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1、免疫层析技术在乳品安全检测中的应用马马立才立才 博士博士2017年年08月月 北京北京主要内容主要内容我国奶业发展现状我国奶业发展现状乳品主要危害因素乳品主要危害因素免疫层析检测技术免疫层析检测技术1.胶体金免疫层析胶体金免疫层析2.荧光免疫层析技术荧光免疫层析技术检测卡常见问题分析检测卡常见问题分析一、我国奶业发展现状l人均乳品消费量：全球：107公斤；发达国家：200公斤；我国：约30公斤；l全球乳品年产量：约8.02亿吨；我国：3725万吨，仅占4.6%；l2015年我国生鲜牛乳产量3755万吨，比2014年增加0.8%；奶制品加工量2761.1万吨，比2014增长4.1%；p 市场情况
2、：l洋牛奶、洋奶粉疯狂冲击了国内市场，危及养牛业l疫情防控未做好，如布氏病有上升趋势l消费者对国产奶缺乏信心，行业信任危机依然存在l企业诚信欠失：改生产日期，乳品使用防腐剂l乳源质量安全仍然让人放心不下p 我国奶业存在的问题二、乳品主要危害因素v兽药残留v霉菌毒素v非法添加v农药残留v 微生物兽药残留是指动物产品的任何可食部分所含兽药的母体化合物及其代谢物，以及与兽药有关的杂质。p兽药残留 127种兽药残留最大残留限量种类数量比较 奶牛饲养过程中由于不合理使用治疗药物和饲料药物添加剂，导致牛奶中广泛存在兽药残留。兽药残留对人体健康有较大危害作用，主要表现为过敏反应、细菌耐药性、致畸致癌作用，以
3、及激素作用等方面。l兽药残留的危害 化合物化合物 动物动物/组织组织 推荐检测方法推荐检测方法 检测限检测限(或定量限或定量限)(g/L）残留限量残留限量 MRL（g/kg）-内酰胺类内酰胺类 牛牛/奶奶 动物性食品中动物性食品中-内酰胺类药物多残留检测内酰胺类药物多残留检测 超超高效高效液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法青霉素青霉素G：14阿莫西林、氨苄西林：阿莫西林、氨苄西林：110苯唑西林：苯唑西林：130氯唑西林：氯唑西林：130头孢喹肟：头孢喹肟：120头孢氨苄：头孢氨苄：1100阿维菌素类阿维菌素类 牛牛/奶奶 高效液相色谱法高效液相色谱法HPLC（GB 29696-2013）
4、阿维菌阿维菌素、多拉菌素：素、多拉菌素：1 ND伊维菌素：伊维菌素：110地塞米松地塞米松 牛牛/奶奶 液相色谱质谱法液相色谱质谱法LC-MS-MS（1031号公告号公告-2-2008）地塞米松地塞米松e0.2（定量限）定量限）0.3氟喹诺酮类氟喹诺酮类 牛牛/奶奶 液相色谱质谱法液相色谱质谱法LC-MS-MS（GB/T 21312-2007)高效液相色谱法高效液相色谱法HPLC（GB 29692-2013）环丙沙环丙沙星、恩诺沙星：星、恩诺沙星：25100达氟沙星：达氟沙星：7.530氟甲喹：氟甲喹：12.550洛美沙洛美沙星、氧氟沙星：星、氧氟沙星：0.5 ND诺氟沙星诺氟沙星、培氟沙星、
5、培氟沙星1.0磺胺类磺胺类 牛牛/奶奶 液相色谱质谱法液相色谱质谱法LC-MS-MS （781号公告号公告-12-2006）磺胺（二）甲基磺胺（二）甲基嘧啶嘧啶 2.0100磺胺二甲异嘧啶磺胺二甲异嘧啶1.0磺胺甲氧嘧啶磺胺甲氧嘧啶3.0磺胺甲基异噁唑磺胺甲基异噁唑 4.0磺胺异噁唑磺胺异噁唑 5.0甲砜霉素甲砜霉素 牛牛/奶奶 高效液相色谱法高效液相色谱法HPLC（GB 29689-2013）甲砜霉素甲砜霉素1050林可胺类林可胺类和和大环内酯大环内酯类类牛牛/奶奶 动物性食品中林可胺类和大环内酯类药物多残留检动物性食品中林可胺类和大环内酯类药物多残留检测超高效液相色谱测超高效液相色谱-串联
6、质谱法串联质谱法1150四环素类四环素类 牛牛/奶奶 牛奶中四环素类药物残留检测超高效液相色谱牛奶中四环素类药物残留检测超高效液相色谱-串串联质谱法联质谱法四环素、土霉素、金霉素四环素、土霉素、金霉素 5100多西环素多西环素 5 ND2017年年动物及物及动物物产品品兽药残留残留监控控计划划l 霉霉菌菌毒毒素素是是丝丝状状真真菌菌或或霉霉菌菌在在生生长长繁繁殖殖过过程程中中通通过过不不同同的的代代谢谢途途径径产产生生的的代代谢谢物物，如如多多聚聚乙乙酰酰途途径径（黄黄曲曲霉霉毒毒素素）、氨氨基酸途径（黄曲霉毒素）等；基酸途径（黄曲霉毒素）等；l目前已发现了目前已发现了300300多种的霉菌毒
7、素，其中黄曲霉毒素、赭曲霉多种的霉菌毒素，其中黄曲霉毒素、赭曲霉素、伏马菌素、素、伏马菌素、T-2T-2毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等倍受关注。醇等倍受关注。l乳品中最受关注的霉菌毒素是乳品中最受关注的霉菌毒素是黄曲霉黄曲霉M1M1；奶牛摄入被黄曲霉；奶牛摄入被黄曲霉毒素毒素B1B1污染的饲料后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素污染的饲料后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1M1。l黄曲霉毒素黄曲霉毒素M1M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。物肝脏组织有破坏作用
8、，可导致肝癌甚至死亡。p霉菌毒素 A.非法添加添加物：三聚氰胺、-内酰胺酶、碱性物质、皮革水解蛋白等B.超标超限添加物：增稠剂、防腐剂、抗氧化剂等，其他未允许用的食品添加剂p非法添加或超标超限添加物 农农药药残残留留是是指指任任何何由由于于使使用用农农药药而而在在食食品品、农农产产品品和和动动物物饲饲料料中中出出现现的的特特定定物物质质。分分为为杀杀虫虫剂剂（包包括括杀杀螨螨剂剂）、杀杀菌菌剂、除草剂、植物生长调节剂、杀鼠剂等。剂、除草剂、植物生长调节剂、杀鼠剂等。p农药残留 中中国国牛牛奶奶中中农农药药限限量量共共涉涉及及1010种种农农药药（艾艾氏氏剂和和狄狄氏氏剂、氯丹丹、滴滴滴滴涕涕、
9、硫硫丹丹、倍倍硫硫磷磷、六六六六六六、七七氯、林林丹丹、马拉拉硫硫磷磷、甲甲胺胺磷磷），其其中中GB GB 2763-20052763-2005及及其其第第一一号号修修改改单单中中限限定定7 7种，种，无公害食品生鲜牛奶无公害食品生鲜牛奶（NY5045-2008NY5045-2008）限定种。）限定种。p微生物 牛牛乳乳中中含含有有一一定定数数量量的的微微生生物物，主主要要来来源源于于两两方方面面：一一是是患患病病乳乳牛牛对对生生鲜鲜乳乳的的污污染染，二二是是挤挤奶奶过过程程中中的的污污染染，三三是是挤挤奶奶后后运运输输途途中中受受到的污染或原有微生物的增殖到的污染或原有微生物的增殖 。牛牛奶
10、奶中中的的微微生生物物主主要要有有细细菌菌（乳乳酸酸菌菌、丙丙酸酸菌菌、肠肠细细菌菌、孢孢子子杆杆菌菌等等）、真真菌菌（霉霉菌菌有有乳乳粉粉胞胞霉霉、乳乳酪酪粉粉胞胞霉霉、黑黑念念珠珠霉霉、变变异异念念珠珠霉霉、乳乳酪酪青青霉霉、灰灰绿绿青青霉霉和和黑黑曲曲霉霉等等）和和噬噬菌菌体体（侵侵害害细细菌菌的的滤滤过过性性病病毒毒统统称称为为噬噬菌菌体体，亦亦称称为为细细菌菌病病毒毒。目目前前已已发发现现大大肠肠杆杆菌菌、乳乳酸酸菌菌、赤痢菌、沙门氏杆菌、霍乱菌、葡萄球菌、结核菌、放线菌等。赤痢菌、沙门氏杆菌、霍乱菌、葡萄球菌、结核菌、放线菌等。p 乳品主要危害因素的检测方法气相色谱法（气相色谱法（
11、GCGC）高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLCHPLC）超高效液相色谱法（超高效液相色谱法（UPLCUPLC）气谱气谱-质谱法（质谱法（GC-MSGC-MS）气谱气谱-串联质谱法（串联质谱法（GC-MS/MSGC-MS/MS）液谱液谱-质谱法（质谱法（LC-MSLC-MS）液谱液谱-串联质谱法（串联质谱法（LC-MS/MSLC-MS/MS）其他新技术，如飞行时间质谱等其他新技术，如飞行时间质谱等胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法荧光免疫层析检测法荧光免疫层析检测法酶联免疫吸附测定法酶联免疫吸附测定法化学发光免疫检测法化学发光免疫检测法放射免疫测定法放射免疫测定法荧光偏振免疫检测法荧光偏振免疫
12、检测法微生物抑制测定法微生物抑制测定法生物传感器生物传感器生物芯片生物芯片l 主要有色谱分析技术和快速检测技术主要有色谱分析技术和快速检测技术方法名称方法名称优点优点缺点缺点适用范围适用范围液相色谱液相色谱-质谱质谱仪等仪器仪等仪器灵敏、准确，可靠性好灵敏、准确，可靠性好检检测测费费用用高高、操操作作繁繁琐琐耗耗时时、人人员要求很高员要求很高省省部部级级以以上上检检测测机机构构及及有有条条件件的的食食品品进出口企业进出口企业酶联免疫试剂盒酶联免疫试剂盒灵灵敏敏、快快速速、成成本本低低，可可大大批批量量同同时时检检测测，既既能能定定性性也也能定量，一般检测时间能定量，一般检测时间1-2h对对检检
13、测测人人员员要要求求较高较高市市县县级级以以上上检检测测机机构构及及一一定定规规模模的的食食品生产加工企业品生产加工企业免疫层析检测免疫层析检测灵灵敏敏、快快速速、成成本本低低，可可现现场场大大批批量量筛筛查查，样样品品无无需需或或仅仅需需简简单单前前处处理理，检检测测时时间间3-10min，判判定定快快速速简简单单，对场所和人员无要求对场所和人员无要求有有假假阳阳性性和和假假阴阴性的可能性的可能乡乡镇镇级级以以上上检检测测机机构构及及食食品品生生产产加加工工流通企业流通企业仪器确器确证方法和快速方法和快速检测方法比方法比较三、免疫层析检测技术p免疫层析技术（免疫层析技术（LFIA）的发展）的
14、发展第一代免疫层析：第一代免疫层析：胶体金技术胶体金技术第二代免疫层析：第二代免疫层析：荧光素标记免疫层析技术荧光素标记免疫层析技术第三代免疫层析：第三代免疫层析：量子点标记技术量子点标记技术(QD)时间分辨免疫荧光技术时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)上转发光技术上转发光技术(UPT)1、胶体金免疫层析技术l样品垫：样品垫：具有过滤和缓冲作用，降低样本离子强度或酸碱度对检测结果的干扰；具有过滤和缓冲作用，降低样本离子强度或酸碱度对检测结果的干扰；l金标垫：金标垫：将胶体金标记将胶体金标记AbAb固定在金标垫上，目标物首先在此与金标固定在金标垫上，目标物首先在此与金标AbAb的反应；的反应；l
15、NCNC膜：膜：预先包被检测线（预先包被检测线（T T线）和质控线（线）和质控线（C C线），与胶体金标记物通过免疫反线），与胶体金标记物通过免疫反应相结合，使胶体金颗粒在检测线发生聚集。应相结合，使胶体金颗粒在检测线发生聚集。l吸水垫：吸水垫：通过层析作用使样品、金垫上的金标通过层析作用使样品、金垫上的金标AbAb移动。移动。p 胶体检测试纸条的结构与作用p原理图示（小分子抗原为例）p分类分类：夹心法、竞争法（直接竞争法和间接竞争法）：夹心法、竞争法（直接竞争法和间接竞争法）（1）双抗体夹心法）双抗体夹心法l抗体抗体1：检测线（：检测线（T线）位置；线）位置；l金标抗体金标抗体2：金标垫上；
16、：金标垫上；l样本中的抗原先与金标抗体样本中的抗原先与金标抗体2结合，结合，形成的形成的“抗原抗原+金标抗体金标抗体2”再与再与T线线位置的抗体位置的抗体1结合，从而金标抗体结合，从而金标抗体复合物在复合物在T线处聚集显色。线处聚集显色。n 用于大分子抗原的检测用于大分子抗原的检测T线的显色强度与目标物的浓度呈正相关线的显色强度与目标物的浓度呈正相关（2）直接竞争法免疫层析）直接竞争法免疫层析T线的显色强度与目标物的浓度呈负相关线的显色强度与目标物的浓度呈负相关l抗体：检测线（抗体：检测线（T线）；线）；l金标抗原：金标垫；金标抗原：金标垫；l样本中的抗原与释放垫上的金标抗原样本中的抗原与释放
17、垫上的金标抗原竞争，与竞争，与T线上的抗体结合；线上的抗体结合；l样品中目标物的含量越高则样品中目标物的含量越高则T线处结合线处结合聚集的金标抗原越少，显色越弱。聚集的金标抗原越少，显色越弱。（3）间接竞争法免疫层析）间接竞争法免疫层析T线的显色强度与目标物的浓度呈负相关线的显色强度与目标物的浓度呈负相关l抗原：检测线（抗原：检测线（T线）；线）；l金标抗体：金标垫；金标抗体：金标垫；l样本中的抗原与金标抗体结合，形成样本中的抗原与金标抗体结合，形成的的“Ag+金标金标Ab”复合物；复合物；l游离的金标抗体与游离的金标抗体与T线上的抗原结合，线上的抗原结合，从而金标抗体在从而金标抗体在T线处聚
18、集显色。线处聚集显色。p产品形式与检测步骤检测卡试纸条l取适量液体乳品样本加到取适量液体乳品样本加到检测卡加样孔中；检测卡加样孔中；l3-10min3-10min后，通过后，通过T T和和C C线线显色情况进行阴阳性判定显色情况进行阴阳性判定l将试纸条插入含有适量乳将试纸条插入含有适量乳品样本的微孔中；品样本的微孔中；l3-10min3-10min后，通过后，通过T T和和C C线线显色情况进行阴阳性判定显色情况进行阴阳性判定金标微孔+试纸条l取适量液体乳品与微孔中的取适量液体乳品与微孔中的金标抗体混合，反应金标抗体混合，反应3-5min3-5min；l将试纸条插入金标微孔，将试纸条插入金标微
19、孔，3-3-10min10min后，通过后，通过T T和和C C线显色情线显色情况进行阴阳性判定况进行阴阳性判定p结果判定方法阳性阳性:T:T线与线与C C线都显色；线都显色；阴性阴性:C:C线显色线显色,T,T线不显色；线不显色；无效无效:C:C线不显色，结果判定为无效。线不显色，结果判定为无效。（A）夹心法胶体金免疫层析阴性 阳性 无效（B）竞争法胶体金免疫层析阴性阴性:T:T线与线与C C线都显色，表明样品中目标线都显色，表明样品中目标物含量低于检测限；物含量低于检测限；阳性阳性:C:C线显色线显色,T,T线不显色，表明样品中线不显色，表明样品中目标物的浓度高于检测限；目标物的浓度高于检
20、测限；无效无效:C:C线不显色，结果判定为无效。线不显色，结果判定为无效。优势优势不足之处n快速：快速：全部检测过程大概全部检测过程大概3-10min3-10minn简便简便：不需要复杂的仪器设备，也无需：不需要复杂的仪器设备，也无需专业人员操作，可进行现场检测专业人员操作，可进行现场检测n廉价廉价：价格低，支持单样本检测：价格低，支持单样本检测n稳定稳定：金标试剂稳定性好，可长期保存：金标试剂稳定性好，可长期保存n适用性范围广适用性范围广：可应用于多种类型样本：可应用于多种类型样本的检测的检测n前处理简单前处理简单：对于某些液体样本，无需：对于某些液体样本，无需样本前处理，直接检测样本前处理
21、，直接检测n 定量问题定量问题n 灵敏度问题灵敏度问题p胶体金免疫层析的优缺点胶体金免疫层析的优缺点荧光免疫层析技术荧光免疫层析技术（Fluorescence Fluorescence immunoassayimmunoassay）l以荧光物质为标记物；以荧光物质为标记物；l将抗原抗体反应的特异性与荧光将抗原抗体反应的特异性与荧光技术的敏感性相结合；技术的敏感性相结合；l荧光物分子在特定条件下吸收激荧光物分子在特定条件下吸收激发光的能量后，呈激发态而极不发光的能量后，呈激发态而极不稳定，在其迅速回到基态时，以稳定，在其迅速回到基态时，以电磁辐射形式释放出光能，发射电磁辐射形式释放出光能，发射出
22、波长比激发光波长长或短的荧出波长比激发光波长长或短的荧光，从而通过荧光检测仪器进行光，从而通过荧光检测仪器进行检测。检测。2、荧光免疫层析技术性能指标性能指标胶体金检测卡胶体金检测卡荧光定量检测卡荧光定量检测卡灵敏度灵敏度相对较高相对较高判读方式判读方式肉眼判读肉眼判读仪器判读仪器判读结果结果判读判读一致性一致性不同人判读结果不同人判读结果稍有稍有差异差异结果判读不依赖于人结果判读不依赖于人结果显示形式结果显示形式阴性或阳性阴性或阳性定量数值定量数值样本测试范围样本测试范围只能判读阴性、只能判读阴性、1/2检测检测限、检测限的结果限、检测限的结果能判读定量范围内任意浓度能判读定量范围内任意浓度
23、样本的定量值样本的定量值自自带定量曲线带定量曲线直接加样即可读出定量结果直接加样即可读出定量结果数据保存数据保存人工输入判读人工输入判读结果做结果做记录记录保存保存软件记录仪器测试过的所有软件记录仪器测试过的所有样本数据并自动保存，后台样本数据并自动保存，后台数据中心远程监控数据中心远程监控n与与胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术比较分析比较分析n与ELISA检测方法比较 兼具胶体金检测卡和兼具胶体金检测卡和 ELISA ELISA 的优点，避免了大量的分离和的优点，避免了大量的分离和洗涤步骤，适宜进行高通量和定量检测，并且同样具有洗涤步骤，适宜进行高通量和定量检测，并且同样具有简便简便、快
24、快捷捷、低廉低廉等优点。等优点。n与UPLC-MS-MS的比较n维德维康荧光定量检测卡产品（乳品）p 普通荧光免疫层析普通荧光免疫层析间接竞争法：间接竞争法：l在免疫层析过程中，有机荧光染料或在免疫层析过程中，有机荧光染料或荧光微球标记的抗体，与样品中的目荧光微球标记的抗体，与样品中的目标物结合形成标物结合形成Ag+荧光标记荧光标记Ab复合物；复合物；l之后，游离的荧光标记抗体与之后，游离的荧光标记抗体与T线位线位置上包被的抗原结合，从而荧光物质置上包被的抗原结合，从而荧光物质在在T线聚集；线聚集；l在激发光的作用下，荧光物质发射荧在激发光的作用下，荧光物质发射荧光，荧光信号的强弱目标物的含量
25、相光，荧光信号的强弱目标物的含量相关。由此，依据荧光信号的强弱可实关。由此，依据荧光信号的强弱可实现对样本中目标物的定量检测。现对样本中目标物的定量检测。常用的有机染料：常用的有机染料：罗丹明罗丹明 FITC(异硫氰酸荧光素异硫氰酸荧光素)花青染料花青染料 (如：如：cy3 和和cy5)DAPI（4,6-二脒基二脒基-2-苯基吲哚）苯基吲哚）p 量子点荧光免疫层析量子点荧光免疫层析l 量子点量子点(Quantum dots,QDs)，是一种由，是一种由-族（如族（如 CdTe、CdSe、ZnS）或）或-族（族（如如 InAs、InP 等）组成的纳米颗粒。等）组成的纳米颗粒。l较于传统的有机染料
26、，其具有激发光谱宽、较于传统的有机染料，其具有激发光谱宽、发射光谱窄且重叠小等优点；发射光谱窄且重叠小等优点；l单一光源激发，不同量子点所发出荧光不同，单一光源激发，不同量子点所发出荧光不同，故可进行多组分检测。故可进行多组分检测。l量子点的荧光强度可比普通荧光染料高量子点的荧光强度可比普通荧光染料高100 倍左右，灵敏度，且稳定性较好；倍左右，灵敏度，且稳定性较好；l具有良好的生物兼容性，可与抗体、核酸等具有良好的生物兼容性，可与抗体、核酸等生物分子进行特异性的连接。生物分子进行特异性的连接。量子点CdSe和罗丹明6G染料激发光/发射光的比较n相比于罗丹明6G染料：量子点的激发光（绿色短划线
27、）波长范围较宽量子点的发射光（绿线）基本上是对称的，且波长范围更窄。p 时间分辨荧光免疫层析时间分辨荧光免疫层析l将镧系元素螯合物或微球用作抗体将镧系元素螯合物或微球用作抗体或抗原荧光标记物；如铕或抗原荧光标记物；如铕(Eu)、钐、钐（Sm)、镝、镝(Dy)、锝、锝(Te)l镧系元素的荧光光谱有较大的镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移，最大可达位移，最大可达290nm；l激发光谱和发射光谱间不相互重叠；激发光谱和发射光谱间不相互重叠；l发射光谱很窄，荧光寿命长发射光谱很窄，荧光寿命长；p 上转发光免疫层析上转发光免疫层析 利用利用UCP颗颗粒（稀土离子）作粒（稀土离子）作为为荧荧光材料
28、，通光材料，通过连续过连续吸收吸收较较低能量的低能量的长长波波红红外光外光,发发射高能量的短波射高能量的短波实现实现能能量上量上转换转换，此，此现现象称象称反反Stokes 效效应应。A2S1S2A1A3u优优点点stocks位移大：位移大：200nm发发射光射光谱谱窄，窄，颜颜色可色可调调光化学光化学稳稳定性高定性高上上转发转发光在自然界是不存在的，极大程光在自然界是不存在的，极大程度低降低度低降低样样本自本自发荧发荧光的干光的干扰扰 NaYF4是目前上转换发光效率最高的基是目前上转换发光效率最高的基质材料。质材料。四、检测卡常见问题分析1、T线浅或没有，样本的假阳性率高线浅或没有，样本的假
29、阳性率高l人为操作原因，样本前处理未按照说明书操作；人为操作原因，样本前处理未按照说明书操作；l检测卡失效；检测卡失效；l温度原因，温度过低造成；温度原因，温度过低造成；l环境湿度大，试剂造成降解环境湿度大，试剂造成降解；l样本样本差异性，不同地区的样本之间差异性可能比较差异性，不同地区的样本之间差异性可能比较大。大。应应对对方方案案：严严格格按按照照说说明明书书操操作作；检检测测卡卡保保存存在在适适宜宜的的环环境境中中；注意检测卡有效期；样本检测在适宜的温度条件下进行等；注意检测卡有效期；样本检测在适宜的温度条件下进行等；2、阳性样本检验不出，假阴性率高、阳性样本检验不出，假阴性率高混淆同一
30、产品的不同型号；混淆同一产品的不同型号；未使用规定配套的稀释液；未使用规定配套的稀释液；试剂失效；加样量未按照说明书；未在规定时间内读取结果；试剂失效；加样量未按照说明书；未在规定时间内读取结果；应应对对方方案案：重重新新确确认认检检测测卡卡的的检检测测限限和和灵灵敏敏度度；确确保保使使用用与与产产品品型型号号相相对对应应的的稀稀释释液液或或是是相相应应的的前前处处理理方方法法；按按照照说说明明书书加加上上样样量量，并并在在规规定定时间内读取结果。时间内读取结果。3、加样后液体无法正常上吸到吸水垫处、加样后液体无法正常上吸到吸水垫处未按照说明书方法进行稀释；未使用配套的稀释液；加样量过少；未按
31、照说明书方法进行稀释；未使用配套的稀释液；加样量过少；应应对对方方案案：按按照照说说明明书书方方法法使使用用配配套套的的稀稀释释液液进进行行稀稀释释；按按照照说说明明书书加上样量；加上样量；p检测卡（条）使用的注意事项检测卡（条）使用的注意事项在做实验值之前，实验人员仔细阅读产品说明书；在做实验值之前，实验人员仔细阅读产品说明书；使用前先将产品恢复至室温（使用前先将产品恢复至室温（252522），但要避免长时间暴露在），但要避免长时间暴露在潮湿和光照的环境下，试纸条开封后潮湿和光照的环境下，试纸条开封后1h1h内使用；内使用；不要混用来自不同批号的试纸条和金标微孔；不要混用来自不同批号的试纸条
32、和金标微孔；应避免延误将试纸条的检测时间，以保证各样品孵育时间一致；应避免延误将试纸条的检测时间，以保证各样品孵育时间一致；开封后的试纸条每次取出试剂一定要第一时间把袋子的口封好；开封后的试纸条每次取出试剂一定要第一时间把袋子的口封好；做实验之前保证奶样恢复至室温，要把奶样摇匀，拿起奶样摇动；做实验之前保证奶样恢复至室温，要把奶样摇匀，拿起奶样摇动；吸取奶样的时，要先把枪头润洗一两次，保证取样量准确。吸取奶样的时，要先把枪头润洗一两次，保证取样量准确。Thanks！北京北京维德德维康生物技康生物技术有限公司有限公司地址：北京市海淀区地地址：北京市海淀区地锦路路9号院号院3号楼号楼1-4层网址：网址：服服务热线：400-860-8088