子跃迁的结果：子跃迁的结果：电子、电子、电子、电子、n n电
7、子电子vv1.1.电子类型电子类型电子类型电子类型形成单键的形成单键的形成单键的形成单键的 电子电子电子电子C-HC-H、C-CC-C形成双键的形成双键的形成双键的形成双键的电子电子电子电子C=CC=C、C=OC=O未成对的孤对电子未成对的孤对电子未成对的孤对电子未成对的孤对电子nn电子电子电子电子C=OC=O：例：例：例：例：COHn s sH分子轨道有分子轨道有分子轨道有分子轨道有、*、*、n n 能量高低能量高低能量高低能量高低 n n*能量n*n*跃迁跃迁n n*n *n *vv当外层电子当外层电子当外层电子当外层电子吸收吸收吸收吸收紫外或可见紫外或可见紫外或可见紫外或可见辐射辐射辐射
8、辐射后，就从后，就从后，就从后，就从基态向基态向基态向基态向激发态激发态激发态激发态(反键轨道反键轨道反键轨道反键轨道)跃迁。跃迁。跃迁。跃迁。主要有四种跃迁类型主要有四种跃迁类型,跃跃迁所需能量为：迁所需能量为：*n*n*分子中电子的能级和跃迁 1 1、*transition*transition它需要的能量较高，一般发生在它需要的能量较高，一般发生在它需要的能量较高，一般发生在它需要的能量较高，一般发生在真空紫外光区真空紫外光区真空紫外光区真空紫外光区。饱和烃中的饱和烃中的饱和烃中的饱和烃中的cccc键属于这类跃迁。键属于这类跃迁。键属于这类跃迁。键属于这类跃迁。2.n*transitio
9、n 实现这类跃迁所需要的能量较实现这类跃迁所需要的能量较高，高，吸收波长为吸收波长为150250nm，大部分在远紫外区，近紫外大部分在远紫外区，近紫外区仍不易观察到。区仍不易观察到。含非键电子的饱和烃衍生物含非键电子的饱和烃衍生物(含含N、O、S和卤素等杂原子和卤素等杂原子)均均呈现呈现n*跃迁。如跃迁。如CH3OH3.3.*transitiontransition它需要的能量低于它需要的能量低于它需要的能量低于它需要的能量低于*跃迁，吸收峰一般处于跃迁，吸收峰一般处于跃迁，吸收峰一般处于跃迁，吸收峰一般处于近紫外光区，其特征是摩尔吸光系数近紫外光区，其特征是摩尔吸光系数近紫外光区，其特征是摩
10、尔吸光系数近紫外光区，其特征是摩尔吸光系数大大大大，一般，一般，一般，一般 maxmax 10104 4，为为为为强吸收带强吸收带强吸收带强吸收带。4.n*transition 这类跃迁发生在近紫外光区这类跃迁发生在近紫外光区,一般一般200 nm。它是简单的生色。它是简单的生色团如团如羰基羰基、硝基等中的孤对电子、硝基等中的孤对电子向反键轨道跃迁。其特点是向反键轨道跃迁。其特点是谱带谱带强度弱强度弱，摩尔吸光系数，摩尔吸光系数小小，通常，通常小于小于100，属于禁阻跃迁。，属于禁阻跃迁。2 2、常用术语常用术语常用术语常用术语发色团发色团含不饱和键基团，有含不饱和键基团，有含不饱和键基团，有
11、含不饱和键基团，有键键键键vv含有不饱和键，能吸收紫外可见光，产生含有不饱和键，能吸收紫外可见光，产生含有不饱和键，能吸收紫外可见光，产生含有不饱和键，能吸收紫外可见光，产生 n*n*或或或或*跃迁的基团称为发色团跃迁的基团称为发色团跃迁的基团称为发色团跃迁的基团称为发色团助色团助色团含杂原子的饱和基团含杂原子的饱和基团含杂原子的饱和基团含杂原子的饱和基团vv一些本身在紫外和可见光区无吸收一些本身在紫外和可见光区无吸收一些本身在紫外和可见光区无吸收一些本身在紫外和可见光区无吸收,但能使生色团但能使生色团但能使生色团但能使生色团吸收峰红移吸收峰红移吸收峰红移吸收峰红移,吸收强度增大的基团称为助色
12、团吸收强度增大的基团称为助色团吸收强度增大的基团称为助色团吸收强度增大的基团称为助色团长移与短移长移与短移 向长波方向移动叫红移向长波方向移动叫红移向长波方向移动叫红移向长波方向移动叫红移 向短波方向移动叫蓝移向短波方向移动叫蓝移向短波方向移动叫蓝移向短波方向移动叫蓝移 例：例：例：例：maxmax=254nm =254nm =230=230 maxmax=270nm =270nm =1250=1250吸收带吸收峰在吸收光谱上的波带位置吸收峰在吸收光谱上的波带位置（1 1）RR吸收带：吸收带：吸收带：吸收带：n*n*跃迁跃迁跃迁跃迁特点：特点：特点：特点：aa跃迁所需能量较小，吸收峰位于跃迁所
13、需能量较小，吸收峰位于跃迁所需能量较小，吸收峰位于跃迁所需能量较小，吸收峰位于200400nm200400nmbb吸收强度弱，吸收强度弱，吸收强度弱，吸收强度弱，10102 2（2 2）KK吸收带：吸收带：吸收带：吸收带：共轭双键中共轭双键中共轭双键中共轭双键中*跃迁跃迁跃迁跃迁特点：特点：特点：特点：aa跃迁所需能量较跃迁所需能量较跃迁所需能量较跃迁所需能量较R R带大，吸收峰带大，吸收峰带大，吸收峰带大，吸收峰位位位位 于于于于210280nm210280nmbb吸收强度强，吸收强度强，吸收强度强，吸收强度强，10104 4随着共轭体系的增长，随着共轭体系的增长，随着共轭体系的增长，随着共
14、轭体系的增长，KK吸收带长移，吸收带长移，吸收带长移，吸收带长移，210700nm210700nm 增大。增大。增大。增大。KK吸收带是共轭分子的特征吸收带，可用于判断共吸收带是共轭分子的特征吸收带，可用于判断共吸收带是共轭分子的特征吸收带，可用于判断共吸收带是共轭分子的特征吸收带，可用于判断共轭结构轭结构轭结构轭结构应用最多的吸收带应用最多的吸收带应用最多的吸收带应用最多的吸收带B吸收带和吸收带和E吸收带吸收带苯环带苯环带B B吸收带：有苯环必有吸收带：有苯环必有吸收带：有苯环必有吸收带：有苯环必有B B带带带带230-270230-270nmnm之间有之间有之间有之间有一系列吸收峰，中吸收
15、，芳香族化合物的特征吸收峰一系列吸收峰，中吸收，芳香族化合物的特征吸收峰一系列吸收峰，中吸收，芳香族化合物的特征吸收峰一系列吸收峰，中吸收，芳香族化合物的特征吸收峰苯环上有取代基并与苯环上有取代基并与苯环上有取代基并与苯环上有取代基并与苯苯苯苯环共轭，精细结构消环共轭，精细结构消环共轭，精细结构消环共轭，精细结构消失失失失AnmnmAnmnm max max 长移长移长移长移苯吸收曲线苯吸收曲线苯吸收曲线苯吸收曲线max=254 nmmax=254 nmvvEE吸收带：吸收带：吸收带：吸收带：*跃迁跃迁E E1 1=185nm=185nm强吸收强吸收强吸收强吸收 10104 4EE2 2=20
16、4nm=204nm较强吸收较强吸收较强吸收较强吸收 10103 3n n小结：R带 n*弱吸收 K带 *强吸收 共轭 B带 *中吸收 E带 *强吸收（三）影响紫外可见吸收光谱的因素1.1.共轭效应共轭效应共轭效应共轭效应 共轭共轭共轭共轭中中中中间间间间有有有有一一一一个个个个单单单单键键键键隔隔隔隔开开开开的的的的双双双双键键键键或或或或三三三三键键键键，形形形形成成成成大大大大键键键键。由由由由于于于于存存存存在在在在共共共共轭轭轭轭双双双双键键键键，使使使使吸吸吸吸收收收收峰峰峰峰长长长长移移移移，吸吸吸吸收收收收强强强强度度度度增增增增加加加加的这种效应的这种效应的这种效应的这种效应两
17、两两两个个个个生生生生色色色色团团团团处处处处于于于于非非非非共共共共轭轭轭轭状状状状态态态态,各各各各生生生生色色色色团团团团独独独独立立立立的的的的产产产产生生生生吸收吸收吸收吸收,总吸收是各生色团吸收加和总吸收是各生色团吸收加和总吸收是各生色团吸收加和总吸收是各生色团吸收加和.maxmax 1-1-己烯己烯己烯己烯17710177104 41.5-1.5-己二烯己二烯己二烯己二烯17821782 10104 4 max1-己烯1771041.3-己二烯2172.11041.3.5-己三烯2584.3104共轭状态共轭状态共轭状态共轭状态,吸收峰向长波方向移动吸收峰向长波方向移动吸收峰向长
18、波方向移动吸收峰向长波方向移动,吸收强度增吸收强度增吸收强度增吸收强度增加。醛、酮和羧酸中碳氧双键同烯键之间的共轭作用加。醛、酮和羧酸中碳氧双键同烯键之间的共轭作用加。醛、酮和羧酸中碳氧双键同烯键之间的共轭作用加。醛、酮和羧酸中碳氧双键同烯键之间的共轭作用会使会使会使会使*轨道能量降低轨道能量降低轨道能量降低轨道能量降低,从而使从而使从而使从而使*跃迁和跃迁和跃迁和跃迁和n*n*跃迁跃迁跃迁跃迁的吸收峰都发生红移的吸收峰都发生红移的吸收峰都发生红移的吸收峰都发生红移.共轭效应越大，向长波方向移动越多。共轭效应越大，向长波方向移动越多。共轭效应越大，向长波方向移动越多。共轭效应越大，向长波方向移
19、动越多。2.2.助色效应助色效应助色效应助色效应 n n共轭共轭共轭共轭长移长移长移长移vv助色团与发色团相连时，助色团的助色团与发色团相连时，助色团的助色团与发色团相连时，助色团的助色团与发色团相连时，助色团的n n电子与发色团电子与发色团电子与发色团电子与发色团的的的的电子共轭，使吸收峰长移，吸收强度增加的电子共轭，使吸收峰长移，吸收强度增加的电子共轭，使吸收峰长移，吸收强度增加的电子共轭，使吸收峰长移，吸收强度增加的这种效应这种效应这种效应这种效应3.3.超共轭效应超共轭效应超共轭效应超共轭效应 共轭共轭共轭共轭长移长移长移长移vv烷基上的烷基上的烷基上的烷基上的 电子与共轭体系中的电子
20、与共轭体系中的电子与共轭体系中的电子与共轭体系中的电子共轭，使吸电子共轭，使吸电子共轭，使吸电子共轭，使吸收峰长移，吸收强度增加的这种效应收峰长移，吸收强度增加的这种效应收峰长移，吸收强度增加的这种效应收峰长移，吸收强度增加的这种效应例：例：例：例：max=217 nmmax=217 nm max=226 nmmax=226 nm超共轭效应比共轭效应的影响小的多超共轭效应比共轭效应的影响小的多4.4.空间位阻空间位阻空间位阻空间位阻由于空间位阻，防碍两个发色团处在同一平面，由于空间位阻，防碍两个发色团处在同一平面，由于空间位阻，防碍两个发色团处在同一平面，由于空间位阻，防碍两个发色团处在同一平
21、面，使共轭程度降低。吸收峰短移，吸收强度降低使共轭程度降低。吸收峰短移，吸收强度降低使共轭程度降低。吸收峰短移，吸收强度降低使共轭程度降低。吸收峰短移，吸收强度降低的这种现象的这种现象的这种现象的这种现象 例：例：例：例：反式反式 大共轭体系大共轭体系 顺式顺式 max=294 nm max=294 nm max=280 nmmax=280 nm =2.7=2.7 10104 4 =1.4 =1.4 10 104 4vv主要有四种跃迁类型跃迁所需能量为：*n*n*分子中电子的能级和跃迁 Absorption curve Using different wavelengths of light
22、through a constant concentration and thickness of the solution under test to measure the absorption degree of the solution under test on each wavelength light(absorbance),and then make the wavelength as the abscissa and the absorbance as the ordinate to map a curve.The material absorption capacity o
23、f different wavelength can be described by the curve,called absorption curve or absorption spectra.According to the analysis of absorption curve:According to the analysis of absorption curve:The same concentration of the solutionThe same concentration of the solution under test has different absorba
24、nce to under test has different absorbance to different wavelengths of light.different wavelengths of light.For the same test solution,the greater the For the same test solution,the greater the concentration,the greater the absorbance.concentration,the greater the absorbance.For the same material,no
25、 matter what the concentration is,the wavelength For the same material,no matter what the concentration is,the wavelength connected with the maximum absorption peak(the maximum absorption connected with the maximum absorption peak(the maximum absorption wavelength max)is the same,and the shape of th
26、e curve is also the same.wavelength max)is the same,and the shape of the curve is also the same.UV-VisSpectrometerGeneralcomponents1.1.Radiation source In the UV region or the visible region of the spectrum can emit continuous spectrum(200-1000 nm),with enough radiation intensity,good stability,long
27、 service life.There are two kinds of light source,thermal radiation light source and gas discharge light source.Visible light RegionVisible light Region：tungsten filament lamptungsten filament lamp as a light as a light source,its radiation wavelength range from 320 to source,its radiation wavelengt
28、h range from 320 to 2500 nm.2500 nm.Ultraviolet Ultraviolet light Regionlight Region：deuterium and hydrogen lampdeuterium and hydrogen lamp emit Continuous spectrum of 185 to 400 nm.Continuous spectrum of 185 to 400 nm.()monochromatorvMonochromator is the device required monochromatic light from the
29、 continuous spectrum.prism and grating monochromator are the most common Monochromator.vThe shortcomings of prism monochromator is that dispersion rate varies with wavelength,the spectra obtained were non uniformly arranged,and the light transfer efficiency is low.vgrating monochromator has a good a
30、nd the same dispersion capacity almost in the whole spectral region.Therefore,the modern ultraviolet visible spectrophotometer using grating monochromator.入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；出射狭缝。()sampleroom The sample chamber is placed in a v
31、ariety of types of absorption pool(the ratio of the colored dishes)and the corresponding tank rack accessories.There are two main types of the absorption pool,quartz and glass.Commonly,we should use the quartz pool in the UV visible region,and use the glass tank in the visible region.（四）检测器（四）检测器利利用
32、用光光电电效效应应将将透透过过吸吸收收池池的的光光信信号号变变成成可可测测的的电电信信号号。常常用用的的检检测测器器有有光光电电池池、光电管和光电倍增管。光电管和光电倍增管。（五）信号显示器（五）信号显示器常常用用的的显显示示器器有有检检流流计计、微微安安计计、电电位位计计、数数字电压表、记录仪、示波器及数据处理机等。字电压表、记录仪、示波器及数据处理机等。二、仪器的类型（一）Single-beam UV-Vis spectrophotometer光源光源单色器单色器参比参比样品样品检测器检测器显示器显示器 只有一条光路，通过变换参比池和样品池的位只有一条光路，通过变换参比池和样品池的位置，使
33、它们分别置于光路来进行测定置，使它们分别置于光路来进行测定简单，价廉，适于在简单，价廉，适于在给定波长给定波长处测量吸光度或处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光光源源和和检测器检测器具具有很有很高的稳定性高的稳定性。单色器参比样品检测器显示器斩光器光源2.2.Double-beam 双光束双光束 自动记录，自动记录，快速全波段扫描快速全波段扫描。可消除光源不。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。（三）（三）Doub
34、le-wavelengthv一个光源，两个单色器，一个吸收池一个光源，两个单色器，一个吸收池光源单色器单色器吸收池检测器 1 1 2 2斩光器用两种不同波长的单色光束交替照射到样品溶液上，不需使用参比溶用两种不同波长的单色光束交替照射到样品溶液上，不需使用参比溶液，测得的是样品在两种波长下的吸光度之差液，测得的是样品在两种波长下的吸光度之差将不同波长的两束单色光将不同波长的两束单色光(1 1、2 2)快速交替快速交替通过同一吸收池而后到通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。达检测器。产生交流信号。无需参比池。=1 12 2nmnm。A A=A=A2-A1=(2-1)bc=Kc
35、ApplicationofultravioletabsorptionspectrumQualitativeandquantitativebasisOrganicstructureassistedanalysis1.qualitative analysisAt the same condition,It usually includes the determination of unknown material uv spectra,compared with the absorption spectrum of known standard material,analyzing the abs
36、orption spectral characteristics,such as absorption peak number,location,absorption valley,shoulder peak position,etc.If the molecular structure of the compounds is the same,they should have the same absorption spectra.Sample to be measured The same condiion The sample spectrumStandard material The
37、standard spectrumA At a certain wavelength,the same substance in different concentrations t a certain wavelength,the same substance in different concentrations have the have the different different absorbance A,and the difference of absorbance at absorbance A,and the difference of absorbance at Max
38、was the largest.This characteristic can be used as the basis Max was the largest.This characteristic can be used as the basis for for quantitativequantitative analysis.analysis.2.Quantitativeanalysis The basis:Lambert-Beers Law Lambert-Beers Law A=b c -lgT=b c high sensitivity：max：104105 L mol-1 cm-
39、1；Generally,we measure A at the point of max in single component,and then do the standard curve to get the best sensitivity.The applicability of Lambert-Beers LawvThe condition of Lambert-Beers Law establish is that the sample to be measured is homogeneous dilute solution,gas,etc.No solute,solvent a
40、nd suspended matter caused by scattering;the incident light is monochromatic parallel light.vThefollowingcircumstancesdonotsetuporhavealargedeviation:1.Notfoundedundertheeffectionofchemicalfactors2.Dissociation,association,theformationofcomplexorsolvent,etc.causeddeviation3.Notfoundedundertheeffecti
41、onofinstrumentfactors.4.Nonmonochromaticlightcauseddeviationtothelaw.5.Theclutterofscatteredlight(notthelight)willcauseaneffectonthelaw.6.Otherfactorsincludingsolvent,lighteffect,etc.2.Organiccompoundstructureassistantanalysis.1.structural information from UV-Vis To understand the degree of conjugat
42、ion,the space effect,etc.,to determine the saturated and unsaturated compounds,isomers and conformation.The general rule of the information analysis of organic compound hair color system in the UV/Vis absorption spectra is:if there have no absorption peak within the wavelength range of 200 750nm,it
43、may be a straight chain alkanes,cycloalkanes,saturated aliphatic compounds or olefin containing only one double bond.if there have a low intensity absorption peak within the wavelength range of 270 to 350 nm(10100Lmol-1cm-1),(n*transition),it may contain a simple non conjugate and n-electronic chrom
44、ophore,such as carbonyl.若在20300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环，假设有精细结构的话，可能是苯环的特征吸收。若在210250nm波长范围内有强吸收峰，则可能含有2个共轭双键；若在260350nm波长范围内有强吸收峰，则说明该有机物含有3个或3个以上共轭双键。若该有机物的吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物。2.光谱解析注意事项 (1)确认max，并算出，初步估计属于何种吸收带；(2)观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系；三.Puritycheck纯度检查v如果一化合物在紫外区如果一化合物在紫外区没有没有吸收峰，而其中的吸收峰
45、，而其中的杂质有较强吸收杂质有较强吸收，就可方便地检出该化合物中，就可方便地检出该化合物中的痕量杂质。的痕量杂质。v例如：要检定甲醇或乙醇中的杂质苯，可利用例如：要检定甲醇或乙醇中的杂质苯，可利用苯在苯在254nm处的处的B吸收带，而甲醇或乙醇在此吸收带，而甲醇或乙醇在此波长处几乎没有吸收。波长处几乎没有吸收。ApplicationofultravioletabsorptionspectrumQualitativeandquantitativebasisOrganicstructureassistedanalysis1.qualitative analysisAt the same condi
46、tion,It usually includes the determination of unknown material uv spectra,compared with the absorption spectrum of known standard material,analyzing the absorption spectral characteristics,such as absorption peak number,location,absorption valley,shoulder peak position,etc.If the molecular structure
47、 of the compounds is the same,they should have the same absorption spectra.Sample to be measured The same condiion The sample spectrumStandard material The standard spectrumA At a certain wavelength,the same substance in different concentrations t a certain wavelength,the same substance in different
48、 concentrations have the have the different different absorbance A,and the difference of absorbance at absorbance A,and the difference of absorbance at Max was the largest.This characteristic can be used as the basis Max was the largest.This characteristic can be used as the basis for for quantitati
49、vequantitative analysis.analysis.2.Quantitativeanalysis The basis:Lambert-Beers Law Lambert-Beers Law A=b c -lgT=b c high sensitivity：max：104105 L mol-1 cm-1；Generally,we measure A at the point of max in single component,and then do the standard curve to get the best sensitivity.The applicability of
50、 Lambert-Beers LawvThe condition of Lambert-Beers Law establish is that the sample to be measured is homogeneous dilute solution,gas,etc.No solute,solvent and suspended matter caused by scattering;the incident light is monochromatic parallel light.vThefollowingcircumstancesdonotsetuporhavealargedevi